新生儿手术的护理配合

新生儿由于在解剖、生理上的特殊性,在手术及麻醉配合上有其特殊性及难点,要采取相应的护理方法,确保患儿安全度过麻醉期和手术期。我科自1997年1月至2006年5月共进行274例新生儿手术,其中男婴213例,女婴61例。巨结肠根治术占11例,肠闭锁行肠切除肠吻合及肠旋转不良复位术37例,幽门环肌切开成型19例,脐膨出修补术23例,膈肌折叠术8例,食道闭锁6例,腹裂10例,肛门成型48例,横结肠造瘘术24例,剖腹探查15例,其他手术73例。所有病例采用静吸复合麻醉或静脉麻醉配合骶麻。根据新生儿的特点,按照整体护理的实施原则对患儿实施全面、系统、有针对性的…     

白细胞对早期糖尿病视网膜病变作用的研究

目的探讨白细胞在早期糖尿病大鼠视网膜毛细血管中粘附、堆积及其与视网膜微血管形态学变化的关系。方法健康成年雄性Wistar大鼠90只，随机分成正常对照组和链脲佐菌素（streptozotocin, STZ）诱导的糖尿病组各45只（3、7、14 d组各5只，30、90、180 d组各10只）。取大鼠右眼制备视网膜消化铺片，进行形态学观察及白细胞共有抗原（leukocyte common antigen, CD45）单克隆抗体免疫组织化学研究。结果正常对照组视网膜毛细血管中有少许CD45阳性细胞；糖尿病发生3 d后，CD45的表达明显增加，病程第14 d达高峰，以后基本稳定。病程90 d时，视网膜毛细血管已出现节段性膨大、囊样扩张及闭锁等形态学改变；病程180 d时，上述病变进一步加重。结论白细胞粘附发生在糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy, DR）的早期阶段，是DR在微血管水平病理变化的开端。白细胞粘附可能作为视网膜微血管形态学改变的基础，在DR的发生发展中起着重要作用。(中华眼底病杂志,2003,19:344-347)     

人三维体外血管模型的构建

目的 利用HUVEC建立人体外三维血管模型。方法原代培养HUVEC，利用Ⅰ型胶原蛋白建立三维系统，在上面培养HUVEC，随着胶原蛋白的降解，人体外三维血管模型逐渐形成，HE染色三维血管样结构。结果HUVEC成功培养，人体外三维血管模型顺利构建。结论利用Ⅰ型胶原蛋白建立的三维系统，能成功构建人体外三维血管模型。     

HESR1基因在血管新生中作用的初步研究

目的研究转录因子HESR1在血管新生中的作用。方法检测内皮细胞激活状态HESR1表达的影响,克隆HESR1基因,转染到HUVEC,绿色荧光和PCR观察HESR1在内皮细胞的表达,流式细胞仪检测它对血管内皮细胞增殖,boyden小室检测对细胞迁移的影响,建体外二维血管模型,观察HESR1对血管形成的影响。结果内皮细胞激活状态HESR1的表达下降,HESR1基因能抑制内皮细胞的增殖和迁移,减少血管新生。结论HESR1基因通过抑制内皮细胞的增殖和迁移,使内皮细胞从激活状态转入安静状态,减少血管的形成,维持血管的稳定状态。     

激活素受体样激酶1促进人脐静脉内皮细胞增殖和迁徙

目的： 研究激活素受体样激酶1（ALK1）对人脐静脉内皮细胞的作用。 方法： 体外培养人脐静脉内皮细胞（HUVECs），RT-PCR分析ALK1和ALK5在HUVEC激活状态下表达的变化。脂质体转染pcDNA3.1+ALK1到HUVECs，流式细胞仪检测HUVECs增殖的改变，boyden小室检测ALK1对HUVECs迁徙的影响。 结果： ALK1在HUVEC安静状态高表达，ALK1能促进HUVECs的增殖和迁徙。 结论： ALK1通过促进内皮细胞的增殖和迁徙在血管重塑中发挥作用。     

