DahlS高血压大鼠卵巢细胞凋亡相关因素的实验研究

目的:探讨高血压时卵巢细胞凋亡的调控机制。方法:以日本引进DahlS高血压大鼠为研究对象,应用流式细胞仪、生化等技术,对DahlS高血压大鼠卵巢细胞凋亡与Bcl-2、iNOS及NO等相关因素进行研究。结果:(1)随高血压病情加重,卵巢细胞凋亡率逐渐上升,与之伴随Bcl-2表达率逐渐下降,iNOS表达率逐渐升高,实验组与对照组比较差别显著,P<0.05。(2)11周龄实验组血清NO含量较对照组降低,两者比较差别显著,P<0.01;而随高血压病情加重,实验组NO含量逐渐增高,反而高于对照组,两组比较差异有统计学意义,P<0.05。丙二醛(MDA)随高血压病情加重逐渐增高,实验组与对照组比较差别显著,P<0.05。结论:随血压升高,卵巢细胞凋亡加重与Bcl-2调控及iNOS、NO直接作用有关。     

生精细胞凋亡的FCM、TUNEL检测及相关基因表达

目的及方法:生精细胞凋亡对于保证精子的正常数目具重要意义,已表明生精细胞凋亡与年龄、生精上皮时相及调控基因有关。为明确生精细胞凋亡的规律及相关基因的表达,应用免疫组化、TUNEL染色(缺口末端标记法)、FCM(流式细胞术)及透射电镜(TEM)等技术对生后4天、8天、12天、16天、20天、24天、28天、32天、60天、3个月及5个月的SD大鼠的生精细胞进行了研究。将动物的每侧睾丸分别制备石蜡、超薄切片及单细胞悬液以备观察。结果及结论:1凋亡率(FCM):在生后的4天组到32天组,生精细胞的凋亡率逐步升高,32天达高峰之后,随着性成熟而下降。2…     

丙酸睾丸酮对生精细胞凋亡影响的流式细胞分析及形态观察

本实验应用流式细胞术 (FCM) ,DNA末端标记(TU NEL) ,及放免技术对生后 37天超剂量注射丙酸睾丸酮15天后的大鼠凋亡生精细胞 DNA含量和血清中性激素水平等进行了研究。结果显示 ,超剂量注射丙酸睾丸酮 ,实验组血清中 FSH浓度明显低于对照组 (P <0 .0 1) ,L H降低但无明显差异。实验组睾丸细胞凋亡率明显高于对照组 3倍(P <0 .0 1)。 FCM直方图显示实验组生精细胞凋亡峰由位于 1C细胞群 (精子细胞和精子 )和 2 C细胞群 (精原细胞和次级精母细胞 )之间 ,而对照组则位于 1C细胞群之前。同时 ,1C细胞群、2 C细胞群明显高于对照组 (P…     

显示神经原纤维和突触块染方法的体会

神经组织教学切片的制作难度较大,尤其是块染法不易掌握。我们在实验过程中认为Cajal(Ⅵ)法与Cajal原法虽都能显示神经原纤维和突触,但结构的分辨还不够理想,经反复摸索,将二法改进后获得了满意效果,现报告如下。1　材料、方法与结果1 .1　材料:①动物:为波斯猫,河北医科大学动     

db/db自发性糖尿病小鼠睾丸生殖细胞凋亡及相关基因Bcl-2和Bax表达

目的　研究糖尿病时生殖细胞凋亡及相关基因Bcl 2和Bax表达变化。方法　以脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法 (TUNEL)检测生殖细胞的凋亡 ,免疫组化ABC法检测凋亡相关基因Bcl 2和Bax的表达变化。结果　凋亡管数及凋亡阳性率糖尿病组均较正常高 ,而且随糖尿病病程进展呈明显增加趋势 ,对照组中随加龄二者也有增加。Bcl 2蛋白以散在的颗粒状大量分布于除精原细胞的各级生精细胞中 ,且以精子细胞质为最多。随糖尿病病变加重 ,Bcl 2表达减少 ,而且 ,糖尿病组比对照组Bcl 2表达率低。Bax蛋白比Bcl 2蛋白表达量少 ,以散在的颗粒状分布于曲细精管基底部的精原细胞和支持细胞中。随糖尿病病程进展和年龄增加 ,表达均呈增加趋势 ,而且 ,糖尿病组比对照组Bax表达率高。结论　在db/db自发性糖尿病小鼠睾丸 ,伴随生殖细胞凋亡增加 ,Bcl 2表达减少 ,Bax表达增加 ,凋亡及相关基因在糖尿病生殖功能障碍中起重要作用     

