胃疾病中幽门螺杆菌细胞毒相关基因A和E与白细胞介素-8相关性研究

幽门螺杆菌 (Helicobacterpylori,Hp)是一种革兰染色阴性 ,呈弧形、S型或海鸥状的微需氧菌 ,专性定植于人胃黏膜上皮表面。Hp普遍被认为是慢性胃炎、胃溃疡、胃癌及胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤的致病因子 ,但其确切的致病机制尚未阐明。目前多数学者认为 ,Hp感染所致的胃组织损伤程度及临床症状的严重程度同Hp菌株的毒力相关。细胞毒相关基因A(cytotoxinassociationgeneA ,CagA)及Cag毒力岛 (Cagpathogenicityisland ,CagPAI)是目前Hp致病机制研究的热点。经典的观点认为 ,CagA基因阳性菌株诱导胃黏膜上皮细胞分泌白细胞介素 (IL) 8…     

溃疡性结肠炎患者应用中医序贯疗法的效果分析

目的：探讨分析应用中医序贯疗法治疗溃疡性结肠炎患者的效果.方法：以我院2010年3月-2013年3月间,收治的70例溃疡性结肠炎患者为研究对象,随机分为观察组与对照组,各35例,观察组先进行湿热内蕴证清肠化湿,待病情缓解,应用中医序贯法进行清肠扶正治疗;对照组应用美沙拉秦进行治疗,比较两组患者临床疗效.结果：观察组患者治疗总有效率（91.4%）高于治疗组总有效率（71.4%）,观察组患者不良反应发生率（2.9%）低于对照组患者（20.0%）,观察组患者复发率（8.6%）低于对照组（34.3%）,以上结果其差异均具有统计学意义（P〈0.05）.结论：中医序贯疗法可以有效提高溃疡性结肠炎患者的临床治疗效果,改善患者临床症状,不良反应少,安全性较好,并且标本兼治,复发率低,值得应用推广.     

肿瘤模型中B7-H4和BTLA的异常表达

目的:通过检测肿瘤组织和肿瘤抗原诱导的小鼠脾脏巨噬细胞B7-H4表达、同时检测荷瘤小鼠T细胞BTLA的表达,以进一步探讨这一对新的负免疫调节分子在肿瘤免疫逃逸机制中的作用。方法:应用RT-PCR检测体外培养肿瘤细胞株3LL和Renca、荷瘤后小鼠肿瘤组织B7-H4mRNA以及荷瘤小鼠T细胞BTLA mRNA表达的改变;应用流式细胞术检测荷瘤小鼠脾脏巨噬细胞和肿瘤可溶性抗原诱导的正常小鼠脾脏巨噬细胞B7-H4表面蛋白表达的改变;应用免疫组化技术检测荷瘤后小鼠肿瘤组织B7-H4表面蛋白表达的改变。结果:在体外培养的肿瘤细胞株3LL和Renca上未检测到B7-H4mRNA的表达,小鼠成瘤后肿瘤组织和脾脏巨噬细胞在mRNA水平和蛋白质水平上均高表达B7-H4。另外荷瘤小鼠的T细胞较正常小鼠T细胞BTLA的表达明显增高。在体外肿瘤抗原刺激下,正常小鼠脾脏巨噬细胞B7-H4表达量明显上升;而用正常同样组织来源抗原刺激时,正常小鼠脾脏巨噬细胞B7-H4表达量未见显著改变。结论:B7-H4和BTLA这对协同刺激分子的异常表达可能在肿瘤逃逸免疫应答过程中起调节作用。     

IP10对机体抗肿瘤免疫应答的增强作用及其机制

目的：研究IP10对机体整体及肿瘤局部细胞免疫应答的影响，从而探讨其抗肿瘤的作用及机制。方法：基因转染的方法建立稳定表达IP10的4T1细胞株（IP10-4T1）。观察IP10-4T1细胞生长情况，观察荷瘤小鼠的生存情况。^3H-TdR掺入法检测细胞免疫应答水平。Ficoll密度梯度离心法分离肿瘤浸润淋巴细胞，流式细胞技术检测CXCR3的表达。结果：pcDNA3-IP10转染不影响4T1细胞体外生长。IP10-4T1形成的肿瘤生长明显减慢，瘤重显著减轻，该荷瘤小鼠生存率显著增加（P〈0.05）。与对照组比较，IP10-4T1细胞免疫的小鼠脾细胞特异性增殖反应明显（P〈0．05）。IP10-4T1细胞形成的肿瘤内CXCR3^＋细胞浸润增加，肿瘤内分离的淋巴细胞抗原刺激后显著增殖（P〈0．05）。结论：IP10可能通过诱导机体细胞免疫应答、促进肿瘤内淋巴细胞浸润并增强肿瘤内淋巴细胞增殖活性介导抗肿瘤作用。     

