绿色荧光蛋白标记的GRP78蛋白表达和功能研究

目的:应用增强型绿色荧光蛋白(EGFP)来标记葡萄糖调节蛋白78(GRP78),从而研究其与免疫细胞结合的情况。方法:通过在原核表达的GRP78的C末端连接一个EGFP来显示跟踪该蛋白的表达,进而通过流式细胞仪检测该蛋白同小鼠脾脏免疫细胞结合的情况。结果:GRP-EGFP融合蛋白分子量为126kD,Western Blot证实该蛋白表达正确,并且表达GRP78-EGFP的BL21菌在紫外光激发下发射出强烈的绿色荧光;与EGFP单体相比较,GRP78-EGFP主要与中性粒细胞相结合,其平均结合率为5.15%。结论:绿色荧光蛋白标记的GRP78蛋白在原核中的表达具有天然构象并能发挥标记目的蛋白的作用。     

异体输血对肿瘤患者的影响及改进措施

恶性肿瘤患者大多伴有贫血,针对此情况现今的临床医生为了提高血氧含量均会为患者输注血液制品.肿瘤患者在进行手术切除时,尤其是手术切除范围比较大,出血较多的患者,麻醉师也会在术中给患者输注大量的血液制品,包括红细胞、血浆、冷沉淀以及血小板.     

沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶DsbA对乙肝疫苗HBsAg'a'表位构象的作用研究

目的:研究沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶DsbA对乙肝疫苗HBsAg'a'表位构象的形成作用.方法:将沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶DsbA基因克隆于PET32b载体上,与乙肝疫苗HBsAg'a'表位载体共转BL21菌,运用流式细胞仪和荧光显微镜观察HBsAg'a'表位构象的形成.结果:在没有沙门氏菌胞周蛋白二硫键异构酶D...     

按需序贯介入疗法治疗中晚期肝癌的临床研究

目的 :研究按需序贯介入疗法治疗中晚期肝癌的疗效。方法 :中晚期肝癌 5 1例 ,随机分为两组 :治疗组 2 6例 ,按实际需要制定个体化介入治疗方案 ;对照组 2 3例 ,按常规计划完成TACE、PVE或PEIT。结果 :1、2、3、4、5年生存率治疗组为 92 .8%、5 0 .0 %、3 2 .1%、2 1.4%、10 .7% ;对照组为 65 .2 %、3 0 .4%、13 .0 %、0 %、0 % ,两组差异有显著性。     

TFR-M加化学栓塞序贯治疗伴门静脉癌栓晚期肝癌临床观察

对伴门静脉癌栓形成的原发性肝癌患者，行肝动脉化学栓塞和加转铁蛋白单克隆抗体生物导向治疗，并与单纯肝动脉化学栓塞作对照比较。结果显示〉观察组瘤体缩小〉５０％的部分缓解率为５８．３％，门静脉癌栓消失，缩小的有效率为８３．３％，均显著优于对照组的１８．２％和２７．３％，差异有高度显著性。     

血清半乳糖凝集素3对胰腺癌的诊断价值

目的 运用时间分解免疫荧光(TRFIA)法检测血清半乳糖凝集素3(Galectin-3,Gal-3)水平,并探讨Gal-3对胰腺癌的诊断价值.方法 采用固相双抗体夹心法建立检测血清Gal-3的TRFIA,探讨最佳实验条件.在最适条件下检测胰腺癌、胰腺良性占位、胰腺炎患者及健康对照者血清Gal-3水平,并联合检测血清CEA及CA19-9水平.结果 TRFIA法检测血清Gal-3的线性为0～100μg/L,批内变异系数(CV)≤6.45％,批间CV≤8.68％,平均回收率为106.6％.胰腺癌患者血清Gal-3水平为4.93(0.85～23.80) μg/L,明显高于胰腺良性占位者的2.83(2.17～4.06) μg/L、胰腺炎患者的2.62(0.55 ～9.76) μg/L和健康者的1.88(0.59 ～ 3.94) μg/L(P值均＜0.05).以3.77 μg/L为界,其诊断胰腺癌的敏感性为75.5％,特异性达90.9％.Gal-3与CEA及CA19-9水平均无相关性(r=0.1321,P=0.3761；r =0.0920,P=0.5384),Gal-3联合CEA或CA19-9检测,对胰腺癌的诊断敏感性可提高到92％.结论 TRFIA法检测血清Gal-3具有较好的敏感性和稳定性；Gal-3有望成为新的胰腺癌标记物.     