外源性bFGF对DahlS高血压大鼠卵巢功能的影响

目的 :研究外源性 b FGF对 Dahl S高血压大鼠卵巢功能的影响。方法 :Dahl S高血压大鼠 ,应用光镜、电镜、流式细胞仪、生化等技术 ,观察施以外源性 b FGF后的卵巢组织形态学、细胞凋亡率、b FGF、i NOS表达率的变化以及其对血清 NO、MDA等相关因素的影响。结果 :施以外源性 b FGF后 ,血压明显下降 ,卵巢形态学发生了与 b FGF相关的改变 ,卵巢组织 b FGF表达率增加 ,实验组与对照组比较差别显著 ,P<0 .0 1 ;而卵巢组织细胞凋亡率 ,i NOS表达率下降、且实验组与对照组比较差别显著 ,P<0 .0 5。结论 :外源性碱性成纤维细胞生长因子既具有降压作用又能作用于卵巢改善卵巢功能     

自然发病性糖尿病小鼠睾丸动脉的电镜观察

自然发病性糖尿病小鼠睾丸动脉的电镜观察殷秀玲王更新王朝宏赵春芳杜心欣（河北医科大学组织胚胎学教研室）微量元素与人体代谢众所周知，动脉硬化是糖尿病的主要并发症，但迄今为止未见有关睾丸动脉变化的研究报导。有鉴于此，本实验对自然发病性糖尿病小鼠（ＫＫＡｙ）...     

家兔眼人工晶体表面细胞的光、电镜观察

晶体前膜形成是人工晶体植入手术的严重并发症之一。若治疗不及时可致虹膜后粘连、瞳孔变形、视力下降。而人工晶体表面细胞的研究已成为该领域的重要课题。鉴于此 ,我们对植入晶体后不同月龄家兔的晶体结构进行了光镜、电镜观察 ,现报告如下 :1取体重为 2 .5～ 3kg的健康家兔 6 4只 ,兔龄为 4～ 6个月 ,雌雄兼用 ,随机分为 2组 ,分别为睫状沟缝线和单纯固定组 ,每组 32只。2人工晶体为 PMMA后房型 ,为河南中美合资宇宙人工晶体公司产品。 3用 2 5 %乌拉坦溶液 4.5 m l/kg体重兔耳后静脉注射麻醉 ,托品卡胺散瞳 ,显微镜下常规晶体囊外摘除…     

db/db自发性糖尿病小鼠睾丸生殖细胞增殖及凋亡研究

目的　研究糖尿病对生殖细胞增殖和凋亡的影响。　方法　以免疫组织化学ABC法检测增殖细胞核抗原 (proliferationcellnucleusantigen ,PCNA)检测生殖细胞的增殖情况 ,电镜和脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法 (TUNEL)检测凋亡的生殖细胞。　结果　PCNA阳性率随糖尿病病程进展 (糖尿病组 )和年龄增加 (对照组 )均呈明显下降趋势 ,但每年龄段糖尿病组PCNA阳性率均明显低于相应正常对照组。凋亡管横断面数及凋亡阳性率糖尿病组均较正常高 ,而且随糖尿病病程进展呈明显增加趋势 ,对照组中随加龄二者有增加。电镜下 ,糖尿病组小鼠睾丸精原细胞、精母细胞和精子细胞均可见到核染色质凝集、边集 ,凋亡小体形成和降解等凋亡过程。　结论　db/db自发性糖尿病小鼠睾丸生殖细胞PCNA表达减弱 ,TUNEL标记凋亡细胞增加 ,说明糖尿病使生殖细胞增殖与凋亡的平衡破坏 ,这可能是糖尿病生殖功能障碍的原因     

db/db自发性糖尿病小鼠睾丸c-Fos表达变化与凋亡的关系

目的 :研究原癌基因 c-Fos在 db/ db自发性糖尿病小鼠睾丸生殖细胞分布和表达的变化。方法 :免疫组化 ABC法和细胞凋亡 TUNEL法。结果 :c-Fos免疫阳性细胞主要为精母细胞、圆形精子细胞和变形期精子 ,间质血管内皮细胞也有强阳性表达。随糖尿病病程进展 (糖尿病组 )及年龄增加 (对照组 ) ,c-Fos阳性率均呈现明显下降趋势 ,但每年龄段糖尿病组阳性率明显低于相应正常对照组。凋亡管横断面数及凋亡阳性率糖尿病组均较正常组高 ,而且随糖尿病病程进展呈明显增加趋势 ,对照组中随年龄增加二者也有增加。电镜下 ,糖尿病组小鼠睾丸精原细胞、精母细胞和精子细胞均可见到核染色质凝集、边集 ,凋亡小体形成和降解等凋亡过程。结论 :c-Fos在 db/ db自发性糖尿病小鼠睾丸表达减少 ,致使生殖细胞增殖减弱 ,凋亡增强 ,也就是增殖和凋亡的平衡被破坏 ,这可能是糖尿病生殖功能障碍的原因之一。