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逆转录病毒载体介导的RNAi抑制乳腺癌细胞BSP基因表达 总被引：2，自引：0，他引：2
目的 构建抑制人BSP基因表达的RNA干扰逆转录病毒载体,筛选建立稳定抑制BSP表达的MDA-MB-231BO细胞系.方法 构建靶向人BSP基因的逆转录病毒重组质粒pSilencer-BSP27、pSilencer-BSP81和pSilencer-BSP100.将其包装成病毒后感染MDA-MB-231BO细胞.用RT-PCR和Western印迹检测成功感染细胞(231BO-BSP27、231BO-BSP81、231BO-BSP100细胞)BSP基因的抑制效果.结果 双酶切和测序结果显示重组核酸片段序列与设计的序列完全相同.RT-PCR和Western印迹结果显示231BO-BSP27、BO-BSP81和231BO-BSP100细胞BSP基因在mRNA水平和蛋白水平抑制效率分别为:70.8 %、79.4 %和30.1 %;69.3 %,75.2 %和27.8 %.结论 成功构建抑制人BSP基因表达的RNAi逆转录病毒载体pSilencer-BSP27、pSilencer-BSP81和pSilencer-BSP100.获得高效稳定抑制BSP表达的231BO-BSP27、231BO-BSP81细胞系. 相似文献
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