淡色库蚊抗性转录因子FTZ-F1蛋白原核表达与鉴定

目的 对淡色库蚊抗性转录因子FTZ-F1蛋白进行原核表达并鉴定。方法 对转录因子FTZ-F1蛋白进行生物信息学分析,包括蛋白的理化性质,二级结构及三维同源模型。采用PCR技术扩增FTZ-F1基因,比对分析后选取FTZ-F1基因保守区和功能区片段,片段长度为1122bp,然后将其连接至pET-32a(+)载体,构建重组质粒pET-32a(+)-FTZ-F1,再转化入感受态细胞BL21(DE3)后用IPTG诱导重组质粒pET-32a(+)-FTZ-F1的表达,运用SDS-PAGE和Western blot初步鉴定重组蛋白FTZ-F1的表达,采用His标签镍离子蛋白纯化柱对表达产物进行纯化和增加蛋白的量,用SDS-PAGE和Western blot鉴定重组蛋白FTZ-F1的表达。结果 FTZ-F1蛋白有744个氨基酸,相对分子质量为79.57×10³。1%琼脂凝胶鉴定PCR扩增为单一条带,大约为2 240 bp,测序结果表明重组质粒pET-32a(+)-FTZ-F1构建正确。采用SDS-PAGE检测重组蛋白FTZ-F1,结果表明蛋白FTZ-F1在原核表达系统中主要以可溶...     

利用空气卫生细菌学实验培养护理学生的无菌观念

目的:培养护理专业学生的无菌观念.方法:以2006级护理专业学生为研究对象,对学校教室、宿舍、实验室、后山等处进行空气的卫生细菌学检测.结果:计数不同环境空气的CFU,使学生对无菌观念有了直观的认识.结论:在护理本科教学中开设空气卫生细菌学实验.有利于提高护理学生的无菌观念和学习积极性.     

LPS促进舌苔形成相关细胞凋亡的分子机制

目的探讨脂多糖影响舌苔形成相关细胞凋亡的分子机制。方法 LPS作用于撤血清舌鳞癌TCA-8113细胞,MTT法检测细胞增殖活性,Transwell研究细胞迁移,电镜观察细胞超微结构,ELISA检测PGE2含量,流式细胞术检测细胞周期和凋亡,免疫印迹检测蛋白表达。结果 12.5~100mg/L LPS可显著抑制撤血清舌鳞癌TCA-8113细胞增殖活性和细胞迁移,呈剂量依赖性。100 mg/L LPS导致细胞表面微绒毛消失、细胞线粒体肿胀空泡化、细胞内出现白色脂质样空泡结构。LPS可以改变撤血清舌鳞癌TCA-8113细胞周期分布,促进细胞凋亡,25 mg/L和50 mg/L LPS可以上调NF-κB p65、Bax、COX-2表达水平,下调NF-κB p50、Bcl-2表达水平,促进PGE2分泌,抵抗细胞快速凋亡。结论 LPS可以促进舌苔形成相关细胞凋亡,与Cox-2信号通路可能存在交互作用。     

活血化痰解毒利湿法治疗慢性重症肝炎68例

目的 探讨以活血化痰解毒利湿法为主治疗重症肝炎的疗效,为治疗重症肝炎寻找一种有效而廉价的方法.方法 136例慢性重症肝炎患者随机分为观察组和对照组,观察组在常规治疗的基础上给予中药(茵陈30g,金钱草15g,泽泻12g,虎杖15g,郁金15g,赤芍30g,丹参30g,茜草12g,大黄10g,陈皮12g,莱菔子15g,瓜蒌15g,焦三仙各12g,炙甘草9g)1剂/d,分2次空腹温服,疗程4～8周;对照组患者只采用常规治疗.观察患者临床症状、肝功能变化情况及不良反应.结果 治疗结束时观察组患者血清总胆红素(TBIL)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、白蛋白(ALB)、凝血酶原活动度(PTA)等均较治疗前有明显改善,与对照组比较差异有显著性(P<0.05).观察组总有效率71.6%,而对照组总有效率为54.5%(P<0.05).结论 以活血化痰解毒利湿法为主治疗重症肝炎不仅疗效好,而且能缩短病程,是一种较理想的方法.     

