褪黑素减轻浸水-束缚应激大鼠胃黏膜损伤

目的探讨褪黑素(MT)对大鼠应激性胃溃疡的保护作用及对胃黏膜MMP-9、MMP-2和TIMP-2表达的影响。方法用浸水-束缚应激(WIRS)建立大鼠应激性溃疡模型。应激前30 min,分别腹腔注射褪黑素10、20、40和60 mg/kg。应激3 h后,观察大鼠胃黏膜病变,对溃疡指数(UI)进行评分;组织学观察胃出血;用real-time PCR及Western blot检测胃黏膜MMP-9、MMP-2和TIMP-2的mRNA及蛋白表达。结果 WIRS应激3 h能成功诱导大鼠应激性胃溃疡。预先注射MT可明显降低应激性胃溃疡大鼠的UI(P0.01),明显降低黏膜层炎性细胞浸润数(P0.01)。WIRS诱导大鼠胃黏膜MMP-9和MMP-2 mRNA和蛋白表达上调(P0.01),TIMP-2则下降;MT预处理后,MMP-2/MMP-9明显下降(P0.05或P0.01);而TIMP-2的mRNA及蛋白表达增加(P0.05或P0.01)。结论MT可能通过下调MMP-9和MMP-2表达,及增加TIMP-2表达,减轻WIRS诱导的大鼠应激性胃溃疡。     

高清胃镜下早期胃癌筛检策略的单中心前瞻性研究

目的　验证高清胃镜下早期胃癌筛检策略的效能。方法　前瞻性纳入2018年12月—2019年1月在解放军总医院第七医学中心行胃镜检查的849例年龄≥35岁的患者。在胃镜检查时,从未感染过幽门螺杆菌者对任何可疑病灶活检;溃疡型病灶于溃疡边缘活检;萎缩区域外,贲门部对白光下呈红色的病灶活检,非贲门部对具有清晰边界或白光下呈白色的病灶活检;萎缩区域内,隆起型病灶中具有清晰边界或顶部有不规则凹陷者活检,平坦/凹陷型病灶中边界不规则或窄带光下呈赭色者活检。此外,可对不符合上述策略但认为有必要活检的任何病灶进行活检。其后根据活检或手术病理,对胃癌高危患者进行胃镜随访,分析该策略对胃部早期肿瘤性病变的检出及漏诊情况,明确该策略的敏感度和阳性预测值。结果　共对548例患者的781处病灶进行了活检。在符合上述策略的327处病灶中,诊断上皮肿瘤性病灶16处（4.9%,16/327）,其中高级别肿瘤10处（3.1%,10/327）;而在不符合上述策略的454处病灶中,诊断上皮肿瘤性病灶仅1处（0.2%,1/454）,无高级别肿瘤。该筛检策略对胃上皮肿瘤性病灶和高级别肿瘤的阳性预测值均高于不符合策略而取活检者（4.9%比0.2%,χ2=19.49,P<0.001;3.1%比0,P<0.001）。共有146例（17.2%,146/849）患者接受胃镜随访,随访中发现2处黏膜内高级别肿瘤,符合筛检策略。该筛检策略在初次胃镜检查中检出了84.2%（16/19）的上皮肿瘤性病灶和83.3%（10/12）的高级别肿瘤。结论　高清胃镜下早期胃癌筛检策略可以高效地检出早期胃癌。     

