类风湿性关节炎患者铜蓝蛋白的变化及其临床意义

我们对类风湿性关节炎 (RA )患者的血清铜蓝蛋白 (CER )和类风湿因子 (RF)进行了定量测定 ,以期了解CER在RA病中的变化 ,并探讨了其与RF的关系及其临床意义。对象与方法1.对象 :( 1)患者组 :42例RA患者 ,年龄 2 8～ 5 8岁 ,平均年龄 ( 3 7± 13 )岁 ,根据其类风湿病的活动性分为非活动组 2 8例和活动组 14例。 ( 2 )对照组 :3 0名为健康体检者 ,年龄 2 5～60岁 ,平均年龄 ( 3 9± 14 )岁。2 .方法 :采用美国贝克曼 -库尔特 (Beckman Coulter)仪器公司出品的IMMAGE特定蛋白质仪和原装试剂测定患者组及对照组血清CER及RF的浓度。3…     

迪康胶囊对二甲基亚硝胺诱导的肝纤维化大鼠胶原表达的影响

中药制剂迪康胶囊的主要成分是三七、桃仁、白蔻仁.已有的动物实验表明,迪康胶囊具有活血作用,能明显改善小鼠的微循环状态.     

杭州地区肥胖儿童的ApoE基因HhaI酶切位点多态性研究

相关研究表明,载脂蛋白E(ApoE)基因的多态性影响血脂水平,特别是血清胆固醇水平,与儿童高血脂、冠心病(coronary heart disease,CHD)等多种疾病有关[1].我们利用PCR限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)分析技术对来我院就诊的杭州地区肥胖儿童的ApoE基因的多态性进行分析,并检测其血脂水平,以便找出其与儿童肥胖的关系.     

溶石颗粒剂对结石模型大鼠肾骨桥蛋白表达的影响

目的：通过测定用药前后肾脏骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的变化,来阐明民间验方溶石颗粒剂防治肾结石的作用机制。方法：采用乙二醇、氯化胺法致大鼠肾结石,同时每天1次ig给予溶石颗粒剂5.8,11.6,17.4 g·kg^-1,实验全程21 d。每7 d作以下测定：尿标本以EDTA法测定钙浓度,比色法测定草酸浓度；肾组织HE染色,以免疫组化法检测大鼠肾骨桥蛋白的表达。结果：模型组大鼠肾OPN的表达明显增加,与溶剂对照组相比P<0.01,其中21 d模型组OPN的表达最高,OPN的表达为溶剂对照组的1.4倍（0.281 3/0.201 8）；溶石颗粒剂各剂量组均能明显抑制大鼠肾结石模型OPN的表达（P<0.05）,且呈现明显的量效关系；溶石颗粒剂各剂量组能减轻大鼠肾脏草酸钙结晶程度,显著降低大鼠尿钙和草酸浓度(P<0.01)。结论：溶石颗粒剂可以抑制大鼠肾结石模型中OPN的表达。     

大鼠BMP-7重组腺病毒构建及在肾小管上皮细胞中表达

目的:利用AdEasy~(TM) system构建携带大鼠BMP-7基因的重组腺病毒,并鉴定其在原代肾小管上皮细胞中的表达.方法:将BMP-7全长序列分为46个片段分段合成,再采用PCR方法将合成的46个寡核苷酸片段拼接成BMP-7基因,并克隆到测序载体中测序鉴定.经Not I和Hind Ⅲ双酶切后接入pShuttle-CMV穿梭载体,构建重组腺病毒的穿梭质粒pShuttle-BMP-7.EcoRI酶切重组pShuttle-BMP-7,与pAdEasy~(TM)DNA电穿孔共转化BJ5183感受态菌, 抽提重组AdBMP-7质粒,PacI酶切线性化重组质粒AdBMP-7后,转染Ad293细胞进行病毒包装和扩增,腺病毒荧光检测试剂盒测定其滴度.用AdBMP-7感染大鼠肾小管上皮细胞,以ELISA法和Western-blot法检测BMP(-7)在大鼠肾小管上皮细胞中的表达.RT-PCR方法检测α-SMA mRNA的表达水平,以鉴定重组腺病毒AdBMP-7的生物学活性.结果:构建了BMP-7基因的重组腺病毒载体,并制备出高滴度重组腺病毒保存液.该重组腺病毒在体外能有效转染大鼠肾小管上皮细胞并高表达BMP-7蛋白,所表达的BMP-7蛋白能有效逆转由TGF-β1诱导的α-SMA表达增高.结论:成功地构建了携带大鼠BMP-7基因的重组腺病毒,并初步证实其具有一定的抗肾纤维化功能.     