高剂量脂多糖影响舌苔形成机制初探

目的 探讨脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)影响舌苔形成的信号通路.方法将0.1、1、5、10、50、100 mg/L LPS作用于体外培养的舌鳞癌TCA-8113细胞16、32、48 h,MTT法检测细胞增殖活性.10、50、100 mg/L LPS作用TCA-8113细胞16、32、48 h,细...     

香砂六君子汤治疗糖尿病胃轻瘫32例临床观察

目的观察香砂六君子汤对糖尿病胃轻瘫的临床疗效.方法选择糖尿病胃轻瘫患者62例,随机分为治疗组和对照组,治疗组32例用香砂六君子汤加减治疗,每日一剂,水煎服,对照组30例用西沙必利,10mg每日3次口服,胃复安10mg,每日2次口服,两组均治疗一个月后观察疗效.结果治疗组总有效率为87.5%,对照组总有效率为60%,两组比较差异有统计学意义(p<0.05).结论香砂六君子汤治疗糖尿病胃轻瘫优于对照组.     

周氏克金岩方促进舌苔形成相关细胞凋亡作用机制

目的探讨周氏克金岩方促进舌苔形成相关细胞凋亡的作用机制。方法体外培养SAS和TCA-8113舌鳞癌细胞,撤除血清模拟舌苔形成相关细胞凋亡环境,周氏克金岩方正丁醇部位作用舌鳞癌细胞,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡,ELISA检测细胞培养上清PGE2含量。结果与对照组相比,周氏克金岩方丁醇部位能够降低舌鳞癌细胞的增殖活性,促进SAS和TCA-8113细胞凋亡率升高,抑制细胞分泌PGE2,且具有剂量和时间依赖性。结论周氏克金岩方正丁醇部位促进舌苔形成相关细胞凋亡与抑制PGE2合成相关。     

千金苇茎汤促进撤血清舌鳞癌细胞凋亡机制的研究

目的: 探讨千金苇茎汤辅助治疗舌鳞癌的分子机制。方法: 体外培养SAS和TCA-8113舌鳞癌细胞,撤除血清模拟体内抗血管生成药物治疗环境,千金苇茎汤3个部位作用撤血清舌鳞癌细胞72 h,MTT法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡,ELISA检测细胞培养上清前列腺素E₂(PGE₂)含量。结果: 与撤血清对照相比,千金苇茎汤07部位能够降低撤血清舌鳞癌细胞的增殖活性(生长抑制率_max34.36%),促进SAS和TCA-8113细胞凋亡率升高(P<0.05),抑制细胞分泌PGE₂(P<0.05),且具有剂量和时间依赖性。结论: 千金苇茎汤07部位促进撤血清舌鳞癌细胞凋亡的机制与抑制PGE₂合成相关,为深入研究千金苇茎汤辅助治疗恶性肿瘤提供了新的思路和方法。     

以临床能力为导向的线上线下混合式免疫学实验教学探索北大核心CSCD

医学免疫学是基础医学的主干课程之一,与临床关系密切。医学免疫学实验教学遵循“健康中国”战略对高等医学教育的要求,以临床能力为导向,互联网信息技术为工具,建立混合式免疫学实验教学模式。录制SPOC课程帮助学生夯实基础知识,通过“线上+线下”临床案例学习进行医德培育和临床思维能力培养,开发虚拟仿真实验启迪学生临床研究意识,进而达到培养德才兼备的高等医学人才的目的。     

G12亚型G蛋白对M3乙酰胆碱受体介导的磷脂酶D调控

目的:阐明何种Gα亚型蛋白偶联M3乙酰胆碱受体(M3mAChR)并介导PLD的激活。方法:将带有Gαq、Gα12及Gα13基因的质粒转染入HEK293细胞,在细胞内过度表达,用免疫杂交检测相应的表达蛋白,并测定胞内M3mAChR介导的PLD及PLC活性。结果:Gα12、Gα13亚型野生型及功能增强型蛋白的过度表达,导致胞内M3mAChR介导的PLD活性明显升高(P<0.001);而过度表达Gα12、Gα13功能缺陷型蛋白,则使胞内M3mAChR介导的PLD活性明显降低(P<0.001);但Gαq野生型及功能增强型蛋白的过度表达仅影响胞内PLC活性,对M3mAChR介导的PLD激活没有影响。结论:M3mAChR介导的胞内PLD激活极有可能是Gα12、Gα13而不是Gαq亚型G蛋白。