结膜下注射卡铂和环孢素联合治疗视网膜母细胞瘤的实验研究

【目的】观察结膜下注射卡铂治疗视网膜母细胞瘤（RB）的疗效和环孢素（CsA）对卡铂治疗RB的增效作用。【方法】40只RB成瘤裸鼠分8组（G1-G8），对照组（G1）结膜下注射生理盐水，全身用药组（G2）腹腔内注射卡铂350 μg＋环孢素1．0mg，G3～G5组及G6～G8组分别结膜下注射卡铂100、200、350 μg及卡铂100、200、350 μg＋CsA 1．0mg，每周2次共3周。每天裂隙灯观察前房肿瘤情况并照相，第6周取眼球及结膜、巩膜作病理及图像处理，计算肿瘤面积及肿瘤抑瘤率。【结果】G2、G3、G6组肿瘤生长较G1组减缓，肿瘤未能控制。G4组肿瘤生长延缓，肿瘤控制率为40％。G5及G7组肿瘤无继续增大，部分肿瘤体积减少，肿瘤控制率和治愈率为60％和20％，G8组肿瘤全部控制，肿瘤控制率和治愈率为20％和80％，肿瘤基本消失。结膜下注射部位结膜和巩膜检查未见异常。图像处理及统计学分析显示。G3、G4、G6肿瘤面积和抑瘤率与G2之间无显著性差异（P〉0．05），G5、G7、G8组肿瘤面积和抑瘤率与G2之间有显著性差异（P〈0．05）。【结论】结膜下注射卡铂能在较低剂量下抑制RB生长，加用CsA能提高卡铂治疗RB疗效。结膜下联合注射卡铂和CsA是一种安全有效的RB化疗方法。     

成人视网膜前体细胞的体外分离培养和鉴定

 【目的】对成人视网膜前体细胞进行体外分离、培养和鉴定。【方法】成人眼球12只，“机械分离联合酶消化法”分离出睫状上皮层的色素性细胞。10ng／mL碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）＋10ng／mL表皮生长因子（EGF）的无血清DMEM／F12培养液中培养，并从三方面鉴定其神经干细胞特性：A．免疫荧光染色检测神经干细胞特异性抗原神经巢蛋白Nestin的表达；B．自我更新能力：原代神经球消化传代后，继续培养观察新神经球的形成；C．多向分化潜能：原代细胞培养4～5d，改用含10mL／L胎牛血清的DMEM/F12培养液。继续培养7～10d，分别用抗神经丝蛋白（NF）抗体、抗微管相关蛋白-2（MAP2）抗体、抗胶质纤维酸性蛋白（GFAP）抗体、抗视紫质蛋白抗体、抗β-微管蛋白抗体以及抗无长突细胞特异性抗体作免疫荧光细胞染色。【结果】0．48％±0．08％（1：208）原代细胞在含bFGF＋EGF无血清培养条件下能保持增殖未分化状态。形成神经球样结构，消化传代后90．1％±8．3％的第二代细胞能重新形成新的神经球样结构，具有自我更新能力：原代及传代后的神经球均表达神经干细胞特异性抗原nestin；在含10mL／L胎牛血清的促分化培养液中。细胞分别分化为可表达神经细胞、星形神经胶质细胞和感光细胞等特异性抗原的细胞，表明具有多向分化潜能。【结论】在成人眼睫状体扁平部分离得到具有干细胞特性的视网膜前体细胞，并在体外成功进行培养鉴定。     

