<Emphasis Type="Italic">XRCC1</Emphasis> Arg194Trp polymorphism and risk of chronic obstructive pulmonary disease

The DNA damage, caused by cigarette smoking, can cause airway cell apoptosis and death, which may be associated with the development of chronic obstructive pulmonary disease （COPD）. However, just 20%-30% smokers develop COPD, which suggests that different degrees of DNA repair cause different outcomes in smokers. X-ray repair cross-complementing group 1 （XRCC 1）, a base excision repair protein, has multiple roles in repairing ROS-mediated, basal DNA damage and single-strand DNA breaks. The present study investigated the association between polymorphism in XRCC1 （Arg399Gln） and susceptibility of COPD. A total of 201 COPD cases and 309 controls were recruited and frequency-matched on age and sex. XRCC1 genotype was determined by PCR-restriction fragment length polymorphism analysis. Overall, compared with those with the XRCC1 Arg/Arg genotype, the risk for COPD had no significant difference among individuals with Trp/Trp genotype. However, after stratifying by smoking status, in former smokers, compared with those with the XRCC1 Arg/Arg genotype, the risk for COPD was significantly reduced among individuals with Trp/Trp genotype （adjusted OR=0.22, 95% CI 0.06-0.85, P=0.028）; after stratifying by smoking exposure, in light smokers, compared with those with the XRCC1 Arg/Arg genotype, the risk for COPD was significantly reduced among individuals with Arg/Trp genotype and Trp/Trp genotype （adjusted OR=0.39, 95% CI 0.16=0.94, P=0.036; 0.24, 95% CI 0.07-0.79, P=0.019, respectively）. In conclusion, XRCC1 Arg194Trp genotype is associated with a reduced risk of developing COPD among former and light smokers.     

气管食管瘘模型的研究及应用

气管食管瘘是由于各种原因导致的气道与食道之间病理性瘘道形成的临床并发症,具有难以治愈且致死率高的特点,为研究气管食管瘘的治疗新方法,探索气管食管瘘的形成原因,最重要的任务就是构建气管食管瘘动物模型。本文收集相关文献,将从先天性和后天获得性2个方面,介绍阿霉素法、外科手术法和磁力压迫法3种可使用的模型构建方法,并比较各种...     

虚拟支气管镜导航软件——DirectPath的初步应用

目的 探索虚拟支气管镜导航软件(DirectPath)使用不同重建层厚的CT图片数据重建出三维支气管树的效果,评估该软件引导常规/超细支气管镜进入肺外周目标支气管的能力.方法 入选行胸部CT扫描发现肺孤立性结节者60例,其中8排螺旋CT扫描组(8排组)30例,64排螺旋CT扫描组(64排组)30例.8排组获取的图片可以刻录成1.25 mm层厚的重建数据,64排CT组图片可分别刻录成1.25 mm和0.625 mm两组层厚的重建数据.将所有入选者的重建数据导入DirectPath导航软件中,软件自动重建出三维支气管树,并模拟出目标支气管的图像,记录所有入选者重建出的三维支气管树及右B1a、右B6a、右B10a 3支支气管最远端所在的支气管级别和最短直径.结果 所有入选者均重建出了三维支气管树.1.25 mm层厚时,64排组重建出的三维支气管树优于8排组(Z＝-2.849,P=0.004),且64排组重建出的右B1a、右B6a级别更远.64排组中,0.625 mm层厚较1.25 mm层厚能重建出级别更远、直径更小的支气管,但2种层厚重建出的三维支气管树差异无统计学意义(Z＝-1.732,P=0.083).60例入选者,1.25 mm层厚时,重建出右B1a、右B6a、右B10a 3支支气管的最远级别及最短直径差异无统计学意义(P值均＞0.05),3支支气管重建出级别大于6级(含6级)的比例分别为66.7％、60.0％、65.0％,而当64排组0.625 mm层厚时,上述比例分别为90.0％、90.0％、88.3％.结论 虚拟支气管镜导航软件(DirectPath)使用64排CT扫描0.625 mm层厚的数据可以重建出较好的支气管树,其具备引导常规/超细支气管镜进入肺外周目标支气管的能力.     

