白介素-1受体相关激酶-2和磷脂酰肌醇 3-激酶协同调控白介素-1诱导的NF-κB 活化

目的研究白介素1受体相关激酶2(IRAK-2)和磷脂酰肌醇 3-激酶(PI 3-激酶)在白介素-1(IL-1)诱导核因子- κB(NF-κB)活化中的作用.方法 Lipofectin介导反义IRAK-2寡核苷酸或反义PI 3-激酶寡核苷酸转染HepG2细胞后,用逆转录PCR法检测IRAK-2 mRNA和PI 3-激酶 mRNA表达水平,以Sandwich ELISA法检测NF-κB的活化.结果 (1) 反义IRAK-2寡核苷酸和反义PI 3-激酶寡核苷酸分别抑制IRAK-2 mRNA和PI 3-激酶mRNA的表达;(2)反义IRAK-2寡核苷酸或反义PI 3-激酶寡核苷酸部分抑制NF-κB活化;(3)与反义IRAK-2寡核苷酸或反义PI 3-激酶寡核苷酸单独转染HepG2细胞相比,反义IRAK-2 寡核苷酸和反义PI 3-激酶寡核苷酸共转染HepG2细胞对NF-κB的抑制作用明显增强.结论在HepG2细胞中,IRAK-2和PI 3-激酶都调控NF-κB活化但都不能完全激活NF-κB,IRAK-2和PI 3-激酶在调控NF-κB 活化时有协同作用.     

顺铂通过激活p53信号通路抑制人食管癌细胞的生存

研究顺铂抑制人食管癌细胞生存的作用及其机制。细胞活力实验检测顺铂对食管癌亲代细胞EC109及耐药细胞EC109/CDDP的杀伤作用。Western blot检测顺铂处理后食管癌亲代细胞EC109及耐药细胞EC109/CDDP的p53和Phospho-p53(Ser15)的蛋白表达。克隆存活实验检测顺铂单独及联合p53抑制剂Pifithrin-α对食管癌亲代细胞EC109及耐药细胞EC109/CDDP生存的影响。实验结果显示,与亲代细胞EC109比较,耐药细胞EC109/CDDP保持了对顺铂的耐药性,IC₅₀分别是(20.4±4.4)μmol/L和(5.7±0.1)μmol/L。在亲代和耐药人食管癌细胞,顺铂不改变p53蛋白的表达,但增加了p53蛋白在Ser15位磷酸化水平。顺铂抑制了EC109及耐药细胞EC109/CDDP细胞的生存能力,而p53抑制剂Pifithrin-α在亲代细胞和耐药细胞不同程度的拮抗了顺铂的这一作用。顺铂通过激活p53信号通路,抑制了人食管癌细胞的生存。     

阿尔茨海默病和额颞叶痴呆徘徊行为的比较

目的 比较阿尔茨海默病和额颞叶痴呆徘徊者步行活动水平及活动节律的差异.方法 利用电子示踪监测系统对阿尔茨海默病(Alzheimer disease,AD)徘徊者27例及额颞叶痴呆(frontotemporal dementia,FTD)徘徊者7例进行连续30 d的24 h活动监测,比较两组日、夜活动水平(步行距离),以及活动节律的日间稳定性和日内变异性.结果 AD组和FTD组的年龄分别为 (73.89 ± 9.12)岁和(63.43 ± 14.93)岁,而发病年龄分别为 (70.16 ± 9.26)岁、(58.17 ± 15.16)岁.AD组的年龄较大而发病年龄较晚(P ＜ 0.05).AD组和FTD组在6:00 ～ 23:59的步行距离分别为(2119.39 ± 2535.59)m、(4842.44 ± 2617.94)m,后者较长(P ＜ 0.05),但两组在0:00 ～ 5:59的活动水平差异无统计学意义(P ＞ 0.05).FTD组活动节律更加稳定[(0.50 ± 0.11) vs (0.29 ± 0.15),P ＜ 0.01],日内活动变异片段数更少[(2.80 ± 0.74) vs (4.07 ± 0.95),P ＜ 0.01].结论 AD 和FTD 两类痴呆的徘徊行为特点不同,提示有必要建立痴呆亚型特异性徘徊行为的非药物干预策略.     

盾叶鬼臼对γ射线损伤的造血系统的保护作用

盾叶鬼臼Podophyllum hexandrum Royale对致死性γ射线辐射损伤有明显的抑制作用,半合成鬼臼毒素已用于治疗多种疾病。作者评价了除去部分毒性物质鬼臼毒素的盾叶鬼臼制剂REC-2001对哺乳动物造血系统的放射保护作用。该植物根茎粉碎后依次用石油醚和乙醇提取,再用1%盐酸沉淀以除去鬼臼脂,过滤,真空干燥。干燥的树脂状物再依次用石油醚和氯仿提取,氯仿溶部位溶于甲醇,与中性氧化铝煮沸,溶液过滤,减压蒸干,剩余物溶于甲醇-苯(2∶1),使鬼臼毒素结晶,母液浓缩即得REC-2001。REC-2001含鬼臼毒素仅3.25%。78只Swiss小鼠用于体内实验,每组6只…     

