利用表型筛选法测定整合子对耐药性基因盒的整合频率

目的 建立一种利用表型筛选的方法来测定整合子对耐药性基因盒的整合频率. 方法 将整合子和aadA2耐药性基因盒克隆到同一质粒pACYCl84的不同位点,该重组质粒和高表达整合酶的重组质粒分别转化大肠杆菌BL21(DE3),挑选阳性克隆过夜培养后,取适量菌液涂布含有链霉素的LB琼脂平板,同时取适量菌液涂布不含链霉素的LB琼脂平板,过夜培养后计数菌落个数,用以计算整合频率.同时以链霉素平板上的阳性克隆为模板,进行PCR扩增.对扩增产物切胶回收纯化,然后进行测序,以确定aadA2耐药性基因盒整合位点. 结果 在大肠杆菌BL21(DE3)宿主中,整合子对aadA2耐药性基因盒的整合频率为1.1×103,主要的整合位点为attI. 结论 该系统可以用于整合子对基因盒捕获频率的测定.     

杨泽华从痰瘀论治眩晕的经验

杨泽华教授认为现代眩晕发病的病机重在痰瘀互结。临床上可见先痰而后瘀或先瘀而后痰的病理改变。在辨证中重视探求病因,辨析痰瘀同病是由痰致瘀,还是由瘀致痰,明辨痰瘀的主次轻重,以此决定治疗方向;眩晕从痰瘀论治,临证根据痰瘀为病的先后主次以及轻重缓急,以化痰健脾、活血化瘀为总则,辅以调理气机,根据不同病因兼以平肝潜阳、滋养肝肾、补益气血等法,常可取得较好疗效。     

ACE基因多态性人群分布及其在原发性高血压中的高表达研究

目的探讨血管紧张素Ⅰ转换酶(ACE)基因多态性人群分布及其在原发性高血压中的作用。方法选择2017年11月—2018年5月山西省心血管病医院收治的50例原发性高血压患者作为原发性高血压组,另选择同期体检的50例健康体检者作为健康对照组。检测所有研究对象的ACE基因插入/缺失(I/D)多态性,观察所有数据并进行分析。结果健康对照组基因型以I I型居多,而原发性高血压组以DD型居多。原发性高血压组的DD基因型频率[42%(21/50)比24%(12/50),χ~2=5.09]和D等位基因频率均明显高于健康对照组[58%(58/100)比42%(42/100),χ~2=2.56,均P0.05]。结论 ACE的D等位基因与原发性高血压有关,ACE多态性基因位点检测可为临床用药提供参考。     

膀胱移行细胞癌A激酶锚定蛋白12基因转录表达与其启动子区甲基化状态的相关性

目的 探讨膀胱移行细胞癌组织中A激酶锚定蛋白12(A-kinase anchoring protein 12,AKAP12)基因mRNA表达水平和基因启动子区CpG岛甲基化程度及其与临床病理参数之间的关系.方法 用荧光定量逆转录PCR(FQ-RT-PCR)和甲基化特异性PCR(MSP)检测30份膀胱移行细胞癌组织及其癌旁组织中AKAP12基因mRNA的表达水平及其启动子区CpG岛甲基化状态.并用亚硫酸盐修饰后PCR产物进行克隆测序.结果 在30份膀胱移行细胞癌患者组织标本中,AKAP12在癌组织中表达下调比率为73.3%(22/30),在病理Ⅱ和Ⅲ级膀胱移行细胞癌中下调比率明显高于Ⅰ级(P=0.02).MSP检测结果显示,膀胱移行细胞癌甲基化比率为53.3%(16/30),且与膀胱移行细胞癌TNM分期(r=0.52,Pn=0.03)和病理分级(r=0.61,Pn=0.01)有明显的相关性.结论 AKAP12基因启动子区出现的异常甲基化可导致其在膀胱移行细胞癌中的表达沉默,且与膀胱移行细胞癌的发生有关.     

脂联素球状结构域研究进展

脂联素球状结构域（gAd）与脂联素受体1（AdipoR1）有很高的亲和力,本文概述了其增加胰岛素的敏感性、抑制胰腺β细胞的凋亡、促进脂肪酸的氧化、抑制粥样硬化性疾病的生理学功能.     