低氧诱导人视网膜血管内皮细胞中乙酰肝素酶和血管内皮生长因子相关性研究

目的 观察人视网膜血管内皮细胞（HREC）低氧模型中乙酰肝素酶（Hpa）、血管内皮生长因子(VEGF)和RNA 聚合酶-Ⅱ (Pol-Ⅱ)的表达变化,探讨低氧性视网膜新生血管形成中Hpa和VEGF的相关性及可能机制。方法 使用低氧模拟剂氯化钴（CoCl2）造成HREC低氧模型,分为4组,分别为正常对照组、低氧诱导组、磷酸甘露戊糖硫酸盐（PI-88）组和空白对照组。低氧诱导组为含CoCl2 100 μmol/ml的培养液培养48 h;PI-88组为含CoCl2 100 μmol/L和Hpa竞争性抑制剂PI 88 5 μg/ml的培养液干预48 h;空白对照组为等量PBS干预HREC 48 h。免疫荧光染色法观察正常对照组和低氧诱导组HREC中Hpa、VEGF以及Pol Ⅱ的表达。蛋白质免疫印迹（Western blot）检测各组间Hpa和VEGF蛋白表达变化。 结果免疫荧光染色结果显示,低氧诱导组HREC细胞质内Hpa荧光和VEGF荧光均较正常对照组增强;PI-88组细胞质内VEGF荧光较低氧诱导组减弱。低氧诱导组细胞核内Hpa较正常对照组明显增强,且分布与Pol-Ⅱ相吻合。Western blot检测结果显示,与正常对照组比较,低氧诱导组Hpa蛋白和VEGF蛋白表达均明显升高,差异有统计学意义（Hpa：F=-4.005,P＜0.05;VEGF：F=-4.063,P＜0.05）;PI-88组VEGF蛋白表达较低氧诱导组VEGF蛋白表达降低,差异有统计学意义（F=5.963,P＜0.05）。结论 低氧诱导的HREC中,Hpa的表达增高,导致VEGF的增加,促进了视网膜新生血管形成。     

Notch1蛋白在胚胎干细胞向神经细胞诱导分化过程中的表达

背景:胚胎干细胞是体内各种成熟细胞的"种子"细胞,是神经移植和发育基因功能研究的有利工具.Notch1信号足多种神经细胞有序分化的关键性调控通路,目前对其在胚胎干细胞诱导分化过程中的动态表达尚无报道.目的:探讨胚胎干细胞向神经细胞定向诱导分化过程中,跨膜信号分子Notch1蛋向的表达.设计、时间及地点:细胞观察,于2003-10/2004-10在中山大学中山眼科中心完成.材料:中山大学实验动物中心自建BALB/C小鼠胚胎干细胞Ⅵ株,具备XY染色体,正常核型比例80%以上,由中山大学中山眼科中心黄冰教授惠赠.方法:胚胎干细胞复苏后,加入含20%胎牛血清、106 IU/L小鼠白血病抑制因子的高糖DMEM细胞培养基,置于37℃,5%CO2培养箱中,两三天常规消化传代.向传至11代的胚胎干细胞中加入含20%胎牛血清、5×10-7mol/L维甲酸的高糖DMEM诱导分化培养基,设立诱导1,5,9d 3个观察时间点.主要观察指标:倒置相差显微镜观察细胞形态变化.免疫荧光化学检测成熟神经元标志性抗原MAP-2的表达.免疫细胞化学、Western Blot法及流式细胞术检测Notch1蛋白的表达.结果:胚胎干细胞呈克隆样生长,至诱导第9天大部分克隆周围为单一密集的神经网络.随着诱导时间延长,胚胎干细胞分化出的MAP-2阳性神经细胞数逐渐增多.胚胎干细胞克隆内的细胞几乎均呈Notch1强阳性或刚性表达,诱导分化后Notch1蛋白的表达随时间延长而逐渐降低(P<0.01).结论:在胚胎干细胞向神经细胞的诱导分化过程中,Notch1信号逐渐关闭,提示Notch1可能对胚胎干细胞向神经细胞的特异性分化起重要作用.     

手术室的安全管理探讨

手术室的护理安全管理是手术室业务管理的重要组成部分,是提高手术室护理质量的重要保证,手术室的护理安全直接关系到病人的生命安危,它同时也是护理质量高低最直接的体现。手术室的护理安全管理保证了手术室护理工作的稳定性及连续性,防止了护理差错事故的发生,保证了护理工作的安全,有利于提高手术室的护理工作质量。我们从建科开始就十分重视这方面的建设,并取得了良好的效果。1措施1.1加强护理安全控制质量由护理部建立护理安全质量控制网,一级安全控制由科室骨干组成,及时发现科室护理工作的问题和漏洞;并及时汇总,堵住漏洞,解决问题;…