香烟烟雾提取物对大鼠股四头肌细胞氧化损伤的研究

目的 研究经香烟烟雾提取物（CSE）刺激后大鼠股四头肌细胞8-羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）含量的变化以及细胞内活性氧（ROS）水平和8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1（OGG1）表达对8-OHdG含量变化的影响.方法 用不同浓度CSE分别刺激大鼠股四头肌细胞24 h、48 h和72 h后,采用高效液相色谱-电化学法（HPLC-ECD）检测大鼠股四头肌细胞8-OHdG的含量,流式细胞术检测大鼠股四头肌细胞ROS水平,实时定量PCR（Realtime PCR）检测OGG1 mRNA水平,用Western blot检测OGG1蛋白水平.结果 经相同CSE浓度分别刺激大鼠股四头肌细胞24 h、48 h和72 h后,大鼠股四头肌细胞中8-OHdG含量、ROS水平及OGG1 mRNA和蛋白水平差异均无统计学意义.但经不同浓度CSE刺激相同时间后,10.00％ CSE和20.00％CSE刺激组大鼠股四头肌细胞8-OHdG含量明显高于对照组和5.00％ CSE刺激组（P＜0.05）;大鼠股四头肌细胞内ROS水平、OGG1 mRNA和蛋白水平较对照组均明显升高（P＜0.05）;大鼠股四头肌细胞8-OHdG含量与其ROS水平呈明显正相关（r=0.746,P＝0.000）;经CSE刺激后,大鼠股四头肌细胞OGG1 mRNA和蛋白水平均高于对照组（P＜0.05）,但大鼠股四头肌细胞8-OHdG含量与其OGG1 mRNA和蛋白水平无明显相关（r=0.392,P＝0.536;r=0.297,P=0.426）.结论 CSE刺激可引起大鼠股四头肌细胞8-OHdG升高,8-OHdG含量与ROS水平有关,但与其修复酶OGG1表达水平无明显相关.     

香烟提取物对气道平滑肌细胞增殖中ERKs及NF-κB表达的影响

目的探讨香烟提取物（cigarette smoke extract，CSE）对气道平滑肌细胞（airway smooth muscle cells，ASMCs）增殖中细胞外信号调节蛋白激酶（ERKs）及核因子-κB（NF-κB）表达的影响。方法体外培养Wistar大鼠的气道平滑肌细胞，给予不同浓度的CSE刺激24 h后，MTT法检测细胞增殖情况，采用Western blot方法检测ERKs、磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶（p-ERK）和NF-κB p65的表达。结果1/32 CSE组、1/16 CSE组及1/8 CSE组的细胞增殖和ERKs、p-ERK、NF-κB p65的表达均逐渐增高，且与对照组相比差异有显著性意义（P〈0.05，n=4）。NF-κB p65的表达水平与p-ERK的表达水平呈明显正相关（r=0.858，P〈0.05，n=4）。结论一定浓度的CSE作用于平滑肌细胞后引起ERKs及ERKs磷酸化的增加，磷酸化激活后的ERKs可能与NF-κB的活化和ASMCs的增殖有关。     

香烟提取物对气道平滑肌细胞增殖中RKs及NF-κB表达的影响

目的 探讨香烟提取物(cigarette smoke extract,CSE)对气道平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs)增殖中细胞外信号调节蛋白激酶(ERKs)及核因子-κB(NF-κB)表达的影响.方法 体外培养Wistar大鼠的气道平滑肌细胞,给予不同浓度的CSE刺激24 h后,MTT法检测细胞增殖情况,采用Western blot方法检测ERKs、磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶(p-ERK)和NF-κB p65的表达.结果 1/32 CSE组、1/16 CSE组及1/8 CSE组的细胞增殖和ERKs、 p-ERK、NF-κB p65的表达均逐渐增高,且与对照组相比差异有显著性意义 (P《0.05, n＝4).NF-κB p65的表达水平与p-ERK的表达水平呈明显正相关(r=0.858, P《0.05,n＝4).结论 一定浓度的CSE作用于平滑肌细胞后引起ERKs及ERKs磷酸化的增加,磷酸化激活后的ERKs可能与NF-κB的活化和ASMCs的增殖有关.     

HIF-1α介导了间歇低氧对人肺腺癌A549细胞体外生物学行为的影响

目的:探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)是否介导间歇低氧对人肺腺癌A549细胞体外活力、凋亡以及侵袭的影响。方法:采用体外转染方法将特异性针对HIF-1α的siRNA导入A549细胞,在间歇低氧条件下培养后通过real-time PCR和Western blot法检测HIF-1α及其下游Bcl-2、Bax、P53、P21、VEGF的mRNA和蛋白表达;通过MTT法和流式细胞术分别检测A549细胞的活力、凋亡及细胞周期;通过Transwell小室检测A549细胞的侵袭能力。结果:未转染HIF-1α-siRNA的A549细胞[间歇低氧空白对照组(IHC组)、间歇低氧空载体对照组(IHE组)及间歇低氧阴性对照组(IHN组)]经间歇低氧干预后的HIF-1α、Bcl-2及VEGF表达均明显高于常氧对照组(RA组),Bax及P21表达均明显低于RA组(P0.05),而转染HIF-1α-siRNA的A549细胞[间歇低氧siRNA组(IHS组)]较IHC组、IHE组及IHN组经间歇低氧干预后的HIF-1α、BCL-2及VEGF表达均明显下调,Bax及P21表达较均明显上调(P0.05);所有间歇低氧组A549细胞的P53表达均较RA组升高(P0.05),但各间歇低氧组之间无显著性差异。IHC组、IHE组及IHN组A549细胞经间歇低氧干预后较RA组的细胞活力增强,凋亡率下降,侵袭力增强(P0.05),而IHS组A549细胞经间歇低氧干预后细胞周期被阻滞于G1期,较未转染组的细胞活力下降,凋亡增加,侵袭能力下降(P0.05)。结论:间歇低氧可通过HIF-1α途径调控其下游基因表达进而促进A549细胞的活力和转移;通过RNA干扰技术造成HIF-1α基因沉默可以抑制间歇低氧引起的A549细胞生长和转移。     

