人胰腺癌PANC-1细胞裸鼠移植瘤模型建立及其用于观察载siRNA纳米微粒体内效应的研究

 目的：探讨建立人胰腺癌PANC-1裸鼠移植瘤模型的最佳实验方法,并应用该模型进行载基因纳米微粒体内效应的研究。方法：将不同数量PANC-1细胞悬液接种于BALB/c (nu/nu)小鼠右侧背部皮下,当肿瘤体积达100 mm3时尾静脉注射siRNACY5.5纳米复合物进行活体荧光成像。此外,于尾静脉注射负载siRNAKras纳米复合物,蛋白印迹及免疫组织化学染色法观察肿瘤组织Kras蛋白表达水平。结果：1×107 cells/300 μL 接种成瘤率达100%,成瘤时间＜2周。荧光呈像及组织学检查显示载siRNA纳米微粒可靶向聚集在肿瘤组织发挥体内基因沉默效应。结论:本研究报道的人胰腺癌裸鼠移植瘤模型建立方法成瘤率达100%,成瘤时间短,是研究药物示踪和观察疗效的理想模型。     

系统性红斑狼疮患者血清及骨髓基质细胞分泌转化生长因子β1水平

背景：转化生长因子β1是重要的免疫调节因子已被证实，但有关其与系统性红斑狼疮之间的关系还不很清楚。 目的：检测转化生长因子β1在系统性红斑狼疮患者血清及骨髓基质细胞培养液中的水平。 设计：病例-对照分析。 对象：选择2006-02/2007-02中山大学附属第五医院门诊及住院的系统性红斑狼疮患者55例，其中5例同意行骨髓像检查的重度系统性红斑狼疮患者合并中度贫血，经实验室检查符合慢性病贫血；应用SLEDAI评分标准对患者活动度进行评估，轻度13例、中度22例、重度20例。以同期自愿献血的健康者24例作为对照组，其中4例经临床表现及实验室诊断为缺铁性贫血。 方法：所有受试者晨起空腹抽取静脉血2 mL，离心后取上清液，-20℃保存待测。采用密度梯度离心和贴壁筛选法对5例贫血系统性红斑狼疮患者和4例缺铁性贫血患者骨髓基质细胞进行分离培养，制备骨髓基质细胞培养上清液待测。 主要观察指标：采用双抗体酶联免疫吸附法检测各组血清标本、骨髓基质细胞培养上清液标本中的转化生长因子β1水平，及其与SLEDAI积分、血沉、补体C3的相关性。 结果：与对照组比较，系统性红斑狼疮组血清转化生长因子β1水平明显降低（P < 0.01）；且轻、中、重度系统性红斑狼疮患者血清转化生长因子β1水平逐渐降低（P < 0.05）。与对照组比较，系统性红斑狼疮组骨髓基质细胞培养上清液中转化生长因子β1水平明显降低（P < 0.01）。系统性红斑狼疮患者血清转化生长因子β1水平与SLEDAI积分呈负相关（r=-0.862，P < 0.01），与疾病同期活动指标血沉呈负相关（r = -0.56，P < 0.05），与补体C3呈正相关（r=0.78，P < 0.05）。 结论：系统性红斑狼疮骨髓基质细胞分泌转化生长因子β1存在异常，并且转化生长因子β1可能参与了系统性红斑狼疮的发病及转归，对判断其病情活动度及研究系统性红斑狼疮的发病机制有一定临床意义。     

Bmi-1 基因过表达对人正常胃黏膜上皮细胞株GES-1增殖的影响

目的: 探讨原癌基因B淋巴瘤莫洛尼鼠白血病病毒插入区1( Bmi-1 )过表达对人正常胃黏膜上皮细胞株GES-1增殖的影响。方法: 采用逆转录病毒介导转染方法将携带原癌基因 Bmi-1 的质粒或空质粒稳定转染GES-1细胞,通过real-time PCR及Western blotting在mRNA及蛋白水平鉴定转染效果。流式细胞术检测过表达 Bmi-1 对GES-1细胞周期的影响。应用CCK-8(Cell Counting Kit-8)试剂盒检测稳定转染 Bmi-1 对GES-1细胞增殖的影响。结果: Real-time PCR及Western blotting结果均表明成功建立稳定转染 Bmi-1 基因的GES-1细胞株。流式细胞术结果表明,过表达 Bmi-1 基因使GES-1细胞G₀/G₁期减少,G₂/M期和S期细胞增多。生长曲线显示,过表达 Bmi-1 基因使GES-1细胞增殖速度明显提高。结论: 过表达 Bmi-1 基因能调控GES-1细胞的细胞周期,促进GES-1细胞的增殖。     

