青藤碱抑制TNF-α诱导人脐静脉内皮细胞VCAM-1表达

目的： 研究青藤碱（SN）对肿瘤坏死因子-α（TNF-α）诱导脐静脉内皮细胞（HUVECs ）VCAM-1表达的影响。方法： 从新鲜脐带中分离培养HUVECs。用TNF-α诱导HUVECs表达VCAM-1，实验组加入不同浓度的SN(0.25、0.5和1.0 mol/L)或地塞米松（1.0×10^-6 mol/L）进行干预，培养12 h后收获细胞，用实时定量PCR检测VCAM-1 mRNA的表达，用流式细胞仪检测细胞表面VCAM-1表达。结果： TNF-α可诱导VCAM-1 mRNA和VCAM-1的表达。进行药物干预后，各干预组相对VCAM-1 mRNA表达有不同程度下降(P<0.05)。SN（1.0 mol/L）和SN（0.5 mol/L）干预组细胞表面VCAM-1表达下降(P<0.05)。SN（0.25 mol/L）和地塞米松（1.0×10^-6 mol/L）干预组未显示对TNF-α 诱导的VCAM-1表达有抑制作用。结论： SN可抑制TNF-α诱导的脐静脉内皮细胞VCAM-1的表达。     

Erk1/2失活对FGF21调节糖脂代谢调控的影响

目的:探索细胞外信号调节激酶1/2(Erk1/2)失活对成纤维细胞生长因子21(FGF21)调节机体血糖平稳及改善异常血脂的影响。方法:选取8~10周龄雄性db/db小鼠,给予Erk1/2激酶抑制剂U0126(抑制Erk1/2磷酸化,使之失活)处理1周后,再分别给予重组人FGF21蛋白和腺病毒携带的FGF21(Ad-FGF21)处理,观察120 min内及4周后小鼠血糖、血脂及其相关调控基因的变化;同时,从体外细胞培养方面探索其分子机制。结果:给予db/db小鼠重组人FGF21蛋白处理120 min能显著下调血糖和甘油三酯水平,但这与U0126处理与否无关。给予Ad-FGF21处理4周能显著改善db/db小鼠异常血糖水平及葡萄糖和胰岛素耐受能力,降低机体脂肪含量,并改善异常血清甘油三酯水平,然而,这些变化仍与U0126处理与否无关。此外,在细胞信号转导的分子机制方面,Ad-FGF21处理能显著上调皮下脂肪组织Erk1/2磷酸化活性及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)的表达水平,同时上调机体脂联素(adiponectin)mRNA及蛋白的表达水平(P0.05),但与U0126处理与否无关。在体外实验方面,FGF21处理能显著激活Erk1/2磷酸化,并上调PPARγ和adiponectin的表达水平;然而,给予U0126处理并不能抑制PPARγ和adiponectin的表达。结论:FGF21具有调节机体血糖平稳及改善异常血脂的生物学功能,但Erk1/2失活可能不影响FGF21调节血糖血脂的功能。     

CXCL16缺失缓解STZ诱导的糖尿病小鼠的肾脏病变

 目的: 探索CXCL16基因缺失对链脲佐菌素(STZ)引发的糖尿病小鼠肾脏病变的影响。方法: 选取8周龄雄性C57BL/6J CXCL16基因缺失(C16 KO)小鼠,以及相同年龄及背景的野生型(WT)小鼠,采用STZ诱导的方式,建立糖尿病小鼠模型,观察CXCL16基因缺失对糖尿病肾病发生发展的影响。结果: 在糖尿病病变方面,与STZ处理的WT小鼠相比,STZ诱导C16 KO糖尿病小鼠的空腹血糖显著降低,并且其葡萄糖耐受能力得到显著改善。在糖尿病引发的肾脏病变方面,STZ处理后,C16 KO糖尿病小鼠的尿蛋白量显著低于WT糖尿病小鼠,此外,C16 KO糖尿病小鼠的肾小球损伤也明显低于WT糖尿病小鼠。与此同时,与WT糖尿病小鼠相比,C16 KO糖尿病小鼠肾脏组织活性氧簇(ROS)、丙二醛(MDA)、氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)水平及凝集素样氧化低密度脂蛋白受体 1(Lox-1)的mRNA表达水平均显著下调。此外,在STZ处理后,C16 KO糖尿病小鼠肾组织中的巨噬细胞移动抑制因子(MIF)、炎症因子TNF-α 和IL-6以及黏附因子ICAM-1和CXCL1的mRNA表达水平均显著低于WT糖尿病小鼠。结论: CXCL16基因缺失能显著抑制STZ诱导的糖尿病小鼠肾脏病变。     