Bmi1基因在内皮细胞促进胶质瘤细胞干性表型中的作用

目的 探讨B细胞特异的莫洛尼病毒插入位点1(Bmi1)基因在内皮细胞促进胶质瘤细胞干性表型中的可能作用.方法 以小鼠胶质瘤细胞系GL261和小鼠脑内皮细胞系b.END3为材料,采用Transwell双室细胞共培养、极限稀释法成球实验、实时定量PCR、Western印迹、流式细胞术、体内移植瘤实验以及siRNA基因干扰等方法,检测内皮细胞对胶质瘤细胞体外成球能力和体内成瘤能力、CD133阳性细胞比例、Bmi1基因表达的影响以及抑制Bmi1基因表达对上述现象的影响.结果 与胶质瘤细胞单独培养的对照组相比:(1)胶质瘤细胞与内皮细胞共培养后其体外成球能力明显增强,形成干细胞球数目明显增多(40个细胞/孔的浓度时为62.5％±1.5％比25.0％±4.6％,P=0.000),体积明显增大;内皮细胞与胶质瘤细胞共同移植后所形成的移植瘤出现早、体积更大[(0.798±0.297)比(0.362±0.123) cm3,P=0.000].(2)胶质瘤细胞与内皮细胞共培养后其CD133阳性细胞群比例增大(8.48％±0.78％比4.81％±0.37％,P=0.000).(3)胶质瘤细胞与内皮细胞共培养后Bmi1基因的mRNA(2.72±0.18比1.00±0.15,P=0.000)和蛋白表达明显增加.(4)利用siRNA干扰胶质瘤细胞Bmi1基因表达后,内皮细胞促进胶质瘤细胞干性表型的上述作用明显减弱,敲低Bmi1基因的GL261细胞共培养的CD133阳性比例显著低于共培养的普通GL261细胞(0.34％±0.21％比1.70％ ±0.69％,P=0.025).结论 内皮细胞可能通过上调胶质瘤细胞Bmi1基因表达促进胶质瘤细胞的干性表型.     

正念主体性对医学生日常成功行为和生涯成熟度的中介效应分析

目的 探究医学生日常成功行为对生涯成熟度的影响,以及正念主体性在日常成功行为和生涯成熟度中的中介作用。方法 便利抽样法选取长沙医学院临床医学专业的1312名医学生为研究对象,采用问卷法对其日常成功行为、生涯成熟度以及正念主体性进行调查。结果 (1)日常成功行为、正念主体性与生涯成熟度间均存在显著正相关(P<0.05);(2)日常成功行为和正念主体性对生涯成熟度有直接正向预测作用;(3)日常成功行为既可以直接影响大学生的生涯成熟度,也可以通过正念主体性的中介作用对生涯成熟度产生影响。结论 正念主体性在日常成功行为与生涯成熟度间起部分中介作用。     

外周血SEPT9基因甲基化检测在老年结直肠癌筛查中的意义

目的探讨外周血SEPT9基因甲基化检测在老年结直肠癌筛查中的意义。方法筛查对象为1 407例军队退休干部体检者。IFOBT、TF、SEPT9基因甲基化检测三者任一结果为阳性,通知受试者行结肠镜检查。分别计算IFOBT、TF、IFOBT+TF(双联)、SEPT9基因甲基化检测和三者联合检测在老年结直肠癌筛查的性能指标。结果 1 407例军队退休干部体检者中1 369例体检者均进行了TF、IFOBT和SEPT9基因甲基化检测,至少1项结果为阳性者有176例(12.9%),其中96例(54.5%)接受了结肠镜检查,共检出9例结直肠癌和15例进展性腺瘤。使用IFOBT、TF、IFOBT+TF(双联)检测、SEPT9基因甲基化和三种方法联合检测对结直肠癌和进展期腺瘤的检出率分别为0.4%、0.1%、0.5%、1.2%、1.8%;SEPT9基因甲基化检测对结直肠癌和进展期腺瘤的检出率优于IFOBT+TF(双联)(1.2%vs 0.5%,P=0.04),但三者联合检出率较单纯SEPT9基因甲基化检测,差异无统计学意义(1.8%vs 1.2%,P=0.27),对筛查对象进行性别和年龄分层分析显示,各项检测指标男女差别不大,但SEPT9基因甲基化检测在70岁以上患者中筛查优势明显。结论 SEPT9基因甲基化是一种简单无创的结直肠癌筛查新技术,单独使用对结直肠癌和腺瘤的检出率显著高于IFOBT和TF联合检测,因此SEPT9基因甲基化检测可作为老年人结直肠癌早期筛查的首选策略。     