新肿瘤标志物—长链非编码RNA分子机制及其与肿瘤关系研究进展

【摘要】〓长链非编码RNA(LncRNA)具有复杂的生物学功能,在多种类型恶性肿瘤组织中表达异常,影响肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭等能力,对肿瘤发生、发展起促进或抑制作用。本文将对LncRNA调控基因表达的分子机制以及与肿瘤关系进展予以综述,为进一步研究LncRNA作为诊断、治疗、预后的新肿瘤标志物奠定基础。     

系统性红斑狼疮并弥漫性肺泡出血1例临床分析

目的分析以严重弥漫性肺泡出血（DAH）为突出表现的重症系统性红斑狼疮（SLE）的临床特点,以期提高对危重病例的诊治水平。方法报道1例SLE以DAH为突出表现,并有多系统损害,合并甲状腺激素水平降低,分析诊治经过。结果该患者DAH主要表现为呼吸衰竭、咯血、贫血进行性加重,影像学显示双肺弥漫性浸润影。给予免疫抑制治疗和机械通气辅助呼吸,积极防治并发症,成功救治。结论 DAH是SLE少见而致命的并发症,早期强化免疫抑制治疗和积极的机械通气等支持治疗有望改善预后。重症狼疮可伴发甲状腺功能异常,甲状腺素水平与狼疮活动密切相关。     

免疫纳米微粒靶向胰腺癌细胞输送siRNA的方法研究

 目的：构建一种向胰腺癌细胞安全、高效输送siRNA的免疫纳米载体。方法：检测纳米载体IONP-PEI（非靶向组）及其与siRNA复合物的表征;通过琼脂糖凝胶电泳检测siRNA结合力、MTS法检测细胞活力和流式细胞术检测转染率以确定其复合siRNA的最佳N/P比值;细胞免疫荧光和普鲁士蓝染色观察scFvCD44v6偶联IONP-PEI的靶向纳米载体（靶向组）在细胞内分布;流式细胞术、荧光显微镜观察、real-time PCR和Western blotting检测靶向组和非靶向组的转染率和转染siKRAS后的干扰效果。结果：IONP和PEI的最适质量比为0.75;纳米载体复合siRNA的最佳N/P比值为20;IONP-PEI/siRNA复合物的电位为（21.73±8.07）mV,粒径为（51.3±2.2）nm。荧光显微镜显示,非靶向组和靶向组转染后均在细胞内,靶向组的转染率为（89.75±1.81）%,高于非靶向组的（59.87±4.52）%,且靶向组的荧光强度高于非靶向组。靶向组的KRAS mRNA的相对表达量为（34.02±615）%,低于非靶向组的（51.09±6.70）%;Western blotting显示靶向组的KRAS蛋白表达量低于非靶向组。结论：非靶向组和靶向组均能够将siRNA转染进细胞内,且靶向组具有更高的转染效率和更好的干扰基因表达效果。本课题构建的scFvCD44v6-IONP-PEI是一种高效、安全和靶向识别胰腺癌细胞的免疫纳米载体。     

