基因Ⅲ型乙型脑炎病毒Real-time PCR检测方法的建立及应用

目的建立针对云南地区流行的基因Ⅲ型乙型脑炎病毒株Real-time PCR检测方法。方法根据云南地区分离株乙型脑炎病毒株(Yunnan0901)基因组核苷酸序列设计特异性引物,构建pMD18-T-JEV-E质粒,以此为模板进行SYBR GreenⅠReal-time PCR扩增并制作标准曲线,摸索最佳反应体系条件,建立乙型脑炎病毒荧光定量PCR检测方法,并与普通RT-PCR方法相比较。结果建立的SYBR GreenⅠReal-time PCR标准曲线呈现良好的重复性和特异性,与模板浓度呈现良好的线性关系。与RT-PCR方法相比,SYBR GreenⅠReal-time PCR的灵敏度高10倍,而且不与猪瘟病毒、猪蓝耳病毒、猪圆环病毒、基孔肯雅病毒、辛德毕斯病毒核酸发生非特异性扩增,具有良好的特异性。用该方法检测云南部分地区的蚊虫样品,其中库蚊、按蚊乙型脑炎病毒阳性率分别为17.4%和30.7%,且主要为基因型Ⅲ型。结论本实验建立的检测基因Ⅲ型乙型脑炎病毒的SYBR GreenⅠReal-time PCR方法具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等特点,可应用于乙型脑炎疫情的监测。     

造瘘管部分脱出致十二指肠残端瘘一例报告

患者:男性,42岁。因患十二指肠球部溃疡8年,经系统内科治疗无效,在连续硬膜外麻醉下行胃大部分切除术。术中见十二指肠后壁距幽门约1.5ｃｍ处有一穿透性溃疡,溃疡周围瘢痕组织与胰腺广泛粘连。于幽门右侧切断十二指肠,行溃疡旷治。因考虑术后残端愈合差而在残端内置剪有侧孔的16号尿管,然后封闭十二指肠残端。经该尿管注水检查无渗漏。按Ｐｏｌｙａ’ｓ法行胃空肠吻合,十二指肠残端处置橡皮引流管后关腹,手术经过顺利。术后第二天,患者因体位改变牵拉造瘘管及腹腔引流管后上腹部疼痛加剧,且向右下腹漫延。十二指肠造瘘管引流量减少(24小时量…     

脂微球前列腺素E1治疗急性脑梗死的效果评价

目的：评价脂微球前列腺素E1治疗急性脑梗死的疗效。方法将87例急性脑梗死患者分为对照组（n=43）和观察组（n=44）,2组患者在常规治疗的基础上,对照组给予复方丹参16 mL＋低分子右旋糖酐500 mL静脉滴注,1次/d;观察组给予脂微球前列腺素E110μg＋生理盐水100 mL静脉滴注,1次/d,2组疗程均为14 d。对2组治疗效果和美国国立卫生院卒中量表（NIHSS）评分进行比较。结果观察组总有效率77.3%,高于对照组的55.8%,差异有统计学意义（P〈0.05）;2组患者治疗前NIHSS量表评分无统计学差异,治疗后观察组为（13.1＆#177;2.0）分,对照组为（14.3＆#177;2.3）分,2组比较有统计学差异（P〈0.05）。结论脂微球前列腺素E1治疗急性脑梗死效果满意,值得临床推广。     

一期切除吻合治疗左半结肠癌性梗阻

目的：总结一期切除吻合治疗左半结肠癌性梗阻的方法和体会,介绍预防吻合口漏的措施。方法：本组一期切除吻合治疗左半结肠癌性梗阻１６例,梗阻时间１．５～６天,按改良Ｄｕｃｋｅ＇ｓ分型,Ｂ期２例,Ｃ１期８例,Ｃ２期６例。结果：术后１５例伤口一期愈合,伤口感染１例,平均住院２５天,无吻合口漏发生。结论：此法优于分期手术,但要掌握适应证,术中防止吻合口漏发生,术中减压和结肠灌洗,术后应用抗生素等,可促进结肠愈合。     

