基于连续切片的成年SD大鼠红核三维重建

为利用三维重建工具软件对成年SD大鼠部分脑干、中脑导水管及红核结构进行三维重建,并对重建的红核进行观察和测量,探索了一种方法,即：制作大鼠脑干连续冰冻切片,Nissl染色后进行分步显微摄像并进行拼接;扫描大鼠脑定位图谱相关红核切面图像;利用PhotoshopCS3软件将上述获得的连续图像分别进行图像后处理,并利用3D-DOCTOR4．0软件分别对上述连续切片图像进行配准、分割和三维重建,对两种不同方式重建的红核进行比较。结果显示,利用大鼠脑干连续冰冻切片和大鼠脑定位图谱可以对SD大鼠红核等结构进行三维重建,重建出的结构具有立体感。可以在PC机中自由观察和测量,两种重建方法得到的红核形状大小基本类似。因此,得出结论：利用大鼠脑干的连续冰冻染色切片可以对大鼠红核进行三维重建。     

大鼠锥体束显微结构的三维重建方法研究

目的：探讨构建神经纤维束显微结构三维可视化模型的实用方法。方法：SD大鼠全脑连续冰冻切片经Luxol Fast Blue染色显示锥体束。采用分区显微摄影法,获取每张脑组织切片的二维图像。运用Photoshop 7.0软件对每张脑片的图像进行拼接,根据三轴定位法对拼接图像进行配准,导入3D-DOCTOR4.0软件对脑和锥体束进行表面重建和体素重建。利用3DMAX8.0软件对重建模型进行可视化处理。结果：重建出SD大鼠脑和锥体束全貌模型清晰逼真,可以在任意断面从不同角度观察锥体束的显微结构,动态显示锥体束在脑内的立体行径。结论：基于连续组织切片的三轴定位法结合三维重建软件可以真实地再现锥体束的显微结构及其在脑内的三维立体行径,为神经纤维束的损伤修复研究提供精确的三维立体形态学基础。     

雌激素对大鼠红核神经元保护作用的体视学定量

目的 观察雌激素（E₂）替代治疗对去卵巢SD大鼠脊髓损伤后红核神经元逆行性损伤的影响。方法 成年雌性SD大鼠80只, 随机分为正常组、红核脊髓束(RST)损伤组、E2替代治疗组、雌激素受体拮抗剂（ICI）治疗组和E₂+ICI联合治疗组。SD大鼠去势后1周采用选择性切断脊髓C3～C4左侧背外侧索制作单侧红核脊髓束（RST）横断损伤模型,给予不同条件治疗后1周、2周和4周对各组大鼠采用前肢支撑探测实验进行行为学评价,用红色荧光金（FR）逆行荧光示踪及体视学定量分析法,观察红核神经元的形态及数目变化。结果 前肢支撑探测实验结果显示,各时间点E2替代治疗组的左前肢使用率均高于除正常组外其他各组,但无统计学意义（P >0.05）;形态学检测结果可见各组大鼠中脑右侧FR阳性红核神经元数目除正常组外均有不同程度减少,尤以4周时最为明显。E2替代治疗组右侧中脑FR阳性红核神经元与RST损伤组、ICI治疗组和E₂+ICI 联合治疗组相比胞体饱满、轮廓清晰、突起长,体视框计数结果显示,E₂替代治疗组红核FR阳性神经元数目明显多于其余各组（P<0.05）,但RST损伤组、ICI治疗组和E₂+ICI联合治疗组之间右侧中脑FR阳性红核神经元数目未见明显差异（P>0.05）。结论 大鼠脊髓横断损伤后中脑红核神经元发生逆行性损伤,E₂替代治疗可减轻脊髓损伤引发的继发性红核神经元损伤。     

大鼠红核脊髓束损伤模型的建立及体视学研究

目的:建立大鼠单侧红核脊髓束损伤模型并利用体视学方法评估红核中枢性损伤情况.方法:成年SD大鼠30只,随机分为正常组、红核脊髓束(rubrospinal tract,RST)损伤组和假手术组.RST损伤组选择性切断SD大鼠脊髓C.左侧背外侧索制作单侧RST横断损伤模型,术后1、2、8周对各组大鼠采用前肢支撑探测实验进行行为学评价,用Fluoro-ruby(FR)逆行荧光示踪及体视学定量分析法观察红核神经元的形态及数目变化.结果:前肢支撑探测实验结果显示各时间点RST损伤组大鼠左前肢使用率均低于正常组和假手术组(P＜0.05); FR染色结果可见RST损伤组大鼠中脑右侧FR阳性红核神经元数目较左侧明显减少,细胞荧光较弱,细胞突起较少,且短细.与其余两组比较RST损伤组大鼠右侧中脑FR阳性红核神经元计数也明显减少(P＜0.05).结论:选择性切断SD大鼠脊髓背外侧索能成功制备大鼠单侧RST损伤模型,应用体视学方法可以精确评估传导束损伤引发的继发性红核神经元改变.     

多疣壁虎脑和脊髓解剖结构的三维重建及体视学测量

目的：建立多疣壁虎中枢神经系统结构的三维立体模型，获取中枢神经系统相关结构的定量数据。方法：多 疣壁虎头颈部连续冠状切片行Nissl 染色和Luxol fast blue（LFB）染色，通过显微镜分区拍摄获得切片的二维图像。 利用Photoshop7.0 对图像拼接、旋转、配准后，采用3D-Doctor 软件进行三维重建。运用体视学方法对壁虎头部进 行定量研究。结果：三维重建的头颅、脑和视神经的立体图像逼真自然，能清楚地区分端脑、间脑、中脑、延髓以 及小脑，同时能弄清壁虎脑在颅内位置及相互关系。壁虎颅腔的容积为（25.83±1.46）mm3，全脑体积为（19.99±2.15） mm3、端脑体积为（7.53±0.33）mm3、单侧大脑皮层体积为（0.19±0.02）mm3、小脑体积为（0.22±0.02）mm3、 海马体积为（0.16±0.02）mm3，脊髓颈膨大、灰质和白质面积分别为（0.70±0.02）mm2、（0.28±0.01）mm2、 （0.36±0.01）mm2，颈膨大灰质与白质面积比是0.78，腰骶膨大、灰质和白质的面积分别为（0.75±0.01）mm2、 （0.36±0.01)mm2、（0.38±0.01）mm2，腰骶膨大灰质与白质面积比是0.95。结论：获得多疣壁虎颅脑解剖结构的 三维立体模型及相关脑结构的定量分析数据，为壁虎脑内实验和立体定向研究提供了三维解剖学依据。