系统性红斑狼疮患者血清及骨髓基质细胞分泌转化生长因子β1水平

背景：转化生长因子β1是重要的免疫调节因子已被证实，但有关其与系统性红斑狼疮之间的关系还不很清楚。目的：检测转化生长因子β1在系统性红斑狼疮患者血清及骨髓基质细胞培养液中的水平。设计：病例一对照分析。对象：选择2006—02／2007—02中山大学附属第五医院门诊及住院的系统性红斑狼疮患者55例，其中5例同意行骨髓像检查的重度系统性红斑狼疮患者合并中度贫血，经实验室检查符合慢性病贫血：应用SLEDAI评分标准对患者活动度进行评估，轻度13例、中度22例、重度20例。以同期自愿献血的健康者24例作为对照组，其中4例经临床表现及实验室诊断为缺铁性贫血。方法：所有受试者晨起空腹抽取静脉血2mL，离心后取上清液，-20℃保存待测。采用密度梯度离心和贴壁筛选法对5例贫血系统性红斑狼疮患者和4例缺铁性贫血患者骨髓基质细胞进行分离培养，制备骨髓基质细胞培养上清液待测。主要观察指标：采用双抗体酶联免疫吸附法检测各组血清标本、骨髓基质细胞培养上清液标本中的转化生长因子β1水平，及其与SLEDAI积分、血沉、补体C3的相关性。结果：与对照组比较，系统性红斑狼疮组血清转化生长因子β1水平明显降低（P〈0．01）；且轻、中、重度系统性红斑狼疮患者血清转化生长因子β1水平逐渐降低（P〈0．05）。与对照组比较，系统性红斑狼疮组骨髓基质细胞培养上清液中转化生长因子β1水平明湿降低（P〈0．01）。系统性红斑狼疮患者血清转化生长因子β1水平与SLEDAI积分呈负相关（r=-0．862，P〈0．01），与疾病同期活动指标血沉呈负相关（r=-0．56，P〈0．05），与补体C3呈正相关（r=-078，P〈0．05）。结论：系统性红斑狼疮骨髓基质细胞分泌转化生长因子β1存在异常，并且转化生长因子β1可能参与了系统性红斑狼疮的发病及转归，对判断其病情活动度及研究系统性红斑狼疮的发病机制有一定临床意义。     

初诊系统性红斑狼疮患者血液系统异常的临床分析

目的:提高对伴有血像异常的初诊SLE的诊疗水平.方法:回顾性分析84例初诊SLE的临床资料.结果:在初诊的病例中,77例存在血像异常(91.6%),一系血细胞异常共27例,二系血细胞异常共32例,三系血细胞异常18例,白细胞减少、贫血多为轻、中度(68.9%,80.5%);贫血主要表现为小细胞性18例(23.4%)和正细胞性44例(57.1%);血小板减少程度的变异性大(11-97.8)×109/L.绝大部分病人均伴有SLE的其他症状.57例DAI(病情活动指数)数值大于9.结论:初诊SLE伴血液系统异常发生率高,SLE的血液系统表现有其特点,存在血液系统损害的初诊SLE病人中有74%伴有SLE病情活动.     

云克联合化疗治疗多发性骨髓瘤骨损害的疗效分析

目的探讨云克（^99mTc-亚甲基二磷酸盐,^99mTc-MDP）合并化疗治疗多发性骨髓瘤骨损害,减轻病人的骨痛,促使病灶骨修复,改善病人的生活质曼的疗效。方法19例多发性骨髓瘤病人伴有骨损害、骨痛给予M2方案或VAD方案化疗,同时辅以云克治疗骨损害,用法为250m1生理盐水溶解云克3支（16．5mg）,缓慢静脉滴注2h以上,连续5天为1个疗程,隔周行第2个疗程,云克治疗前后均行骨x线或骨ECT检查,观察病人骨痛缓解和骨病灶范围减少状况,再评价其疗效。结果19例病人中显效＋有效15例（15／19,78．9％）,无效4例（4／19,21．1％）;通过x线或骨ECT云克治疗前后比较,发现骨病灶完全消失者3例（3／19,15．8％）,骨病灶范围不同程度减少、数量减少9例（9／19,47．4％）,骨病灶范围稳定或增大者7例（7／19,36．8％）,总有效率63．1％（12／19）。不良反应轻微,肾功能减退者云克减量或慎用。结论云克治疗多发性骨髓瘤骨损害疗效确切,不良反应小。     

以中枢神经系统症状为首发表现的系统性红斑狼疮引发的思考

目的阐述系统性红斑狼疮中枢神经系统受累的临床特点,避免误诊误治。方法通过病例分析探讨系统性红斑狼疮中枢神经系统受累的临床特点、发病机制及治疗方法。结果所选病例除中枢神经系统表现外,还合并其他多系统损害,多种自身抗体阳性,抗生素治疗无效,对激素反应好。结论中枢神经系统症状可为系统性红斑狼疮的首发表现,应注意完善相关检查进行诊断与鉴别诊断,及时给予大剂量糖皮质激素治疗。