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绿色荧光蛋白、菲立磁体外双标记神经干细胞及其活性的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的探索用绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)重组逆转录病毒和菲立磁(超顺磁性氧化铁,,Superparamagnetic Iron Oxide,SPIO)体外双标记神经干细胞的可行性及其对细胞活力的影响。方法用病毒介导的GFP基因转导大鼠胚胎神经干细胞。用SPIO和Lipofectamine体外磁化标记经GFP标记的胚胎神经干细胞。用荧光显微镜观察双标记神经干细胞,并行普鲁士蓝染色,了解转染成功率。MTT(四甲基偶氮唑蓝)法检测标记神经干细胞的细胞增殖活力。结果双标记神经干细胞分化的细胞荧光显微镜下观察见发出绿色荧光,普鲁士蓝染色呈阳性。而未标记神经干细胞荧光显微镜下观察未见发出绿色荧光,普鲁士蓝染色呈阴性。MTT法检测发现GFP和SPIO双标记神经干细胞的增殖活力与未标记神经干细胞相比无改变。结论绿色荧光蛋白重组逆转录病毒和菲立磁可以有效地标记体外分离培养的大鼠胚胎神经干细胞。双标记神经干细胞的增殖、分化活力与未标记神经干细胞相比无改变。 相似文献
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目的:探讨用锰增强磁共振功能成像(ME-MRI)检测大脑功能活动的可能性,为示踪移植神经干细胞(NSCs)在创伤性脑损伤大鼠脑内的功能作铺垫。方法:A组正常SD大鼠静脉缓慢输注四水合氯化锰(MnCl2·4H2O),用甘露醇开放其一侧血脑屏障,然后电刺激其对侧肢体,即刻行T1加权MRI扫描;同时比较C组未开放血脑屏障、D组未行肢体电刺激和应用钙通道阻断剂的ME-MRI图像。结果:仅静脉输注MnCl2·4H2O、开放血脑屏障和行电刺激的T1加权MRI上体感皮质区表现出高信号。结论:ME-MRI可在体评估大脑功能活动,并为移植NSCs在创伤性脑损伤大鼠脑内的功能评价提供依据。 相似文献
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大鼠创伤性脑损伤后神经干细胞的增殖及移植后的修复作用 总被引:3,自引:1,他引:3
目的:基于神经于细胞的自我更新和多向分化的特点,探讨创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)后神经于细胞(neural stem cells.NSCs)的增殖及其移植对脑损伤的修复作用。方法:实验于2004年在复旦大学附属华山医院神经外科动物实验室完成.采用Feeney氏法制备大鼠创伤性脑损伤模型,随机分为对照组、损伤组、PBS治疗组、NSCs移植治疗组,免疫组化检测大鼠损伤后海马NSCs的数量;用绿色荧光蛋白(GFP)标记的NSCs立体定向移植。神经损害严重程度评分和旋转爬杆试验对移植后大鼠的神经系统行为和运动功能进行评估,免疫组化染色观察NSCs的分化情况。结果:TBI后7d海马齿状回nestin阳性细胞明显增多,为(8.1&;#177;2.5)个,与正常动物组(2.5&;#177;1.3)个比较差异有非常显著性意义(F=40.91,P&;lt;0.01)。移植后部分GFP阳性细胞表达神经元特异性标记物β-tubilin Ⅲ,移植组大鼠神经系统行为学评分明显改善。结论:TBI后移植NSCs可以有效地促进损伤后大鼠神经行为功能的恢复,NSCs能够分化为神经元从而发挥对损伤后的大脑的修复作用。 相似文献
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nourpreviousstudy ,wedemonstratedthatratmarrowstromalcells (rMSCs)migratedintobrainanddifferentiatedintoneuralcellsafterinjectionintoCisternMagnuminadultratssubjectedtotraumaticbraininjury .1Itwasbelievedthatneurologicalfunctionimprovementwaspossiblydueto… 相似文献
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目的:基于神经干细胞的自我更新和多向分化的特点,探讨创伤性脑损伤(traumaticbraininjury,TBI)后神经干细胞(neuralstemcells,NSCs)的增殖及其移植对脑损伤的修复作用。方法:实验于2004年在复旦大学附属华山医院神经外科动物实验室完成。采用Feeney氏法制备大鼠创伤性脑损伤模型,随机分为对照组、损伤组、PBS治疗组、NSCs移植治疗组,免疫组化检测大鼠损伤后海马NSCs的数量;用绿色荧光蛋白(GFP)标记的NSCs立体定向移植。神经损害严重程度评分和旋转爬杆试验对移植后大鼠的神经系统行为和运动功能进行评估,免疫组化染色观察NSCs的分化情况。结果:TBI后7d海马齿状回nestin阳性细胞明显增多,为(8.1±2.5)个,与正常动物组(2.5±1.3)个比较差异有非常显著性意义(F=40.91,P<0.01)。移植后部分GFP阳性细胞表达神经元特异性标记物β-tubilinIII,移植组大鼠神经系统行为学评分明显改善。结论:TBI后移植NSCs可以有效地促进损伤后大鼠神经行为功能的恢复,NSCs能够分化为神经元从而发挥对损伤后的大脑的修复作用。 相似文献
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综合治疗COBB综合征一例报告并文献复习 总被引:1,自引:0,他引:1
COBB综合征是脊髓血管畸形中的一个特殊类型,又称为皮肤脊椎脊髓血管畸形(cutancous veriebral medullary angiomatosis),是同一椎体节段先天性外胚层,中胚层和神经组织的血管发育畸形。以同一椎体节段的皮肤、骨髂、脊髓的血管畸形为特点。临床非常罕见,迄今国内外文献报告的COBB综合征只有30余例。 相似文献
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骨髓基质细胞立体定向移植治疗大鼠脑缺血损伤的实验研究 总被引:6,自引:0,他引:6
目的:观察骨髓基质细胞立体定向移植对大鼠脑缺血损伤后神经功能恢复的作用并探讨其作用机制。方法:制作SD大鼠大脑中动脉缺血模型(MCAO);体外培养骨髓基质细胞,观察其生物学特性以及立体定向移植后对脑缺血损伤后神经功能改善情况。结果:骨髓基质细胞体外可以长期传代、扩增,分泌NGF、VEGF等多种神经保护性因子;立体定向移植后,骨髓基质细胞在脑内存活、迁徙,小部分分化成具有神经元表面标志的细胞,与对照组相比,骨髓基质细胞移植组神经功能改善情况好于对照组。结论:骨髓基质细胞具有多向分化潜能,表达并分泌多种神经保护性营养因子。立体定向移植MSCs,对改善脑缺血损伤后的神经功能状况具有积极作用。 相似文献
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人神经干细胞的分离、克隆和动物脑内移植及转基因表达 总被引:16,自引:3,他引:13
目的分离和克隆人神经干细胞,并在体外和体内分析其生物学特征.方法我们联合采用四步法从人胚胎前脑分离制备多潜能神经干细胞,并使用重组腺病毒相关病毒载体(rAAV)将LacZ基因和胶质细胞起源的神经营养因子(GDNF)基因转移到神经干细胞.结果二株人神经干细胞被成功建立.这些克隆化后的神经干细胞在细胞培养中和移植到新生小鼠脑内后能发育分化成神经元、少枝胶质细胞和星形胶质细胞.在rAAV转导基因后,神经干细胞可在体外和体内表达转基因产物.结论这种具有转基因表达能力的神经干细胞为神经系统疾病的进一步治疗研究提供了有潜在价值的细胞资源. 相似文献