旋毛虫成虫排泄?分泌蛋白对卵清蛋白诱导的小鼠变应性鼻炎的保护作用

目的　探讨旋毛虫成虫排泄?分泌蛋白（Adult?worm excretory?secretory protein, AES）对卵清蛋白（Ovalbumin, OVA）诱导的小鼠变应性鼻炎的保护作用。方法　18只雌性BALB/c小鼠随机分为3组：A组为空白对照组，B组为变应性鼻炎组，C组为AES治疗组。A组小鼠给予PBS；B组小鼠经腹腔注射抗原佐剂混悬液进行基础致敏，隔日1次，共7次，后以5% OVA溶液滴鼻进行局部激发，每日1次，共7次，诱导建立变应性鼻炎模型；C组小鼠在诱导变应性鼻炎基础上，于基础致敏和局部激发时分别加入25 μg AES进行干预。末次激发后观察各组小鼠30 min，并进行行为学评分；采用酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中IFN?γ、IL?4、IL?5、IL?10及TGF?β水平变化，HE染色后镜下观察小鼠鼻黏膜病理改变。结果　3组小鼠行为学评分差异有统计学意义（F = 110.12, P < 0.01）；B组小鼠行为学评分显著高于A组[（7.17 ± 0.75）分和（1.33 ± 0.52）分，P < 0.01]，且鼻黏膜病理损伤更为显著；经AES治疗后，C组小鼠行为学评分[（3.83 ± 0.75）分]显著下降（P < 0.01），鼻黏膜病理损伤亦显著缓解。3组小鼠血清中IFN?γ水平差异有统计学意义（F = 7.50，P < 0.01），B组小鼠血清中IFN?γ水平显著低于A组（P < 0.05）；经AES治疗后，C组小鼠血清中IFN?γ水平较B组显著升高（P < 0.05）。3组小鼠血清中IL?4 （F = 470.81，P < 0.01）、IL?5水平（F = 68.20，P < 0.01）差异均有统计学意义，B组小鼠血清中IL?4、IL?5水平均显著高于A组（P均 < 0.01）；经AES治疗后，C组小鼠血清中IL?4、IL?5水平均较B组显著降低（P均 < 0.01）。3组小鼠血清中IL?10（F = 174.91，P < 0.01）、TGF?β水平（F = 9.39，P < 0.01）差异均有统计学意义；经AES治疗后，C组小鼠血清中IL?10、TGF?β水平均显著高于B组（P均 < 0.05）。结论　旋毛虫AES对OVA诱导的小鼠变应性鼻炎有显著的保护作用。     

口腔慢性移植物抗宿主病患者唾液中CXCL9、CCL17水平及临床意义

目的 探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后发生口腔慢性移植物抗宿主病(cGVHD)患者唾液中CXC-趋化因子配体9(CXCL9)、CC类趋化因子17(CCL17)表达及临床意义。方法 选择2017年3月—2021年5月贵州医科大学附属医院收治的98例接受allo-HSCT治疗的患者,其中36例发生口腔cGVHD(口腔cGVHD组),余27例cGVHD未累及口腔(其它cGVHD组),35例未发生cGVHD(非cGVHD组)。另选择25例体检健康志愿者为对照组。根据口腔表征评分将口腔cGVHD患者分为轻度组(12例)、中度组(13例)、重度组(11例)。检测唾液中CXCL9、CCL17水平,Spearman分析CXCL9、CCL17与口腔表征评分分级的相关性,受试者工作特征曲线(ROC)分析CXCL9、CCL17诊断口腔cGVHD的价值。结果 与其它cGVHD组、非cGVHD组、对照组比较,口腔cGVHD组唾液中CXCL9、CCL17水平均明显升高(F=110.610、233.494,P<0.05)。重度组唾液中CXCL9、CCL17水平高于中度组和轻度组,且中度组高于轻...     

人食管鳞癌细胞系EC109中肿瘤干细胞的分离（富集）与鉴定

目的运用无血清成球培养法从人食管鳞癌细胞系EC109中分离/富集肿瘤干细胞,并对其＂干性＂特性进行鉴定。方法将EC109细胞接种至添加1XB27的干细胞培养基（DMEM/F12 1：1,无血清）,于poly-Hema包被的培养皿或低黏附培养板中培养,获取细胞球。采用实时定量PCR方法检测其干性相关转录因子的基因表达,连续传代和平板克隆形成实验评价其自我更新能力,免疫荧光细胞化学法检测其分化前后干性相关转录因子和分化标志物的表达变化,以裸鼠移植瘤实验检测其体内成瘤能力。结果培养5d能获得EC109细胞的细胞球。细胞球细胞高表达Oct4等干性相关转录因子,具有自我更新能力、分化潜能。裸鼠体内1×104个细胞球细胞能启动肿瘤形成,而单层培养细胞则需要1×105个细胞,且同数量级的细胞球细胞较单层培养细胞所形成的肿瘤体积大。结论无血清成球培养法能从食管鳞癌细胞系EC109获得细胞球,细胞球富集了肿瘤干细胞。     