基因Ⅲ型乙型脑炎病毒Real-time PCR检测方法的建立及应用北大核心CSCD

目的建立针对云南地区流行的基因Ⅲ型乙型脑炎病毒株Real-time PCR检测方法。方法根据云南地区分离株乙型脑炎病毒株(Yunnan0901)基因组核苷酸序列设计特异性引物,构建pMD18-T-JEV-E质粒,以此为模板进行SYBR GreenⅠReal-time PCR扩增并制作标准曲线,摸索最佳反应体系条件,建立乙型脑炎病毒荧光定量PCR检测方法,并与普通RT-PCR方法相比较。结果建立的SYBR GreenⅠReal-time PCR标准曲线呈现良好的重复性和特异性,与模板浓度呈现良好的线性关系。与RT-PCR方法相比,SYBR GreenⅠReal-time PCR的灵敏度高10倍,而且不与猪瘟病毒、猪蓝耳病毒、猪圆环病毒、基孔肯雅病毒、辛德毕斯病毒核酸发生非特异性扩增,具有良好的特异性。用该方法检测云南部分地区的蚊虫样品,其中库蚊、按蚊乙型脑炎病毒阳性率分别为17.4%和30.7%,且主要为基因型Ⅲ型。结论本实验建立的检测基因Ⅲ型乙型脑炎病毒的SYBR GreenⅠReal-time PCR方法具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等特点,可应用于乙型脑炎疫情的监测。     

血流感染成年患者的致病菌与药物敏感性研究

目的:研究血流感染成年患者的致病菌以及药物敏感性情况,为临床治疗提供依据。方法:分析在2015年1月-2016年12月本院各科室送检的临床患者血培养标本3 140例,阳性菌株359例,采用美国BD Phoenix~(TM)-100全自动鉴定药敏系统进行药物敏感性检测。结果:3 140例患者的血液标本中分离出病原菌359株,检出阳性率为11.43%。革兰阴性杆菌264株,占比73.54%;革兰阳性球菌91株,占比25.35%;真菌4例,占比1.11%。大肠埃希菌、阴沟肠杆菌对碳青霉烯类药物的耐药率为0;肺炎克雷白菌对碳青霉烯类药物的耐药率为3.57%。在金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率为21.43%,凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)中耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)的检出率为71.43%。结论:血液感染成年患者的致病菌主要为革兰阴性杆菌为主,其中以大肠埃希菌和阴沟肠杆菌为主,对哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星及头孢他啶的耐药率较低;耐甲氧西林葡萄球菌对大环内酯类、青霉素类、氨基糖苷类、红霉素、克林霉素、喹诺酮类、复方磺胺的耐药率均较高,应引起临床研究的关注和重视。     

腹腔镜下多脏器联合手术的临床应用

目的 应用腹腔镜技术行腹腔内脏器联合切除术。方法 分析我院近十年行腹腔镜腹腔内多脏器联合切除38例，其中胆囊 阑尾切除18例，胆囊切除 肝囊肿开窗术5例，胆囊切除 胆总管切开取石1例，胆囊切除 肾囊肿去顶术1例，胆囊切除 肝脓肿切开引流 阑尾切除1例，移动盲肠固定 阑尾切除 卵巢囊肿切除1例，胆囊切除 卵巢囊肿切除8例，阑尾切除 卵巢囊肿切除2例，胆囊切除 子宫，卵巢切除1例。结果 38例均手术顺利，平均手术时间75min(30～120min)，术后平均住院5d，无并发症，效果满意。结论 腹腔镜下多脏器联合切除不增加病人痛苦，同时切除多个病变脏器，避免开腹或上下腹同时切开，住院时间短，费用低，美容效果好。     

四环素类抗生素对基因表达的影响及其应用

简述四环素在基因表达、基因治疗和癌症治疗中的最新应用。四环素诱导基因表达系统的建立可以使基因表达在活体外进行控制。在这一系统中,四环素及其类似物强力霉素被作为有效的基因“控制开关”。这一系统的成功建立可以通过加入或移去四环素或强力霉素,对外源基因在有机体中转录的开和关进行准确地、定量地和特异地控制,并为其应用于基因治疗提供了广泛的应用前景。     

北京房山区健康人群6项生化指标参考区间验证分析

目的验证北京市房山区健康体检人群丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、总蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、球蛋白(GLB)、清蛋白/球蛋白比值(A/G)的参考区间是否符合行业标准参考区间。方法按照卫生部2012年12月发布的行业标准WS/T 404-2012《临床常用生化检验项目参考区间》中第1部分和第2部分相关指标的参考人群筛选标准,从北京房山区第一医院体检中心2013年1~12月筛选18~84岁健康体检者5 798例,其中男3 046例,女2 752例,使用非参数统计方法统计该研究人群的参考区间,与行标参考区间进行比较。结果北京市房山区健康体检人群ALT、AST、TP、ALB、GLB、A/G得到的参考区间,与行业标准比较,基本一致。结论国家新的常用生化检验项目参考区间行业标准,适用于北京市房山区成年人群。