肺炎链球菌蛋白质疫苗研究进展

随着肺炎链球菌(SP)耐药菌株的不断出现使得疫苗研发备受关注,但目前使用的荚膜多糖及其结合疫苗有很大局限性。因此,针对SP主要毒力因子的蛋白质疫苗迅速发展,其中SP单一蛋白质疫苗包括溶血素、表面蛋白A、表面黏附素A、三组氨酸蛋白D、黏附毒力因子A,蛋白质联合疫苗包括多价重组蛋白质联合疫苗、多价蛋白质融合疫苗,已取得一定实验和临床效果,有望替代多糖疫苗。     

高效液相色谱法测定金钱草胶囊中槲皮素的血药浓度

目的建立金钱草胶囊中槲皮素的血药浓度测定方法,为临床应用和药代动力学研究提供技术参考。方法采用高效液相色谱-紫外检测方法测定,色谱柱为Kromasil C8柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.4%磷酸溶液(40∶10∶50),流速1 mL/min,柱温30℃,进样量20μL,检测波长360 nm。血样提取方法,以β-葡萄糖苷酸酶水解后,以乙酸乙酯提取,氮气流吹干后复溶进样。结果槲皮素保留时间约为8.8 min,金钱草胶囊中槲皮素的血药浓度线性范围0.08～12μg/mL,最低定量限为0.05μg/mL,检测限为0.02μg/mL。方法平均回收率为97.50%～102.50%,水解提取回收率为76.46%～87.43%,日内精密度RSD为4.18%～6.17%,日间精密度RSD为5.08%～8.63%。结论方法简便,分析速度快,灵敏度较高,重复性好,适用于临床血药浓度测定及药代动力学研究。     

检验医学生科研创新思维培养的实践与评价

随着五年制医学检验专业改为四年制医学检验技术专业,培养目标发生了变化,新的培养目标强调科研创新思维、创业精神与能力培养。这个目标定位适应国家高等教育和我省检验专业人才需求。如何培养大学生科研创新思维,培养适应社会和学科发展需要的专门人才,是医学检验技术专业教学亟待解决的问题。可将多种科研创新思维培养模式应用于医学检验技术专业教学中,探讨医学检验技术专业人才培养最佳方式并进行效果评价。     

防御素在抗结核分枝杆菌感染中的作用机制研究进展

防御素是广泛分布于生物界的一类富含半胱氨酸的内源性阳离子抗菌肽,在抵抗病原微生物入侵及调节机体免疫功能等方面发挥重要作用。研究发现,防御素对细菌、真菌或病毒等均具有杀灭作用,其在抗结核分枝杆菌感染中也展现出突出优势。防御素独特的抗菌机理可以破坏结核分枝杆菌的细胞壁、细胞膜等生物学结构,从而抑制结核分枝杆菌。本文对防御素的分子结构、生物学作用、抗结核作用及机制予以综述。     

肺炎链球菌SP2108蛋白的原核表达及免疫原性分析

目的制备纯化的肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae,S.pn)SP2108蛋白,分析其在常见S.pn菌株中的保守性,并评价其作为S.pn候选疫苗的可行性。方法利用PCR法扩增全长SP2108基因,将其克隆至原核表达载体p Cold TF中,转化E.coli BL21(DE3)后IPTG诱导蛋白表达,经Ni-NTA树脂纯化获得高纯度的目的蛋白;将纯化蛋白免疫C57BL/6小鼠制备多克隆抗体,并用间接ELISA检测效价,Western blot鉴定该蛋白在6种常见S.pn菌株的保守性。从Genebank中找出不同S.pn菌株的SP2108蛋白质氨基酸序列,并用Clustal X 2.1软件分析其序列保守性。结果获得了可溶性形式的SP2108蛋白,该重组蛋白免疫小鼠后可获得高滴度的多克隆抗体;Western blot验证了SP2108蛋白在6株常见S.pn菌株中均有表达;SP2108蛋白在不同型别S.pn中氨基酸序列保守性为100%。结论原核表达并纯化了SP2108蛋白,该蛋白保守性高,免疫小鼠后可获得高滴度的多克隆抗体,可能是一种较好的S.pn候选蛋白疫苗。     

丹皮与关木通配伍减毒作用研究

目的 探讨丹皮与关木通配伍的减毒作用.方法 比较关木通单煎和丹皮与关木通配伍的减毒效果,检测溶液中马兜铃酸的含量;进行动物实验,研究关木通单煎液和配伍液大鼠肾功能指标的变化情况.结果 配伍后的溶液中马兜铃酸单位含量明显降低,大鼠灌胃后明显较单煎液灌胃能减轻肾功能损害.结论 丹皮与关木通配伍可以减轻或抑制关木通的肾毒性作用.     