旋毛虫成虫排泄?分泌蛋白对卵清蛋白诱导的小鼠变应性鼻炎的保护作用

目的　探讨旋毛虫成虫排泄?分泌蛋白（Adult?worm excretory?secretory protein, AES）对卵清蛋白（Ovalbumin, OVA）诱导的小鼠变应性鼻炎的保护作用。方法　18只雌性BALB/c小鼠随机分为3组：A组为空白对照组,B组为变应性鼻炎组,C组为AES治疗组。A组小鼠给予PBS;B组小鼠经腹腔注射抗原佐剂混悬液进行基础致敏,隔日1次,共7次,后以5% OVA溶液滴鼻进行局部激发,每日1次,共7次,诱导建立变应性鼻炎模型;C组小鼠在诱导变应性鼻炎基础上,于基础致敏和局部激发时分别加入25 μg AES进行干预。末次激发后观察各组小鼠30 min,并进行行为学评分;采用酶联免疫吸附试验检测小鼠血清中IFN?γ、IL?4、IL?5、IL?10及TGF?β水平变化,HE染色后镜下观察小鼠鼻黏膜病理改变。结果　3组小鼠行为学评分差异有统计学意义（F = 110.12, P < 0.01）;B组小鼠行为学评分显著高于A组[（7.17 ± 0.75）分和（1.33 ± 0.52）分,P < 0.01],且鼻黏膜病理损伤更为显著;经AES治疗后,C组小鼠行为学评分[（3.83 ± 0.75）分]显著下降（P < 0.01）,鼻黏膜病理损伤亦显著缓解。3组小鼠血清中IFN?γ水平差异有统计学意义（F = 7.50,P < 0.01）,B组小鼠血清中IFN?γ水平显著低于A组（P < 0.05）;经AES治疗后,C组小鼠血清中IFN?γ水平较B组显著升高（P < 0.05）。3组小鼠血清中IL?4 （F = 470.81,P < 0.01）、IL?5水平（F = 68.20,P < 0.01）差异均有统计学意义,B组小鼠血清中IL?4、IL?5水平均显著高于A组（P均 < 0.01）;经AES治疗后,C组小鼠血清中IL?4、IL?5水平均较B组显著降低（P均 < 0.01）。3组小鼠血清中IL?10（F = 174.91,P < 0.01）、TGF?β水平（F = 9.39,P < 0.01）差异均有统计学意义;经AES治疗后,C组小鼠血清中IL?10、TGF?β水平均显著高于B组（P均 < 0.05）。结论　旋毛虫AES对OVA诱导的小鼠变应性鼻炎有显著的保护作用。     

幽门螺杆菌阴性早期胃癌的内镜及组织学 特点分析

目的分析并总结幽门螺杆菌（Helicobacter pylori, HP）阴性早期胃癌或高级别上皮内瘤变的内镜及组织学特点。方法检索在解放军总医院第七医学中心2013年1月—2020年1月诊断为早期胃癌或高级别上皮内瘤变的患者,按照HP阴性胃癌诊断标准纳入病例,回顾性分析其临床特点、内镜下表现及组织病理学特点。结果469处早期胃癌/高级别上皮内瘤变中共有10处（21%）HP阴性早期胃癌/高级别上皮内瘤变,其中包括3处印戒细胞癌,3处胃底腺型胃癌,1处胃小凹上皮型腺癌,1处贲门部高级别上皮内瘤变,1处家族性腺瘤性息肉病并发胃高级别上皮内瘤变,及1处Lynch综合征并发胃高级别上皮内瘤变。3处印戒细胞癌内镜下形态均为发白的平坦/凹陷病变,胃下部多见（2/3）。分化型早期胃癌/高级别上皮内瘤变7处,多位于胃中上部（6/7）,隆起型病变（5/7）多见。结论HP阴性早期胃癌或高级别上皮内瘤变内镜常表现为孤立性病灶,其中未分化型癌多表现为胃下部的发白平坦/凹陷病变,而分化型多表现为胃中上部的隆起型病变。