孕酮对人T淋巴细胞体外活化CD69表达的作用

目的：探讨孕酮（Ｐｒｏｇｅｓｔｅｒｏｎｅ,Ｐｒｏｇ）及地塞米松（Ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ,Ｄｅｘ）对人外周血Ｔ淋巴细胞体外活化ＣＤ６９表达的作用。方法：以女性健康志愿者（１０名）为研究对象,以蛋白激酶Ｃ的刺激剂佛波醇酯（Ｐｈｏｒｂｏｌ ｅｓｔｅｒ,ＰＤＢ）为Ｔ淋巴细胞的活化剂,采用双荧光染色流式细胞技术。检测ＣＤ３＾＋的Ｔ淋巴细胞表达早期活化表面分子ＣＤ６９的百分率,以观察Ｐｒｏｇ、Ｄｅｘ及Ｐｒｏ０ｇ加上Ｄｅｘ对外周血Ｔ淋巴细胞体外活化的作用。结果：在体外培养条件下,无论单独使用Ｐｒｏｇ还是Ｄｅｘ均地强低剂量ＰＤＢ刺激ＣＤ６９的表达。然而,与单独使用Ｐｒｏｇ或Ｄｅｘ的作用相比。Ｐｒｏｇ加上Ｄｅｘ明显减弱低剂量ＰＤＢ的活化ＣＤ６９的表达。结论：同时使用Ｐｒｏｇ与Ｄｅｘ可明显抑制Ｔ淋巴细胞的体外活化,提示在临床上     

成人外周血αβ T细胞和γδT细胞体外活化CD69表达的比较性研究

目的：γδＴ细胞具有细胞毒效应，探讨γδＴ细胞体外活化的规律将有助于这类细胞的临床应用。方法：将成人外周血分别置于ＰＨＡ（４０ｍｇ／Ｌ）、ＰＤＢ（２×１０－７ｍｏｌ／Ｌ）及ＰＨＡ（４０ｍｇ／Ｌ）加上ＰＤＢ（２×１０－７ｍｏｌ／Ｌ）的条件下进行全血培养，在培养２ｈ和６ｈ后分别用双色免疫标记流式细胞法对外周血Ｔ细胞的ＴＣＲαβ、ＴＣＲγδ和ＣＤ６９分子进行分析。结果：Ｔ细胞在受刺激后２ｈＣＤ６９分子即有所增高，但其增加的程度因Ｔ细胞亚群和刺激剂不同而有差别，ＰＨＡ和ＰＤＢ分别使αβＴ细胞ＣＤ６９表达百分率由对照组的４４８±１３６升高到８７９±１６７和７３３６±２９８；ＰＨＡ和ＰＤＢ分别使γδＴ细胞ＣＤ６９表达百分率由对照组的１３６５±１７４升高到３５８４±１４０和９９０３±０９７。与２ｈ的情况相比，αβＴ细胞在各种刺激剂作用６ｈ后ＣＤ６９表达均有进一步的增高，γδＴ细胞在ＰＨＡ作用６ｈ后ＣＤ６９表达继续上调。结论：γδＴ细胞对多克隆活化剂的反应比αβＴ细胞更早和更强。这一特征更有利于体外扩增γδΤ细胞并将其用于临床免疫治疗。     

异黄酮Genistein对T细胞体外活化CD69表达的影响

目的 :研究异黄酮Genistein对T淋巴细胞活化的影响 ,探讨将其发展为免疫干预药物的可能性。方法 :应用荧光标记的单克隆抗体和流式细胞技术 ,在全血培养体系中于 2h和 6h时间点检测分别经 10 ,5 0或 10 0 μmol L浓度Genistein预培养的 ,PHA或PDB诱导活化的T细胞的CD6 9表达百分率。结果 :培养 2h后 ,Genistein对PHA活化组的抑制作用要强于PDB活化组 ,P <0 0 5 ;培养 6h后 ,Genistein对PHA活化组的抑制作用同样强于PDB活化组 ,P <0 0 5 ,但较之 2h时间点均有所降低 ;无论PHA活化组或PDB活化组 ,Genistein对T细胞CD6 9表达率的抑制效应均随作用浓度的升高而增强。结论 :Genistein对PHA和PDB诱导活化的T细胞的CD6 9表达率均有明显的抑制作用 ,这种抑制作用存在浓度依赖关系。Genistein有潜力发展成一种免疫干预药物。     

蛋白粒子及蛋白粒子病发病机理的分子基础

一、１９９７年诺贝尔生理学或医学奖与蛋白粒子：１９９７年诺贝尔生理学或医学奖颁给美国学者ＳｔａｎｌｅｙＢ．Ｐｒｕｓｉｎｅｒ以表彰他在发现蛋白粒子（Ｐｒｉｏｎ）和阐明其致病机理的研究中所作的贡献。蛋白粒子是一种能在动物和人类中引起多种中枢神经系统变性疾...     