HPLC法测定妇安口服液中阿魏酸的含量

目的:建立以高效液相色谱法测定妇安口服液中阿魏酸含量的方法。方法:色谱柱为Hypersil BDS C18(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-0.01mol.L-1磷酸二氢钾溶液(磷酸调pH3.7),梯度洗脱,检测波长为323nm,流速为1mL.min-1。结果:阿魏酸的检测浓度在8~40μg.mL-1范围内与峰面积积分值呈良好的线性关系(r=0.9994);平均回收率为99.03%,RSD=0.63%(n=6)。结论:本方法简便、快捷、结果准确,可用于妇安口服液的质量控制。     

食用大黄根特殊提取物ERr731~及其苷元、结 构相关化合物对人U2OS骨肉瘤细胞中雌激素受体 亚型的特异性激活作用

食用大黄 Rheum rhaponticum L.根特殊提取物ERr 731~是缓解更年期症状的药物 Phytoestrol~N中的主要成分。在研究中发现 ERr 731~及其苷元反式-丹叶大黄素和去氧丹叶大黄素作为单独测试物,不能激活人子宫内膜腺癌细胞中的α-雌激素受体(ERα)。然而,这些物质与结构相关的羟基芪类化合     

Transportation characteristics of nolatrexed in three tumor cell lines

Objective：To investigate the association of the transportation characteristics of nolatrexed in tu-mor cells with its drug sensitivity. Methods: The sensitivity of 3 tumor cell lines, C6, SRS82 and LoVo, to nolatrexed were determined by growth inhibition study. After exposure to 20μmol/L nolatrexed at different time intervals ranging from 0 to 30 rain, or to nolatrexed at different concentrations ranging from 0 to 40μmol/L for 10 min, the intracellular drug concentration was measured using high-performance liquid chro-matography. Results: C6 was the most sensitive cell line among the three, with sensitivity 6.8-fold and 13.8-fold those of SRS-82 and LoVo cells respectively. Transportation of nolatrexed in the 3 cell lines were qualitatively similar, which rapidly achieved steady-state within 5 min, and linear relationship between the in-tracellular and extracellular drug concentration was observed. The intracellular steady-state level achieved in C6 was significantly higher than those in the other two cell lines, the latter having comparable levels. Con-clusion: Nolatrexed enters the cell very quickly and different transport capacities are involved in the genera-tion of varied sensitivity to nolatrexed in tumor cells.     

Labrasol对P-gp底物罗丹明123经肠黏膜透过性的影响

目的观察低浓度labrasol对肠黏膜P—gP的调控作用。方法使用体外扩散池评价罗丹明123（R123）经空肠、回肠和结肠黏膜的经时经吸收方向和分泌方向的透过量和透过系数（Papp）,并测定不同浓度labrasol对R123和荧光素钠（CF）经肠黏膜透过性的影响。R123和CF在接受室中的浓度用荧光分光光度法测定。结果R123经肠道黏膜的透过性存在部位差,即以空肠、回肠和结肠的次序透过性依次减少。另一方面,R123经肠道分泌方向的透过性显著地高于其吸收方向的透过性。低浓度的labrasol具有增加R123经吸收方向的透过性,减少经分泌方向的透过性。但试验浓度的labrasol对CF的肠道转运没有影响。结论低浓度的labrasol可通过对P—gP功能的抑制而用于改善受P—gP介导药物的吸收,有望提高此类药物的口服生物利用度。     

洛拉曲克对胸苷酸合成酶蛋白质表达水平的动态影响

目的研究洛拉曲克作用后不同细胞胸苷酸合成酶(TS)蛋白质表达水平的动态变化有无差异。方法时间曲线中,LoVo、Lo2细胞分别用浓度为10、75μmol/L(接近各自的IC90值)的洛拉曲克处理0~60h。剂量曲线中,洛拉曲克作用时间36h,LoVo细胞剂量范围0~40μmol/L。Lo2细胞剂量范围0~125μmol/L。分别以流式细胞术法、Westernblot法检测两种细胞TS蛋白表达水平。结果两种细胞在经过洛拉曲克处理后,TS表达的时间和剂量曲线具有显著不同的动态规律。在时间曲线中,LoVo细胞TS蛋白的表达水平与对照相比呈持续升高的趋势,Lo2细胞TS蛋白的表达水平与对照相比先降低,24h后TS蛋白表达水平逐渐回升,但至60h尚未恢复至对照水平。在剂量曲线中,LoVo细胞TS蛋白的表达水平的变化呈峰形,以IC90值附近为最高,Lo2细胞TS蛋白的表达水平,在低于IC90值的剂量点TS蛋白水平降低程度相似,高于IC90值的剂量处理后TS水平随剂量的升高而下降。结论洛拉曲克可以产生TS诱导现象,不同细胞在洛拉曲克作用后TS动态表达的差异是细胞耐药性不同的原因之一。