解整合素-金属蛋白酶9在小鼠急性酒精性肝损伤过程中的表达分析北大核心CSCD

目的研究解整合素-金属蛋白酶9(ADAM9)在小鼠急性酒精性肝损伤过程中的表达变化规律。方法将50只健康雄性小鼠随机分为正常组10只和实验组40只。实验组小鼠用56度乙醇12 m L·kg(-1)灌胃诱导小鼠急性肝损伤模型,分别于6,12,18和24 h后各取10只小鼠摘除眼球取血并分离血清,同时分离正常组血清,检测谷草转氨酶(AST)活性;颈椎脱臼处死小鼠并取肝,用蛋白印迹法测定正常组和实验组小鼠肝组织中ADAM9蛋白的表达变化。结果小鼠经乙醇灌胃后0,6,12,18,24 h的AST活性分别为(112±25),(316±31),(767±45),(1020±49),(525±23)U·L(-1),灌胃后6 h,血清AST活性显著上升(P<0.05),随着时间的增加,血清AST活性持续升高,18 h后达到最高值(P<0.01),然后随着肝损伤的修复,血清AST活性开始出现下降,24 h后酶活性仍高于正常组(P<0.05)。免疫印迹结果显示,乙醇灌胃后6 h,ADAM9的蛋白表达量显著上升(P<0.05),随着时间的增加,ADAM9的蛋白表达量持续升高,18 h后达到最高值(P<0.01),然后随着肝损伤的修复,ADAM9的蛋白表达量开始出现下降。结论 ADAM9在小鼠急性酒精性肝损伤过程中的先升高后降低且变化显著,ADAM9可能起到了促进酒精性肝损伤的作用。     

中国妇女妊娠期肝异常的常见病因及对妊娠结局的影响Meta分析

目的分析中国妇女妊娠期肝异常的常见病因及对母婴结局的影响.方法计算机检索中国知网,万方数据库,维普数据库,收集中国近20年间发表的关于妊娠期肝异常的所有文献.并采用R软件、Stata软件进行数据的Meta分析.结果最终纳入37篇研究文献,累计病例共计8367例.Meta分析结果显示中国妇女妊娠期肝异常的常见病因构成比(95%CI)为:肝炎39%(30%-48%),妊娠高血压综合征17%(10%-25%),妊娠性肝内胆汁淤积症(intrahepatic cholestasis of pregnancy,ICP)17%(14%-19%),妊娠期急性脂肪肝(AFLP)3%(2%-4%),妊娠剧吐8%(6%-11%),HELLP综合征3%(1%-5%).其中由肝炎引起的妊娠期肝异常的妊娠结局中,孕妇早产、剖宫产、产后出血的概率分别为20%、35%、15%;胎儿窘迫、围产儿死亡的概率分别为26%、16%;妊娠高血压综合征引起的妊娠期肝功能异常中,孕妇早产、剖宫产、产后出血的概率分别为21%、62%、16%;胎儿窘迫、围产儿死亡的概率分别为40%、15%;由妊娠性ICP引起的妊娠期肝功能异常中孕妇早产、剖宫产、产后出血的概率分别为36%、70%、15%,胎儿窘迫、围产儿死亡的概率分别为35%、16%.并且妊娠期肝异常与不良妊娠结局显著相关,其OR值(95%CI)分别为:早产4.48(3.89-6.60),剖宫产3.75(3.28-4.29),产后出血5.36(4.07-7.05),胎儿窘迫3.78(3.16-4.53),围产儿死亡6.39(3.27-12.49),妊娠期高血压4.67(3.44-6.35),新生儿窒息3.07(2.18-4.32).结论肝炎是引起妊娠期肝功能异常的首要病因,其次为妊娠高血压综合征、妊娠性肝内胆汁淤积症;并且均可不同程度增加妊娠及分娩时母婴风险.     

利用CRISPR/Cas-9技术抑制热休克蛋白Gp96的表达对小鼠酒精性肝纤维化的影响

目的 探讨热休克蛋白Gp96对小鼠酒精性肝纤维化的影响。 方法 健康雄性C57BL/6 J小鼠220只,随机分为4组：正常对照组(n=10),生理盐水+酒精诱导纤维化组(n=70)。尾静脉注射CRISPR表达质粒Gp96-sgRNA3+酒精诱导肝纤维化组（n=70）,腹腔注射核因子κB（NF-κB）抑制剂PDTC+酒精诱导肝纤维化组（n=70）。于酒精诱导第8周眼球取血后处死各组小鼠,测定各组小鼠血清谷草转氨酶（AST）活性,HE染色检测各组小鼠肝脏病理变化,天狼猩红染色检测各组小鼠肝纤维化情况,过碘酸-雪夫(PAS)染色检测各组小鼠肝糖原变化情况;免疫印迹法检测小鼠肝脏Gp96和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达变化。 结果 与正常对照组相比,其余3组AST酶活性显著上升,肝纤维化加重,糖原显著减少（P<0.01）;与生理盐水+酒精组相比,注射质粒Gp96-sgRNA3+酒精组和注射NF-κB抑制剂+酒精组AST上升更为明显,肝纤维化更严重,糖原减少更多,Gp96表达显著下降,TGF-β1表达显著增加（P<0.01或 P<0.05）。 结论 尾静脉注射CRISPR表达质粒Gp96-sgRNA3显著抑制了小鼠肝脏Gp96的表达,促进了小鼠酒精性肝纤维化程度,NF-κB信号通路对Gp96的表达起到一定的调控作用。     

小鼠急性酒精性肝损伤过程中热休克蛋白Gp96的表达变化及意义

目的研究小鼠急性酒精性肝损伤过程中热休克蛋白Gp96的表达变化及意义。方法选取健康昆明雄性小鼠50只随机分为2组:正常组(n=10)、实验组(n=40)。正常组小鼠不做处理,实验组小鼠酒精灌胃(红星二锅头,16 ml/kg)诱导小鼠急性肝损伤,分别于灌胃后6、12、18和24 h将各组小鼠眼球取血并分离血清,检测谷丙转氨酶(ALT)活性;颈椎脱臼处死小鼠分离提取肝脏,石蜡切片苏木精-伊红染色(HE染色)观察各组小鼠肝组织病理学改变,蛋白免疫印迹法检测小鼠肝组织中热休克蛋白Gp96的表达变化。结果 ALT检测结果显示,酒精灌胃后,随着时间增加,血清ALT酶的活性持续升高,18 h后达最高值(P0.01),随着肝损伤的修复,血清ALT酶的活性开始出现下降;HE染色结果显示,酒精灌胃后,随着时间的增加,肝组织出现了不同程度的损伤,18 h后损伤积分达到最高值(P0.01),随着肝组织修复损伤积分有所降低:免疫印迹结果显示,酒精灌胃后Gp96的蛋白表达量随着时间的增加持续升高,18 h后达最高值(P0.01),随着肝损伤的修复,Gp96蛋白表达量开始下降。结论小鼠急性酒精性肝损伤过程中Gp96的变化显著表现为先升高后降低,Gp96可能在肝损伤后的修复中起重要作用。