BMP-4cDNA的克隆表达及活性的初步测定

目的利用原核基因工程生产有诱骨活性的骨形态发生蛋白-4(BMP-4). 方法应用RT-PCR技术,从成熟人的胎盘组织中扩增出长0.34Kb编码人骨形态发生蛋白-4成熟肽的基因序列,经测序证实后,装入表达载体pET-22b,诱导表达后SDS-PAGE显示在14kd处有一明显的表达条带.经初步鉴定,证实表达蛋白部分位于裂菌处理后的上清中,部分以包涵体的形式存在于沉淀中.将沉淀中的包涵体蛋白纯化、变性和复性处理,和上清中的蛋白分别经真空冷冻干燥后,植入小鼠的肌肉内检测蛋白活性. 结果第14d和21d,组织切片可见骨细胞和骨基质的形成. 结论大肠杆菌表达的BMP-4经复性处理后具有诱骨活性.     

髌股关节软骨退变程度对单髁置换术后效果的影响

目的探讨髌股关节软骨退变程度对内侧活动平台单髁置换术短期疗效的影响。 方法回顾性分析2017年1月至2018年12月在深圳市人民医院因前内侧骨关节炎行内侧活动平台单髁置换或全膝关节置换术的75例患者资料,依据术中探查髌股关节软骨退变情况分为无退变单髁组(无退变组)、内侧退变单髁组(内侧退变组)、内外退变单髁组(内外退变组)和内外退变全膝组(全膝组)。单因素方差分析对比4组患者术前术后牛津大学膝关节评分(OKS)、美国特种外科医院(HSS)评分、骨关节炎指数(WOMAC)评分,并记录终末随访时有无假体松动、脱位、力线改变等情况。 结果所有患者获得随访,随访时间平均(36±10)个月。4组患者术后OKS评分、HSS评分、WOMAC评分较术前均有改善(F＝18.555,P<0.001;F＝5.867,P＝0.001;F＝22.671,P<0.001);术前术后OKS、HSS、WOMAC评分差值,无退变组与内侧退变组之间差异均无统计学意义(均为P>0.05),内外退变组与无退变组、内侧退变组相比,功能改善程度稍差(均为P<0.05),内外退变组与全膝组之间OKS、HSS、WOMAC评分差值差异无统计学意义(均为P>0.05)。所有病例于末次随访时无假体松动、脱位、力线改变。 结论内侧髌股关节软骨退变对内侧活动平台单髁置换术后疗效影响不大,但面对外侧髌股关节软骨退变时则需慎重,此时选择单髁或是全膝,需个性化考虑。     

骨形态发生蛋白基础及其基因治疗的研究进展

骨形态发生蛋白是由Ｕｒｉｓｔ[1] 在 196 5年对脱钙骨基质的成骨研究中发现的 ,他们将脱钙骨基质植入动物的皮下和肌肉内可诱导软骨化骨的过程 ,随后从骨中分离出了一种小分子量的糖蛋白 ,并发现这种糖蛋白具有异位成骨的作用。Ｗｏｚｎｅｙ和ＣｅｌｅｓｔｅＺ[2 ] 在1988年对这种骨提取物的肽链进行分析 ,并测出其氨基酸的序列 ,首次克隆出ＢＭＰ 2 ,ＢＭＰ 3,ＢＭＰ 4。至今 ,已有 4 0多种ＢＭＰ蛋白被成功地分离。ＢＭＰｓ属于ＴＧＦ β超家族成员 ,其多肽结构具有相同的结构特征 ,即碳末端氨基酸排列顺序具有明显的特征性。ＢＭＰ家族…     

BMP-4cDNA的克隆表达及活性的初步测定

目的：利用原核基因工程生产有诱骨活性的骨形态发生蛋白－4（BMP－4），方法：应用RT－PCR技术，从成熟人的胎盘组织中扩增出长0．34Kb编码入骨形态发生蛋白－4成熟肽的基因序列，经测序证实后，装入表达载体pET-22b，诱导表达后SDS－PAGE显示在14kd处有一明显的表达条带，经初步鉴定，证实表达蛋白部分位于裂菌处理后的上清中，部分以包涵体的形式存在于沉淀中，将沉淀中的包涵体蛋白纯化，变性和复性处理，和上清中的蛋白分别经真空冷冻干燥后，植入小鼠的肌肉内检测蛋白活性。结论：第14d和21d，组织切片可见骨细胞和骨基质的形成，结论：大肠杆菌表达的BMP－4的经复性处理后具有诱骨活性。     

基因治疗与脊柱脊髓疾病

分子生物学的发展使基因治疗在医学的各个领域开始了探索性的研究。应用于脊柱脊髓疾病的基础研究主要在脊柱融合、椎间盘退变和再生、小关节疾患、脊髓损伤等方面,具有广阔的发展前景。     

膝关节骨性关节炎分子发病机制和治疗展望

膝关节骨性关节炎（ osteoarthritis ,OA）是一种常见的非对称性、非炎症性、无全身性征象的疾病,是骨科临床的常见病和多发病,多表现为膝关节的疼痛、畸形、不同程度的功能障碍,严重影响患者的生活质量和劳动能力［1］。目前临床上该病的治疗方法主要有：①非手术治疗,包括健康教育及生活指导、针灸推拿、康复治疗、药物治疗。②手术治疗,主要包括关节镜下膝关节冲洗和清理术、截骨术、关节置换术和膝关节融合术。③其他的新兴疗法,包括新兴的手术方法（骨膜和软骨膜的移植）、基因治疗、细胞因子治疗和综合治疗等［2］。     

横向复位器在股骨转子下骨折微创内固定术中的应用

目的 介绍横向复位器的设计原理及其在股骨转子下骨折闭合复位中的初步疗效.方法 回顾性分析2018年3月—2019年3月深圳市人民医院骨关节外科手术治疗的20例股骨转子下骨折患者资料,男性12例,女性8例;年龄26～72岁,平均54.2岁;摔伤10例,道路交通伤7例,高处坠落伤3例.设计骨牵引复位器并申请专利(ZL201...     

内外固定组合装置治疗股骨颈骨折的生物力学原理

目的；作者根据生物力学原理研制出一种新型治疗股骨颈骨折的组合固定器械，并对其进行生物力学测试。方法；取７具尸体髋关节标本，模拟股骨颈骨折然后采用组合装置固定，对照组采用单纯加压螺纹钉固定，对比两组固定的生物力学强度和刚度。结果：实验组在应力－应变，位移，刚度，抗扭强度和承载能力５方面均优于对照组。