抑制NF-κB活性诱导同种异体小鼠心脏移植耐受的早期作用

目的 研究调节性T细胞(Tr)和Th17细胞在特异性NF-κB抑制诱导同种异体小鼠心脏移植耐受的早期作用机制.方法 以BALB/c小鼠为供体,C57BL/6小鼠(对照组)和IκBα△N-Tg小鼠(实验组)分别作为受体建立同种异体腹部异位心脏移植模型;流式细胞术分别检测两组受鼠脾脏内Tr在移植前以及移植术后7 d、30 d和100 d的变化规律,以及Th17细胞在移植术后5 d时的变化;Western blot检测两组心脏移植物内IL-17在移植后3 d和5 d的表达.结果 实验组心脏移植物存活时间均大于100 d,HE染色未见心脏移植物内有明显淋巴细胞浸润;实验组Tr比例在移植后7 d和30 d时明显升高(21.23±3.95,23.17±4.11 vs 11.64±1.96,P0.05),而对照组Tr在移植前后则无明显变化;与对照组相比,实验组Th17细胞及移植物内IL-17表达在移植术后5 d时均明显下降.结论 特异性受体T细胞NF-κB功能缺陷可以打破受体内Tr/Th17细胞平衡,在移植术后早期促进T细胞向Tr分化而抑制向Th17细胞分化,从而阻止急性排斥反应发生,诱导耐受.     

结直肠癌术中应用雷替曲塞腹腔灌注化疗的安全性研究

目的 探讨结直肠癌术中应用雷替曲塞腹腔灌注化疗的安全性.方法 将60例行结直肠癌手术患者按照随机数字表法分为试验组(30例)和对照组(30例).试验组采用手术+术中雷替曲塞腹腔灌注化疗,对照组采用手术+术中生理盐水腹腔灌注治疗.评价两组患者血常规、肝肾功能的变化情况以及术后不良反应、并发症的发生率.结果 试验组手术前后白细胞分别为(6.36±2.63)×109/L、(8.20±2.08)×109/L,差异有统计学意义(t=3.06,P＜0.05);中性粒细胞比例分别为65.17％±10.36％ 、72.21％±10.53％,差异有统计学意义(t=3.22,P＜0.05);血小板分别为(261.03 ±84.74)×109/L、(228.47±58.69)×109/L,差异有统计学意义(t=2.07,P＜0 05).试验组术后白细胞、中性粒细胞比例、血小板与对照组相比,差异均无统计学意义(均P＞0.05).试验组1～2级恶心(60.00％∶23.33％;x2=8.30,P＜0.05)和呕吐(30.00％∶6.67％;x2=5.46,P＜0.05)的发生率明显高于对照组.其他不良反应的发生率两组比较差异均无统计学意义(均P ＞0.05).与对照组比较,试验组肠梗阻(6.67％∶3.33％,x2 =0.35,P＞0.05)、切口感染(10.00％∶6.67％,x2=0.22,P＞0.05)、腹腔出血(0∶0)、吻合口瘘(3.33％∶0,P＞0.05)发生率差异均无统计学意义.结论 结直肠癌术中使用雷替曲塞进行腹腔灌注化疗,不良反应可耐受,不增加术后并发症,治疗过程安全可行.     

抗白细胞介素6单克隆抗体治疗延长小鼠同种心脏移植物存活时间的实验研究

目的 观察应用抗白细胞介素6(IL-6)单克隆抗体(anti-IL-6 monoclonal antibody,anti-IL-6 mAb)对同种异体小鼠心脏移植排斥反应的抑制作用,并探讨其可能的作用机制.方法 建立小鼠颈部异位心脏移植模型.实验动物随机分为同系移植组、移植治疗组(每日注射3 g/L anti-IL-6 mAb 0.1 mL)和移植模型组(注射等量生理盐水).ELISA法检测受鼠移植术后第3、6 天外周血IL-6的表达水平,观察各组移植心脏存活时间,病理分析检测排斥反应程度,流式细胞术(FCM)检测各组受鼠脾脏及移植心脏中CD4+ CD25+调节性T细胞比例变化,RT-PCR检测移植心脏IL-6、IFN-γ、IL-17、RORγt和Foxp3 mRNA的表达水平.结果 ①治疗组外周血IL-6表达水平较模型组明显降低(P<0.01);②治疗组移植心脏存活时间较模型组明显延长[(22.0±2.3)d vs(7.7±0.8)d,P<0.01],排斥反应病理分级明显下降(Stanford 2级);③治疗组移植心脏中IFN-γ、IL-6、IL-17和RORγt mRNA表达水平较模型组显著下降(均P<0.05),脾脏及移植心脏中浸润的CD4+ CD25+调节性T细胞比例及Foxp3 mRNA表达水平均明显升高,与模型组比较差异有统计学意义(均P<0.05).结论 anti-IL-6 mAb治疗可抑制Th1、Th17型细胞因子的分泌,促进CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞产生,抑制单个核细胞浸润并有效延长小鼠同种移植心脏的存活时间.     

IL-17参与小鼠心脏移植排斥反应的实验研究

目的 研究Th17细胞相关因子白细胞介素17(IL-17)在小鼠心脏移植排斥反应中的表达及意义.方法 建立小鼠颈部异位心脏移植模型,实验动物随机分为同系移植组和急性排斥反应组.观察2组供心存活时间,应用RT-PCR检测移植心脏IL-17、核孤独受体γt(RORγt)、干扰素-γ(IFN-γ)mRNA在移植术后1、2、3、4、5、6、7、8 d的动态表达水平.免疫荧光法观察移植术后第4天移植心脏内CD4+、CD8+T细胞中IL-17的表达情况.结果 RT-PCR检测显示,在急性排斥反应组中,IL-17和RORγt mRNA的表达都早于IFN-γ,在移植术后第2天即可于移植心脏中检测到,其表达量在术后第4天均达到高峰,随后逐渐下降,并分别在术后第6天和第7天无表达.免疫荧光结果显示,急性排斥组移植心脏内有大量CD4+、CD8+T细胞浸润,细胞因子IL-17主要由CD4+T细胞分泌.结论 Th17细胞在移植排斥反应的发生发展中可能起着非常重要的作用,对移植脏器中细胞因子IL-17的检测可作为急性排斥反应早期诊断的预见性和特异性指标.