成纤细胞生长因子应用于冠心病治疗的研究现状

缺血性心脏病是当代死亡率较高的疾病之一,对人类的健康带来严重的威胁。近年来,人们发现一些生长因子有促进缺血组织的血管新生和加速侧枝循环建立的作用,为改善心肌缺血,治疗冠心病提供了新的思路和方法。本文就FCF(Fibroblast Growth Factor,FGF)的研究现状作相关的综述,国内外的实验研究表明,良好的冠脉侧枝血管可改善缺血心肌的血供,FGF对诱导缺血组织的血管再生改善血液循环具有重要的意义。     

改构aFGF在角膜内皮细胞中的分泌表达及意义

目的观察改构型人酸性成纤维细胞生长因子(m-haFGF)真核表达载体(pSecTag/m-haFGF)在培养的兔角膜内皮细胞中的分泌表达,探讨其表达产物对由生理盐水损伤的角膜内皮细胞的保护作用。方法采用脂质体转染的方法,将psecTag/m-haFGF转染培养的兔角膜内皮细胞,用免疫印迹法检测m-haFGF的表达情况,同时用生理盐水造成细胞损伤,用MTT法检测细胞存活状况。结果角膜内皮细胞在转染m-haFGF基因后能够表达目标蛋白,未转染组为阴性;MTT显示,转染后损伤的细胞存活状况明显好于未转染组(P<0.05)。结论转染pSecTag/m-haFGF能够在培养的兔角膜内皮细胞中分泌表达,其基因表达产物对生理盐水造成的角膜内皮细胞损伤具有保护作用。     

类风湿关节炎滑膜血管内皮细胞中Smoothened的表达及其意义

 目的:初步观察Sonic Hedgehog信号通路分子Smoothened（Smo）在类风湿关节炎（rheumatoid arthritis, RA）滑膜血管内皮细胞的表达及其生物学意义。方法:收集4例病情中度活动的RA患者的滑膜组织,同时收集4例外伤或半月板损伤（无关节炎）者滑膜组织作为对照组,免疫组化检测滑膜组织Smo蛋白表达情况。采用人脐静脉内皮细胞系EA.hy926作为滑膜血管内皮细胞的模型,予不同浓度肿瘤坏死因子α（TNF-α）处理,Western blotting检测Smo蛋白表达;采用RNAi技术转染体外合成的特异性Smo-siRNA,应用Western blotting检测沉默效果;转染siRNA 24 h后,经TNF-α/放线菌素D（actinomycin D, ActD）诱导细胞凋亡,CCK-8法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果:RA患者滑膜组织Smo表达高于对照组,以血管内皮细胞表达尤为明显。EA.hy926细胞经TNF-α刺激后,Smo蛋白表达上调（P<0.05）。RNA干扰EA.hy926细胞Smo表达后,细胞存活率为（24.30±0.45）%,低于阴性对照组的（36.86±0.62）%（P<0.05）,细胞凋亡率为（48.00±1.96）%,高于阴性对照组的（31.70±0.82）%（P<0.05）。结论: Smo可能参与了RA患者滑膜组织血管内皮细胞凋亡的调控。     