供需匹配视角下我国医疗资源耦合协调关系研究

目的：探讨医疗资源供给和医疗服务利用之间的耦合协调关系,为医疗资源合理配置提供有益参考。方法：以2017-2021年东中西部地区医疗资源供给和利用相关数据为基础,采用熵权法和耦合协调度模型,从供需匹配视角分析医疗资源供需耦合协调关系。结果：2017-2021年医疗资源供需总体耦合协调等级从初级协调升至中级协调,协调类型均为需求滞后型;东部地区2017-2021年医疗资源供需耦合协调度较中部和西部地区最高,协调类型均为供给滞后型;中部地区2017-2021年医疗资源供需耦合协调度较其他两个地区最低。结论：总体医疗资源供给得到明显提升,医疗资源配置耦合协调度稳步上升,但东中西部地区医疗资源配置存在较大差距。应从医疗资源供给端和需求端共同发力,构建医疗服务供需精准对接机制,探索医疗服务供需渐进决策路径。     

我国与美国欧盟医疗器械上市注册流程比较

目的 分析我国与美国、欧盟医疗器械上市前注册流程的差异,为加强我国的医疗器械监管工作提供参考。方法 从法规沿革、管理模式方面比较我国与美国、欧盟医疗器械上市的差异,再以全自动生化分析仪为例,比较注册申报流程的差异。结果 在监管类别、申报途径、审评时限等方面,各国注册流程侧重点各有不同,但都能保证上市产品的安全性和有效性。结论 实施全面、系统、科学的医疗器械管理制度,落实医疗器械审评审批制度的改革要求,确保了我国医疗器械产品的安全性和有效性。     

中西药对照治疗老年萎缩性胃炎46例

近年来,笔者采用中西药分组治疗萎缩性胃炎46例,报告如下。 1 临床资料 1.1 病例选择 46例全部经过纤维胃镜检查或活检确诊。其胃镜及病理诊断标准,均按照1982年10月在重庆召开的全国慢性胃炎座谈会制定的统一标准进行。其中单纯萎缩性胃炎26例,萎缩——浅表性胃炎20例,伴肠上皮化生13例,不典型增生11例。     

临床化学自动审核规则的建立及应用

目的建立一套临床化学检测结果的自动审核规则,运用计算机系统实现检测结果的自动审核确认。 方法按照美国临床实验室标准化委员会颁布的AUTO10-A临床实验室检验结果的自动审核指南,结合患者的基本信息、各检测项目的医学决定水平、检测项目在本实验室的方法学性能、检验项目之间的关系以及实验室的质量控制水平,设定临床化学审核规则,运用Data Manager 2中间件系统对临床化学检测结果进行审核。 结果我们为53项生化检测项目建立了540条自动审核规则,对16 593份常规化学样本进行285 415项测试,结果显示,自动审核通过的样本为14 289份,其中门诊样本自动审核通过率为97%,住院样本自动审核通过率为80%,总的自动审核通过率为86%。报告周转时间,从183 min降至131 min,缩短28.4%。 结论制定合理有效的临床化学审核规则,利用DM2软件的自动审核功能,能够充分发挥全自动流水线的使用效率,缩短TAT,提高临床检验分析后的质量控制水平。     

高温促进含第1类整合子宿主菌的重组效率

目的探讨高温对大肠杆菌BL21(DE3)宿主中第1类整合子重组效率的影响。方法用pUC19为载体构建高表达整合酶的重组质粒pUCINT,随后在pACYC184载体的不同位置分别插入整合子以及氨基糖苷腺苷转移酶(aadA2)基因盒,该重组质粒命名为pACINAD,将这2种相容的重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),将20株此菌株随机分成2组,每组各10株,分别在41℃和37℃培养24 h后用荧光定量聚合酶链反应(PCR)测定发生重组反应的整合子的拷贝数和总的整合子的拷贝数,前者与后者的比值即为重组效率。结果 41℃大肠杆菌BL21(DE3)宿主中所测得的重组效率为(1.8±0.5)×10-3,在37℃的重组效率为(1.8±0.5)×10-4。41℃组明显高于37℃组,差异具有统计学意义(t=9.266,P<0.01)。结论高温可显著提高由整合酶介导的aadA2基因盒的重组效率。