转化生长因子β1 siRNA靶向干预受照人胚肺成纤维细胞胶原合成

目的 研究辐射对人胚肺成纤维细胞HFL-1的基因表达及对转化生长因子β1 (TGF-β1)的影响,探讨TGF-β1 siRNA对受照HFL-1细胞胶原合成的干预作用。方法 将HFL-1细胞分为单纯照射组和空白对照组,予6 MV X射线500 cGy单次照射,照后24 h以基因芯片法分析两组基因表达差异及TGF-β1的表达差异; 将HFL-1细胞分为单纯照射组、阴性对照siRNA组和TGF-β1 siRNA组,照射后24 h采用RT-PCR、ELISA、免疫组织化学及Western blot观察TGF-β1 siRNA对TGF-β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原生成的干预作用;将HFL-1细胞分为地塞米松组、TGF-β1 siRNA组及TGF-β1 siRNA联合地塞米松组,以RT-PCR、免疫组织化学及Western blot观察照射后24 h不同干预方法对TGF-β1及Ⅰ、Ⅲ型胶原生成的影响。结果 芯片检测显示HFL-1细胞受照后基因表达谱明显改变,TGF-β1基因上调;单纯照射组TGF-β1基因(t=-18.580, P<0.001)、TGF-β1蛋白(t=-12.445, P<0.001)和羟脯氨酸(HYP)(t=-3.987,P=0.016)表达明显高于空白对照组。与单纯照射组比较,TGF-β1 siRNA组、地塞米松组和联合组的TGF-β1(t=13.235、6.943、-17.431,P<0.05)、α-SMA(t=12.548、6.966、13.988,P<0.05)、Ⅰ型(t=12.433、8.164、16.315,P<0.05)及Ⅲ型胶原(t=5.919、3.164、9.420,P<0.05)的表达均明显下降,且TGF-β1 siRNA组优于地塞米松组(t=7.110、7.976、4.196、5.935,P<0.05)。 结论 放射诱导HFL-1细胞基因表达谱明显改变,TGF-β1上调;TGF-β1 siRNA能有效沉默TGF-β1基因,干预Ⅰ、Ⅲ型胶原的产生;TGF-β1 siRNA干预胶原形成优于地塞米松。     

76例急性重症胰腺炎治疗的临床体会

目的：探讨急性重症胰腺炎（SAP）的诊断、治疗原则及方法,以提高患者的治愈率,减少病死率及并发症的发生。方法：回顾性分析我院76例SAP的诊断和治疗方法及其对病死率和并发症发生率的影响。结果：76例中,治愈58例（76．3％）、死亡18例（23．7％）。手术治疗组24例,死亡8例（33．3％）;非手术治疗组52例,死亡10例（19．2％）。本病的预后与早期诊断及治疗方法的选择密切相关。结论：彩色B超、CT检查有助于SAP的早期诊断,并对急性重症胰腺炎患者在综合治疗的基础上实施个体化治疗。可提高治愈率。     

氯沙坦对糖尿病大鼠肾脏的保护作用

目的:观察氯沙坦对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠肾脏病变的保护作用及其机制.方法:采用链脲霉素诱导SD大鼠造模,大鼠分为3组:正常对照组、DM模型组和氯沙坦治疗组.12周未时,采用HPLC-荧光分析法测定血浆同型半胱氨酸(homocysteine,Hey)含量;常规方法检测各组大鼠肾重/体重、血糖、尿素氮、血肌酐、尿白蛋白排泄率;放射免疫法检测肾组织血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)含量;免疫组化法检测肾组织结缔组织生长因子(connective tissue growth fae-tor,CTGF)表达;透射电镜观察肾脏超微结构.结果:12周末时,DM模型组大鼠血浆Hey的含量明显增加,肾皮质CTGF表达显著升高,肾组织AngⅡ含量显著增多,肾重/体重、血糖、尿白蛋白排泄率、尿素氮、血肌酐显著增高,肾脏超微结构改变明显.氯沙坦治疗组上述指标显著低于DM模型组(P＜0.01),肾脏超微结构改变明显较轻.结论:氯沙坦对DM大鼠肾脏形态和功能有明显保护作用,其机制值得进一步研究.