双阴性T细胞和T淋巴细胞亚群在乳腺癌中表达特征及其诊断价值

目的 探讨双阴性T(DNT)细胞及T淋巴细胞亚群在乳腺癌中的表达情况以及与乳腺癌临床病理特征的关系,并联合肿瘤标志物分析对乳腺癌筛查的诊断价值。方法 采用病例对照研究方法,回顾性选取2021-09-30-2023-04-18中国人民解放军联勤保障部队第九六〇医院乳腺癌患者82例(乳腺癌组)、乳腺良性肿瘤患者88例(乳腺良性肿瘤组)及健康体检者81名(健康组)。采用流式细胞术检测分析3组外周血DNT细胞及T淋巴细胞亚群的表达情况,并探讨DNT细胞及其亚群与乳腺癌的临床病理关系。采用二元logistic回归分析乳腺癌发生的影响因素,受试者工作特征(ROC)曲线评估DNT细胞及肿瘤标志物癌胚抗原(CEA)、糖类抗原125(CA125)和糖类抗原15-3(CA15-3)单独或联合检测在乳腺癌中的诊断效能。结果 乳腺癌组CD4⁺ T细胞百分比、CD4⁺/CD8⁺比值及DNT细胞百分比分别为33.74%、1.35和7.84%,均高于健康组的26.75%、1.02和3.82%,并且乳腺癌组和乳腺良性肿瘤组的DNT细胞百分比分别为7.8...     

基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱技术建立结直肠癌诊断模型及初步验证

目的 基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术建立结直肠癌(CRC)诊断模型,寻找CRC潜在的血清学标志物。方法 收集自2018年12月至2020年12月于联勤保障部队960医院就诊的114例CRC初诊患者(CRC组)和进行体检的60例健康体检者(健康组)的血清标本,按照3∶1的比例随机分为训练组131例(CRC患者87例,健康者44例)与验证组43例(CRC患者27例,健康者16例),分别用于模型的建立和初步验证。应用弱阳离子交换磁珠(MB-WCX)进行血清中低丰度蛋白提取纯化,经MALDI-TOF MS筛选CRC组和健康组中差异蛋白峰;基于3种算法(遗传算法、监督神经网络算法和快速分类算法)建立诊断模型,选取差异最显著的两个蛋白峰做聚类分析,将验证组数据带入诊断模型验证其敏感性、特异性及诊断效率。结果 CRC组与健康组蛋白指纹图谱存在明显差异,共筛选出9个有统计学意义的差异蛋白峰(曲线下面积>0.70),在CRC组表达上调7个,下调2个;其中,m/z 4645.32和m/z 5906.48差异最显著(P<0.01),曲线下面积分别为0.91、...     

基于SMART-seq2测序分析结直肠癌外周血DNT细胞转录组的表达差异及功能初探北大核心CSCD

目的 探讨结直肠癌患者外周血中双阴性T细胞差异基因及功能。方法 选取2例结直肠癌患者和2例健康体检者,首先采用流式细胞术分选外周血双阴性T细胞,然后利用单细胞全长转录组（SMART-seq2）测序技术获得测序数据,筛选差异表达基因,并对筛选出的差异表达基因进行基因本体富集分析(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)途径富集分析。利用STRING数据库构建蛋白质互作网络,并通过Cytoscape软件鉴定关键基因。采用RT-qPCR验证差异表达基因。结果 与健康体检者相比,结直肠癌患者外周血双阴性T细胞差异基因共有1 276个,其中141个上调基因,1 135个下调基因。GO分析显示差异基因主要参与甲基化、代谢过程以及转移酶活性等生物学功能。KEGG通路分析显示差异基因主要涉及自噬、P53信号通路和磷酸肌醇代谢等信号通路。蛋白质互作网络包含1 154个节点和1 022条边,并鉴定出10个Hub基因：PIK3C3、WIPI1、ATG101、PIK3R4、DDX10、RBM28、SDAD1、ATG16L1、UVRAG、ATG7。RT-qPCR验证10个差异表达基因,其中7个差异基因表达变化趋势与测序结果一致,3个基因表达与测序结果不符。结论 DNT细胞可能通过甲基化、P53信号通路和自噬等作用参与了结直肠癌的发生发展,同时,DNT细胞可能通过对基因的调控抑制结直肠癌的发生发展。本研究为进一步探讨DNT细胞在恶性肿瘤中的功能提供理论依据。