小青龙汤加减辅助治疗老年慢性喘息型支气管炎急性发作期疗效的影响

目的观察小青龙汤加减对改善老年慢性喘息型支气管炎患者急性发作期症状的效果,探讨小青龙汤在老年慢性喘息型支气管炎急性发作期治疗中的应用价值。方法以2011-07-2013-07间在我院收治的60例老年慢性喘息型支气管炎急性发作期患者为研究对象。将其随机分入观察组和对照组接受治疗,每组各30例患者。给予对照组患者常规西药治疗,观察组患者在对照组患者治疗基础上接受中药煎剂小青龙汤加减辅助治疗。治疗10 d后,对比分析两组患者在治疗效果方面的差异。结果观察组患者治疗效果为显效和好转的例数多于对照组,总有效率较高,经χ2检验,组间差异有统计学意义（P〈0.05）;观察组患者症状缓解时间、体征消失时间、血氧饱和度（SPO2）恢复正常时间、住院天数均短于对照组,经t检验,组间差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论小青龙汤加减用于老年慢性喘息型支气管炎急性发作期患者的治疗,可明显改善患者症状、体征及血氧饱和度,缩短住院时间。     

ITAC转染乳腺癌细胞系4T1的体内外生物学行为研究

目的:观察转染ITAC对乳腺癌细胞系4T1体内及体外生物学行为的影响。方法:构建pcDNA3-ITAC真核表达质粒,基因转染的方法建立稳定表达ITAC的乳腺癌细胞系ITAC-4T1。体外及体内观察ITAC-4T1细胞的生长情况。RT-PCR检测肿瘤组织ITACmRNA转录水平。杀伤实验检测脾细胞杀伤活性,FACS检测CD8 T细胞IFN-γ的分泌。结果:体外ITAC-4T1细胞的生长与未转染及转染空载体的4T1细胞没有差别(P>0.05)。体内ITAC-4T1细胞形成的肿瘤生长较对照组明显减慢(P<0.05)。ITAC-4T1肿瘤组织检测到较高水平的ITACmRNA转录(P<0.01)。接种ITAC-4T1细胞的小鼠脾细胞杀伤率显著高于对照组(P<0.05),CD8 T细胞IFN-γ分泌明显增加(P<0.05)。结论:ITAC基因转染可以抑制4T1细胞体内生长,与ITAC诱导Th1型细胞免疫应答,增强效应细胞特异性杀伤活性相关。     

ITAC介导的T细胞跨血管内皮迁移及其后续事件

ITAC是ELR基序阴性的CXC亚家族趋化因子,ITAC通过趋化并活化表达CXCR3的细胞发挥免疫调节作用,并能介导T细胞跨血管内皮迁移,从而在局部组织浸润。ITAC与Thl型炎症疾病、自身免疫病、移植排斥及肿瘤的发生和发展相关。ITAC有望成为治疗这类疾病的靶分子。     

HIPK2在IL-2撤除诱导T细胞凋亡中的作用

目的 研究同源结构域相关的蛋白激酶2（homeodomain-interacting protein kinase 2,HIPK2）在白介素2（interleukin 2,IL-2）撤除诱导的T细胞凋亡中的表达及其作用.方法 IL-2依赖性的T细胞株（CTLL-2）,撤除IL-2后可诱导凋亡.运用PI染色和DNA凝胶电泳检测细胞凋亡,实时定量RT-PCR检测HIPK2及其他细胞凋亡相关基因的表达.通过反义技术下调HIPK2的表达,观察HIPK2在IL-2撤除诱导的T细胞凋亡中的作用.结果 随IL-2撤除时间延长,CTLL-2细胞凋亡率增加,细胞基因组DNA发生了明显片段化.参与死亡受体凋亡途径的基因FasL和Fas表达没有明显改变（P＞0.05）,Bcl-2家族中促凋亡基因Bim表达明显上调（P＜0.01）,抗凋亡基因Bcl-xL表达明显下调（P＜0.05）,HIPK2表达明显上调（P＜0.05）.下调HIPK2的表达可以显著降低CTLL-2在IL-2撤除后的细胞凋亡率（P＜0.01）,促凋亡基因Bim的表达被显著下调（P＜0.01）,而抗凋亡基因Bcl-xL明显上调（P＜0.05）.结论 HIPK2可以促进IL-2撤除诱导的CTLL-2 T细胞凋亡,这种作用可能与HIPK2上调促凋亡基因Bim和下调抗凋亡基因Bcl-xL的表达相关.     

ALD-DNA对巨噬细胞株RAW264.7的刺激作用

目的 体外观察Con A活化淋巴细胞来源的DNA（ALD-DNA）对BALB／c小鼠巨噬细胞株RAW264．7的刺激作用。方法 将ALD-DNA及未活化淋巴细胞来源的DNA（UnALD-DNA）分别与BALB／c小鼠来源的巨噬细胞株RAw264．7孵育48h,然后以四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞的增殖情况,流式细胞仪测定细胞表面分子的表达,ELISA检测白细胞介素6（IL-6）、白细胞介素12（IL-12）和肿瘤坏死因子α（TNF-α）的分泌情况。结果 ALD—DNA在体外能够明显刺激细胞发生增殖,上调细胞表面主要组织相容性复合体（MHC）Ⅱ类分子以及共刺激分子CD40、CD80和CD86的表达,并能够诱导细胞分泌IL-6、IL-12和TNF-α 。结论 ALD-DNA对RAW264．7细胞具有免疫刺激作用。