应对生物恐怖的检测技术研究进展

生物恐怖对人类的威胁是巨大而多元化的,现场快速诊断以确定生物恐怖的性质,对于采取正确而及时的应对措施至关重要。本文综述了可能被用作生物恐怖活动的各类生物有害物质,包括传染性极强的病原体或剧毒物,以及针对这些生物有害物质的检测技术研究新进展。     

蛋白质纯化的方法选择

随着分子生物学的发展,越来越多的科研人员熟练掌握了分子生物学的各种试验技术,并研制成套试剂盒,使基因克隆表达变得越来越容易[1].但分子生物学的上游工作往往并非是最终目的,分子克隆与表达的关键是要拿到纯的表达产物,以研究其生物学作用,或者大量生产出可用于疾病治疗的生物制品.相对与上游工作来说,分子克隆的下游工作显得更难,蛋白纯化工作非常复杂,除了要保证纯度外,蛋白产品还必须保持其生物学活性.纯化工艺必须能够每次都能产生相同数量和质量的蛋白,重复性良好.这就要求应用适应性非常强的方法而不是用能得到纯蛋白的最好方法去纯化蛋白.在实验室条件下的好方法却可能在大规模生产应用中失败,因为后者要求规模化,且在每日的应用中要有很好的重复性.本文综述了蛋白质纯化的基本原则和各种蛋白纯化技术的原理、优点及局限性,以期对蛋白纯化的方法选择及整体方案的制定提供一定的指导.     

应对生物恐怖的检测技术研究进展

生物恐怖对人类的威胁是巨大而多元化的，现场快速诊断以确定生物恐怖的性质，对于采取正确而及时的应对措施至关重要。本文综述了可能被用作生物恐怖活动的各类生物有害物质，包括传染性极强的病原体或剧毒物，以及针对这些生物有害物质的检测技术研究新进展。     

前列腺特异膜抗原mRNA检测方法的建立及应用

目的 建立前列腺特异膜抗原(PSM)mRNA检测方法。方法 利用异硫氰酸胍／酚／氯仿／异戊醇一步法从前列腺癌患者外周血有核细胞或前列腺癌组织中提取总RNA,进行RT-PCR扩增。结果 在PCR反应体系中投入相当于1．100个癌细胞所含总RNA量时,均能得到清晰的262bp的产物带。结论 本法有很高的稳定性和灵敏度。临床应用有助于早期发现前列腺癌转移、复发和判断疗效。     

人白细胞抗原-DPB1基因直接测序分型技术

研究建立准确的基于人白细胞抗原一ＤＰＢ１（ＨＬＡ－ＤＰＢ１）核酸序列的基因分型技术,为疾病与ＨＬＡ基因相关性研究及器官、组织移植提供准确的ＨＬＡ基因分型方法。使用第十一届国际组织相容性会议提供的引物,经ＰＣＲ技术扩增、分离相应的基因片段,纯化后用ＰＥ公司四色荧光染料终止剂标记循环测序技术直接测定核酸序列,获得个体基因型序列资料,通过与基同型资料数据库比较确定基因型别。这一技术可以准确地确定个体的 ＨＬＡ－ＤＰＢ１的基因型别并得到核酸序列。为进一步研究奠定了基础。本技术可用于其它类似的研究工作。     

血管活性物质测定在心血管疾病中的意义

目的 :检测原发性高血压 (EH)和冠心病 (CHD)患者血中CNP、NO、CGRP、ET的含量 ,探讨其与内皮细胞功能的关系及临床意义。方法 :EH组 30例、CHD组 33例、正常对照组 30例 ,均为男性。CNP、CGRP、ET采用放射免疫分析法测定 ,NO采用生化比色镉还原法测定。结果 :EH和CHD组分别与对照组比较CNP、ET含量明显增高 (CNP :P <0 .0 1,ET :P <0 .0 5 ) ,NO、CGRP则明显降低 (P <0 .0 1) ;相关分析表明 :两组患者CNP与CGRP之间具有显著负相关性 (EH组r=0 .5 6 7,P <0 .0 1、CHD组r =0 .42 8,P <0 .0 5 )。结论 :检测EH和CHD血中CNP、NO、CGRP、ET含量变化 ,为研究EH ,CHD与内皮细胞功能关系、发病机理等提供了有价值的实验室依据。     

转移前列腺癌细胞RT-PCR检测方法的建立(摘要)

应用高灵敏度和特异的巢式逆转录技术（ＲＴＰＣＲ）检测前列腺特异膜抗原（ＰＳＭ）ｍＲＮＡ的方法，用于检测前列腺癌患者体内异位存在的转移前列腺癌细胞，以期有助于对前列腺癌的诊断、病理分期、疗效监测和病情预后。报告如下。材料与方法前列腺癌组织块、阳性前列...     

前列腺特异膜抗原

ＰＳＭ是近年来发现的存在于前列腺细胞膜上的膜糖蛋白，具有极高的组织特异性，随着研究不断深入，对其性质和作用的进一步阐明及检测方法更加完善，必将有利于对前列腺疾病的预防、诊断和治疗。本文对ＰＳＭ的生物学性质及其医学应用进行了综述。     

生物素化HCV多抗原表位融合基因的克隆及可溶性表达

为了建立丙型肝炎病毒抗体(HCV-Ab)的双抗原夹心ELISA检测方法．克隆表达带有生物素标签的Hcv多种抗原优势表位融合蛋白，选取HCV各抗原如Core，NS3，NS4，NS5和E的优势抗原表位片段编码序列．克隆重组为融合基因，插入Pinpoint^TM Xa-1 T载体中诱导表达，并用Western blot进行抗原性及标签生物素活性鉴定；表达抗原经Promega SoftLink Soft Release Avidin Resin系统亲和层析纯化后包被酶联板，用抗HCV单片段抗体阳性血清对表达融合蛋白各区的抗原性作间接ELISA法鉴定。结果显示：成功构建了带有生物素标签的HCV多抗原表位融合基因表达载体，该载体可在JM109(DE3)中可溶性表达目的蛋白，表达产物携带生物素标签，融合的各片段区均具有良好的抗原性。结论：所构建融合抗原可可溶性表达，可以用作双抗原夹心ELISA的酶标抗原．所含生物素标签也可用作酶联检测的生物素一亲和素信号放大系统。