转染isl1基因促进骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化

目的: Isli蛋白在心脏发生和多能心脏祖细胞分化调节中发挥着重要作用, 本文旨在探寻转染 isl1 基因是否能提高骨髓间充质干细胞(BMSCs)向心肌样细胞分化的能力。方法: 利用携带 isl1 基因的慢病毒(LVS- isl1)感染人骨髓间充质干细胞, 通过Puromycin筛选获得稳定细胞株,并对其进行RT-PCR和Western blotting鉴定。以共培养为基础, 用real-time PCR、Western blotting以及免疫荧光法检测Isl1蛋白的心肌诱导能力。结果: RT-PCR和Western blotting表明成功获得稳定细胞株BMSC- isl1, real time-PCR结果显示BMSC- isl1组较之BMSCs组和BMSC-vehicle组GATA 结合蛋白4、NK2转录因子5、肌细胞增强因子2C和兰尼碱受体2的表达量分别提高了2.3、2.7、2.6和3.2倍;Western blotting以及免疫荧光法结果均提示BMSC- isl1 组内心肌肌钙蛋白T、心肌肌钙蛋白I和α-辅肌动蛋白的表达均比BMSCs组和BMSC-vehicle组要高。结论: 转染isl基因的BMSCs不仅可以稳定表达Isli蛋白, 而且在微环境共培养条件下, 可以提高BMSCs向心肌细胞分化的能力。