长期高盐饮食对小鼠血糖及粪便代谢产物的影响

目的：采用粪便代谢组学方法,探索长期高盐饮食对雄性C57BL/6J小鼠血糖的作用及机制。方法：将8只8周龄的小鼠分成2组,高盐组4只,对照组4只。对照组给予普通饲料,高盐组给予8%高盐饲料,干预22周后测量空腹血糖（FPG）,进行葡萄糖耐受试验（GTT）和胰岛素耐受试验（ITT）,并采用尾套法监测各组小鼠尾动脉收缩压和舒张压,收集小鼠粪便样本,应用液相色谱-质谱（LC-MS）联用技术进行代谢图谱分析,数据模式识别采用主成分分析（PCA）。结果：与对照组相比,高盐组小鼠体质量显著下调（P<0.01）,棕色脂肪比重显著降低（P<0.01）,FPG值显著升高（P<0.01）,GTT的曲线下面积（AUC）显著升高（P<0.05）,收缩压显著升高（P<0.05）,而舒张压及ITT的AUC差异无统计学意义（P>0.05）。代谢组学分析发现,2组小鼠粪便代谢产物主成分存在差异,可进行区分,发现并鉴定了12种潜在的生物标志物,包括3-羟基辛烷基肉碱、2-辛烯酸、地红霉素、NBD-硬脂酰-2-花生四烯醇-sn-甘油、20-乙基-前列腺素E2、甜菊苷、双哌啶、lysyl...     

系统性红斑狼疮患者CXCL16水平检测及其临床意义

目的探讨SLE患者血清CXC趋化因子配体(CXCL16)水平变化及其与SLE患者疾病活动程度之间的关系和临床意义。方法收集SLE患者20例,并随机抽取同期体检人群中性别和年龄相匹配的20名健康人为健康对照组。对2组C-肽、TG、CRP、CXCL16、补体C3水平进行比较,并与SLE活动程度进行回归分析。结果 SLE组的血清CXCL16水平明显高于健康对照组(P<0.05)。多元逐步回归分析发现C-肽、血肌酐、CRP、CXCL16、补体C3是SLE患者血清预后的独立危险因素。结论 SLE组患者血清CXCL16水平变化与狼疮活动程度密切相关,但其具体发病机制还有待进一步研究。     

类风湿关节炎患者外周血单个核细胞Sonic Hedgehog信号通路表达的初步研究

目的: 初步探讨类风湿关节炎(RA)患者外周血单个核细胞(PBMCs)和滑膜组织中Sonic Hedgehog(Shh)信号通路相关因子表达及意义。方法: 收集符合1987年美国风湿病学会(ACR)RA分类标准、28个关节疾病活动度评分(DAS28)≥3.2,病情活动RA患者(35例)及年龄、性别相匹配的健康志愿者(35例)外周血2 mL,分离PBMCs,提取总RNA,采用实时荧光定量PCR(real-time PCR)检测Shh信号通路中信号肽Shh、膜受体Ptch1和核转录因子Gli1 mRNA的表达。收集10例病情中度活动(DAS28≥3.2)RA患者的滑膜组织,同时收集5例外伤或半月板损伤(无关节炎)者滑膜组织作为对照组,免疫组化检测Shh、Ptch1和Gli1的蛋白表达情况。结果: RA患者PBMCs中Shh和Gli1 mRNA的相对表达量分别为1.36±1.48和1.15±0.68,对照组上述信号分子的mRNA表达量分别为0.47±0.25和0.49±0.05,2组差异有统计学意义(P<0.05),Ptch1 mRNA表达在2组间的差异无统计学意义(P>0.05);免疫组化示Shh和Gli1蛋白表达的阳性细胞百分率均高于对照组(P<0.05),Ptch1蛋白表达阳性细胞百分率2组无显著差异(P>0.05)。结论: RA患者PBMCs与滑膜组织中检测到Shh通路相关信号分子Shh和Gli1的表达上调,提示RA患者中可能存在Shh信号通路的激活,其在RA发病机制中的作用值得进一步研究。