原子力显微镜在生命科学中的应用

早在八十年代初期 ,人们已能使用扫描隧道显微镜 (ｓｃａｎｎｉｎｇｔｕｎｎｅｌｉｎｇｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ ,ＳＴＭ)获得原子分辨率的物体表面地形图[1] 。从那时起 ,人们便期待ＳＴＭ能够成为ＤＮＡ测序和获得原子分辨率的蛋白质表面图像工具。虽然以上的这些梦想尚未成为现实 ,然而由此却发展了一系列的扫描探针显微镜(ｓｃａｎｎｉｎｇｐｒｏｂｅｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ ,ＳＰＭ )。其中原子力显微镜 (ａｔｏｍｉｃｆｏｒｃｅｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ ,ＡＦＭ ) [2 ] 的应用更是逐渐从最初的物理学、材料科学与工程领域拓宽到生命科学领域 ,…     

天花粉蛋白诱导人类白血病细胞株HL-60细胞凋亡的研究

目的:研究单链核糖体失活蛋白天花粉蛋白(TCS)诱导人类白血病细胞株HL-60细胞发生凋亡的作用及放线菌酮(CHX)对此作用的影响。方法:采用流式细胞术分析及荧光显微镜观察研究TCS诱导HL-60细胞发生凋亡的情况。结果:流式细胞术分析表明TCS能够诱导HL-60细胞发生明显的凋亡现象,TCS(20mg/L)处理48h细胞凋亡百分率为48.7%±2.3%(x±s),明显高于对照组的凋亡率(6.3%±1.0%)(P＜0.05),而CHX(5mg/L)相同条件下诱导的凋亡率为65.3%±3.9%。TCS诱导的凋亡现象进一步为荧光显微镜的观察及DNA凝胶电泳所证实,TCS处理的细胞中有许多细胞呈现典型的凋亡细胞核形态改变,如染色体凝缩、核碎裂等;DNA凝胶电泳显示TCS处理的细胞呈典型的梯级格局。进一步研究表明预先以低浓度CHX(0.2mg/L)处理可显著加强TCS的作用,而在这个浓度下单独CHX并不诱导明显的细胞凋亡。TCS诱导HL-60细胞的凋亡呈时间和剂量依赖关系。结论:TCS能够诱导HL-60细胞发生明显的凋亡,CHX可加强这种作用。这些结果提示TCS诱导的凋亡不依赖于新的蛋白质合成。     

棉酚对多克隆激活剂活化人T淋巴细胞的抑制作用

目的:以体外培养的人外周血单个核细胞为材料,研究多酚类抗生育药物棉酚对正常人外周血T淋巴细胞体外活化作用的影响。方法:利用双荧光染色流式细胞术分析棉酚对人T淋巴细胞在丝裂原或佛波醇酯刺激下早期活化抗原CD69表达的影响。结果:100μmol/L的棉酚预先与T细胞温育,能完全抑制10mg/L植物血凝素(PHA)刺激的CD3^＋T细胞活化抗原CD69的表达,又可阻断10^－7mol/L佛波醇酯(PDB)对T细胞的活化作用。这种抑制作用呈剂量依赖性,棉酚对PDB及PHA抑制作用的IC₅₀分别为(35.7±2.9)μmol/L和(32.8±1.5)μmol/L。此外,棉酚对CD3^－的淋巴细胞CD69表达也有类似的抑制作用。然而,它对多克隆激活剂引起的T细胞表面分子CD3的下调无明显影响。结论:在体外活化模型中,棉酚能够同时抑制多克隆激活剂PHA和PDB对T细胞的活化作用,提示其作用部位可能位于PKC或下游,并提示棉酚具有潜在的免疫调节作用。     

心理应激对正常人外周血T淋巴细胞体外活化表面分子表达的作用

目的:探讨心理应激增加对感染的易感性的细胞和分子免疫学机理。方法:采用双荧光染色流式细胞分析法对20名健康大学生志愿者(男女各半)在应激前后进行外周血淋巴细胞免疫表型及T细胞体外丝裂原刺激早期活化抗原表达分析。连续一周期末考试被设定为心理应激。结果:免疫表型分析显示,应激前后CD2、CD3、CD4、CD8、CD19、CD20、CD16、CD56等淋巴细胞的表面分子阳性的细胞的百分比的差异无统计学显著性;与应激前的结果相比,应激后的T细胞在体外培养条件下多克隆刺激剂活化后CD69的表达明显降低,植物血凝素(phytohemagglutinin,PHA)组CD69⁺CD3⁺/CD3⁺的百分率由应激前的28.1±4.1降低到应激后的17.6±3.8,佛波醇酯(phorbol 12,13-dibutyrate,PDB)组CD69⁺CD3+/CD3⁺的百分率由应激前的80.7±6.8降至应激后的65.8±7.9,而在没有刺激剂作用的条件下,T细胞CD69表达率应激前后的差别无显著。结论:应激对免疫系统的影响并不在于改变外周血淋巴细胞各亚群的比例的层面上;心理应激能降低健康人T细胞体外活化的反应性,这可能与心理应激个体对感染的易感性增加有关。