不同基因型HBV对药物反应性和S基因突变位点研究

目的分析HBV不同基因型对药物反应性及S基因变异情况。 方法收集遵义医学院附属医院于2016年3月至2017年7月就诊的186例HBV DNA阳性乙型肝炎患者的血清样本,根据是否用药分为治疗组130例和对照组56例,治疗组根据用药不同分为干扰素组、核苷（酸）类似物组、保肝药组和中成药组,分别提取HBV DNA后扩增S基因并测序,结合临床资料分析疗效与基因型相关性。 结果对照组共51例患者扩增出S基因[91.1%（51/56）,其中B基因型30例,C基因型21例],治疗组共有104例患者样本扩增出S基因[80.0%（104/130）,其中B基因型62例,C基因型42例],均以B、C基因型为主。两种基因型对核苷（酸）类似物的反应性（肝功能改变、HBVDNA拷贝数）与未治疗组差异有统计学意义（P < 0.01）。B基因型HBV S基因经核苷（酸）类似物作用后,第597位碱基鸟嘌呤G变为腺嘌呤A即183位苯丙氨酸（Phe/F）突变为缬氨酸（Val/V）,使翻译终止。保肝药和干扰素引起131位鸟嘌呤G突变为腺嘌呤A,进而甘氨酸（Gly/G）变为谷氨酸（Glu/E）,且9和213位氨基酸突变率为100%。C基因型HBV则发生26位胞嘧啶C突变为胸腺嘧啶T,即脯氨酸（P）变为亮氨酸（L）及53位点丝氨酸（Ser/S）突变为亮氨酸L。保肝药物作用主要引起68位点异亮氨酸（Ile/I）突变为苏氨酸（Thr/T）和49位点P变L。干扰素和中成药均可引起225位酪氨酸-异亮氨酸（YI）变为异亮氨酸-组氨酸（IH）和9位氨基酸P变L。 结论不同HBV基因型对药物反应不同,B、C基因型HBV对药物反应可产生相同突变位点。     

银杏叶片在治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病心绞痛患者中的应用

目的探讨银杏叶片对冠状动脉粥样硬化性心脏病心绞痛患者的疗效。方法选择我院2009年10月至2011年10月住院的冠状动脉粥样硬化性心脏病心绞痛患者84例,随机分为观察组(n=42)与对照组(n=42),观察组在常规治疗基础上应用银杏叶片,对照组在常规治疗基础上应用硝酸异山梨酯,对比观察两组患者心绞痛发作次数和持续时间变化、临床治疗效果及不良反应,并进行疗效评价。结果观察组患者治疗后每周心绞痛发作频率和持续时间分别为(2.4±0.7)次和(2.6±0.5)min;对照组分别为(5.3±0.6)次和(4.5±0.6)分钟;两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组显效21例,有效15例,无效6例,总有效率为85.71%,对照组显效12例,有效13例,无效17例,总有效率为59.52%,两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组1例出现不良反应,对照组3例出现不良反应。两组不良反应率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论银杏叶片治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病心绞痛安全有效,具有良好效果。     

肺炎链球菌SPD1672蛋白EL4功能环的原核表达及多克隆抗血清制备

目的原核表达肺炎链球菌SPD1672蛋白膜外EL4功能环,制备并鉴定其多克隆抗血清。方法生物信息学分析SPD1672蛋白结构功能区,用p Cold TF质粒构建含EL4功能环的原核表达载体,IPTG诱导蛋白质表达后行镍柱纯化。经HRV 3C蛋白酶酶切、鉴定后,免疫新西兰大白兔以制备多克隆抗血清,间接ELISA鉴定效价,western blot鉴定抗血清与肺炎链球菌D39菌株天然蛋白质的亲合力。结果 EL4环可能为SPD1672蛋白酶活性中心。成功构建p Cold TF-SPD1672EL4原核表达载体,诱导表达后获得纯度大于95%的重组融合目的蛋白质。该蛋白质免疫新西兰大白兔后获得效价达到5.12×106的多克隆抗血清,此抗血清与重组的SPD1672EL4蛋白及肺炎链球菌中天然SPD1672蛋白有较好的亲合力。结论成功获得高纯度的肺炎链球菌SPD1672EL4蛋白及其特异的多克隆抗血清,为进一步对SPD1672蛋白的结构与功能研究奠定了基础。     

浅论非洛地平的药理作用及临床应用

目的观察钙离子拮抗剂非洛地平的药理作用及治疗肾性高血压临床效果。方法选取148例肾性高血压患者均采用口服非洛地平片,2.5mg/次,2次/d,疗程为2个月。治疗后观察患者的血压、血、尿蛋白(β2-MG)、肾功能(BUN、Scr、UA、Ccr、24h尿蛋白定量)、不良反应及服药情况等。结果 148例患者在经过非洛地平治疗后收缩压、舒张压、血肌酐、尿素氮、肌酐清除率、血尿酸、24h尿蛋白定量比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论非洛地平对治疗肾性高血压有良好的效果。