香烟烟雾提取物致大鼠膈肌细胞氧化损伤

目的研究经香烟烟雾提取物（CSE）刺激后大鼠膈肌细胞8一羟基脱氧鸟苷（8-OHdG）含量的变化以及细胞内活性氧（ROS）水平和8-羟基鸟嘌呤DNA糖苷酶1（OGGl）表达对8．OHdG含量变化的影响。方法用不同浓度CSE分别刺激大鼠膈肌细胞24、48和72h后,采用高效液相色谱．电化学法（HPLC—ECD）检测大鼠膈肌细胞8．OHdG的含量,流式细胞术检测大鼠膈肌细胞ROS水平,采用实时定量PCR检~IJOGG!mRNA水平,用Western印迹法检测OGGl蛋白水平。结果经相同CSE浓度分别刺激大鼠膈肌细胞24、48和72h后,大鼠膈肌细胞中8-OHdG含量、ROS水平及OGGlmRNA和蛋白水平均无明显差异。但经不同浓度CSE刺激相同时间后,10．00％CSE和20．00％CSE刺激组大鼠膈肌细胞8-OHdG含量明显高于对照组和5．00％CSE刺激组（P〈0．05）;大鼠膈肌细胞内ROS水平、OGGlmRNA和蛋白水平较对照组均明显升高（P〈0．05）;大鼠膈肌细胞8-OHdG含量与其ROS水平呈明显正相关（r=0．826,P：0．000）;经CSE刺激后,大鼠膈肌细胞OGGlmRNA和蛋白水平均高于对照组（P〈O．05）,但大鼠膈肌细胞8．OHdG含量与其OGGlmRNA和蛋白水平无明显相关（r=0．373,P=0．254;r=0．329,P=0．296）。结论CSE刺激可引起大鼠膈肌细胞8-OHdG升高,8-OHdG含量与ROS水平有关,但与其修复酶OGGl表达水平无明显相关。     

香烟提取物对大鼠骨骼肌细胞肌肉生长抑制素表达的影响研究

目的 探讨香烟提取物（CSE）对骨骼肌细胞肌肉生长抑制素（MSTN）表达的影响。方法 取新生3～5 d的SD大鼠的骨骼肌组织,用含150 ml/L胎牛血清的高糖DMEM培养基在37 ℃、5%CO2培养箱内进行体外原代细胞培养和传代。采用免疫荧光鉴定检测骨骼肌细胞。选择恰当的CSE浓度（2.5%、5.0%、10.0%）刺激48 h,分为2.5%组、5.0%组、10.0%组和对照组（不予CSE刺激）,分别采用实时定量PCR 检测MSTN mRNA的表达水平与Western blotting 检测MSTN蛋白的表达水平。结果 骨骼肌细胞培养成活率高,体外生长、增殖良好。实时定量PCR 检测结果显示,4组MSTN mRNA相对表达水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中,5.0%组、10.0%组MSTN mRNA 相对表达水平高于对照组和2.5%组（P＜0.05）。Western blotting检测结果显示,4组MSTN蛋白表达水平比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;其中,5.0%组、10.0%组MSTN蛋白表达水平高于对照组和2.5%组（P＜0.05）。结论 骨骼肌细胞模型可对CSE刺激产生有效反应,为吸烟引起骨骼肌抑制的机制研究奠定了细胞学基础。     

慢性阻塞性肺疾病合并肌少症的研究进展

肌少症是一种进行性和全身性的骨骼肌疾病,是慢性阻塞性肺疾病（COPD）的重要肺外合并症。多项研究已证实合并肌少症的COPD患者气流阻塞和肺气肿程度更为严重、呼吸困难指数评分更高、生活质量和运动能力下降、频繁急性加重率和病死率升高。肌少症虽然作为COPD的合并症被提及多年,但目前的临床实践对其关注度和干预均不足,究其原因主要是其发病机制不明,药物治疗方案效果不佳所致。随着近年来对COPD合并肌少症的研究越来越多,本文对现阶段COPD合并肌少症的研究进展包括发病率、对临床结局的影响、发病机制、诊断标准和治疗进展进行综述,望能为COPD合并肌少症深入研究及早期干预提供一定的参考价值。