实时荧光PCR快速检测嗜肺军团菌的研究

目的 建立TaqMan-MGB探针实时荧光PCR快速检测嗜肺军团菌技术,为临床和环境样品检测嗜肺军团菌提供可实用工具.方法 在对嗜肺军团菌mip序列进行分析、比较基础上,设计一对特异性引物和TaqMan-MGB探针,通过实时荧光PCR反应条件和反应体系的优化,实现对嗜肺军团菌的快速检测;用克隆到pMD-19T载体上的嗜肺军团菌mip基因阳参片段和不同菌株验证方法的敏感性和特异性.结果 当用热裂解法提取DNA,25μl的反应体系中包括上、下游引物(20μmol/L)各0.6μl,探针(20μmol/L)0.4μl,模板DNA 6.0μl,反应条件为预变95℃20 S,变性95℃10 s,退火50℃ 40 s,40个循环时,TaqMan-MGB探针实时荧光PCR技术对嗜肺军团菌mip基因阳参片段最低检测浓度为0.71拷贝/μl,其循环阈值(Ct值)与模板浓度具有极好的对应关系(r=0.999);1株嗜肺军团菌标准株、12株嗜肺军团菌分离株的Ct值在13.23～16.04之间,而包括金黄葡萄球菌、鼠伤寒沙门菌、副溶血性弧菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、痢疾志贺菌共计76株其他菌PCR Ct值均大于30;整个检测过程仅需1.5 h.结论 TaqMan-MGB探针的嗜肺军团菌实时荧光PCR检测方法具有特异性和敏感性、易操作、结果准确可靠等优点,可用于嗜肺军团菌检测.     

应用ROC曲线分析评价环瓜氨酸肽抗体对类风湿关节炎的诊断价值

类风湿关节炎(rheumatoidarthritis,RA)是一种致畸 性疾病,采用环瓜氨酸肽为抗原建立的酶联免疫吸附试 验(ELISA)检测RA的抗环瓜氨酸肽(抗 CCP),敏感性和 特异性均较用直链线性瓜氨酸肽为抗原有明显提高,然 而抗 CCP临床诊断准确性如何,国内报道很少。我们通 过观察RA患者和非RA人员血清抗 CCP和类风湿因子 (RF)水平,经受试者工作特性曲线(receiveroperating characteristiccurve,ROC曲线)分析比较,以探讨其临床诊 断价值。 一、材料和方法 1.研究对象　RA组:经确诊为RA患者52例,年龄 25～59岁;非RA组:共73例,年龄20…     

血清转氨酶异常的乙型肝炎患者外周血大颗粒淋巴细胞的观察

大颗粒淋巴细胞（1arge granular lymphocytes，LGL）在外周血淋巴细胞中约占5％～15％，经瑞氏染色，为一种细胞浆丰富，胞浆内含有大小不等（或粗或细）、数量不一、紫红色嗜天青颗粒的大型成熟淋巴细胞，该细胞的直径为12～15。目前认为自然杀伤细胞（NK细胞）和杀伤细胞（K细胞）均属于大颗粒淋巴细胞，此类细胞具有杀伤靶细胞的细胞毒作用，其数量的多少及功能状态可直接反映宿主机体的免疫应答状况，在免疫监测和免疫防御中起着重要作用。近年来NK细胞在抗病毒感染，特别是在乙型肝炎病毒感染中的作用受到重视，它参与构成抗肿瘤成长和病毒感染的第一道防线。     

脑梗死患者血浆中神经肽Y的变化及临床意义

神经肽Ｙ（ＮｅｕｒｏｐｅｐｔｉｄｅＹ,ＮＰＹ）是一种含３６个氨基酸残基的多肽,结构与消化道激素多肽ＹＹ（ＰＹＹ）和胰多肽（ＰＰ）非常相似［１］。广泛分布于哺乳动物的神经系统及外周很多器官,主要作用于心血管系统,并在交感神经兴奋或应激时释放。ＮＰＹ也存在于心脏和肾上腺嗜铬细胞中,Ｅｒｉｃｓｏｎ等［２］发现大鼠的巨噬细胞能合成ＮＰＹ,并储存于血小板中,在血小板聚集时释放。ＮＰＹ有强烈的缩血管作用,在脑血管疾病时有重要意义。本研究采集脑梗死患者静脉血,测定其中的ＮＰＹ含量,以期了解ＮＰＹ在脑梗死发作中…