白细胞抗原G在结肠癌中的表达及意义

【摘要】 目的 研究结肠癌切除标本中远癌组织、癌旁组织及癌组织白细胞抗原G(HLA-G)蛋白表达情况,探讨HLA-G在结肠癌发生、发展中的作用。方法 应用免疫组化SP法,检测HLA-G 蛋白在结肠癌远癌组织、癌旁组织及癌组织的表达情况。结果 癌组织与癌旁组织、远癌组织比较具有统计学意义(P<0.01),癌旁组织与远癌组织比较具有统计学意义(P<0.01)。 HLA-G 与结肠癌血管侵犯、淋巴结转移及临床病理分期有关(P<0.01),而与性别、年龄、肿块大小、肿块部位、癌胚抗原(CEA)水平及组织学分级无关。结论 HLA-G 在结肠癌中高表达。HLA-G 在血管侵犯组、淋巴结转移组及临床分期较晚组表达显著升高,这些因素可能与结肠癌的侵袭和转移有关。     

胰十二指肠切除术后胰瘘合并出血二次手术2例并国内文献复习

目的 关于胰十二指肠切除术后胰瘘合并出血的二次手术方式缺乏相应的指南及专家共识,本文旨在复习胰十二指肠切除术后胰瘘合并出血的二次手术方式并探讨胰十二指肠切除术后胰瘘合并出血治疗方案。方法 回顾分析2例胰十二指肠切除术后C级胰瘘合并出血的诊疗及手术过程,对胰十二指肠切除术后胰瘘合并出血的二次手术方式进行文献复习。结果 2例胰十二指肠切除术后C级胰瘘合并出血的患者,均在保守治疗无效的情况下进行了二次手术。患者1在探查胰肠吻合口时,发现门静脉出血,确切止血后重新行原位的胰肠吻合术,最终痊愈出院;患者2由于胰瘘导致了迟发性的出血及腹腔感染,在二次手术时并未发现明确的责任血管,手术中对出血风险较高的血管进行了结扎,并对胰肠吻合口进行了加针修补,最终患者因全身多器官功能衰竭死亡。结论 PD术后胰瘘合并出血的治疗需要介入科、重症医学科、普外科的多学科参与,外科手术仍然是PD术后胰瘘合并出血的关键一环。     

梗阻性黄疸围手术期急性肾功能衰竭的预防

目的探讨梗阻性黄疸病人围手术期肾功能的保护及急性肾功能衰竭(ARF)的预防.方法观察组术前行短期肠外营养,术中、术后小剂量多巴胺持续静脉滴注,并定时快速滴注20%甘露醇.对照组采用常规处理方法.动态观察术后尿素氮(BUN)和肌酐清除率(Cr)的变化及ARF的发生率. 结果观察组术后各时相BUN和Cr明显低于对照组(P<0.05).观察组25例中无1例发生ARF;对照组17例中5例(29.4%)发生ARF且有3例(17.6%)死亡(P<0.05).结论术前行短期肠外营养,术中及术后充足的组织灌流及充分利尿是预防梗阻性黄疸病人术后并发ARF的关键.     

HLA-E siRNA沉默肝癌细胞HLA-E基因的表达

目的针对HLA-EmRNA靶序列不同位点,设计合成多个siRNA链,定量分析其对HLA-E(+)肝癌BEL-7402细胞的基因沉默效率,筛选最佳抑制效果的siRNA。方法用IFN-γ(5×105IU·L-1)诱导BEL-7402细胞表达HLA-E基因,经流式细胞技术纯化后作为靶细胞。设计并合成3条HLA-E siRNA链(A、B、C),将各siRNA(0.1mmol·L-1)经脂质体Lipofectamin 2000转染至靶细胞。采用细胞免疫荧光、流式细胞技术、Western杂交、实时PCR等定量方法,比较48h后各siRNA的基因沉默效果,并观察HLA-E基因沉默对NK肿瘤细胞杀伤的影响。结果与空白对照、非特异组相比,3组(A、B、C组)HLA-E siRNA均明显抑制细胞HLA-E抗原、蛋白产物、mRNA、细胞表面HLA-E分子的表达(P<0.01),B、C组抑制效果接近90%,高于A组(P<0.01)。A、B、C组NK肿瘤杀伤率升高(P<0.01),而B、C组肿瘤杀伤效果高于A组(P<0.01)。结论经筛选的HLA-EsiRNA能特异、高效沉默肝癌细胞HLA-E基因表达,可能抑制其非经典HLA-Ⅰ途径免疫逃避,为肝癌"基因-免疫"治疗提供新的治疗策略。     

miRNA-135a在肝癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨mi RNA-135a(mi R-135a)在肝癌组织中的表达及其临床意义。方法 采用实时荧光定量PCR检测20例肝癌组织及其癌旁组织中mi R-135a的表达水平,并通过脂质体介导的方法将mi R-135a模拟物(mi R-135a mimics)转染肝癌细胞株Hep G2,采用实时荧光定量PCR测定转染后细胞中mi R-135a的表达水平;通过平板克隆实验和MTT法分别检测转染后细胞克隆形成率和存活率的变化,并对mi R-135a调控相关靶细胞的基因表达水平进行检测,观察mi R-135a在肝癌细胞维持正常功能中的作用。结果 通过对20例肝癌组织及其癌旁组织中mi R-135a的表达水平进行检测,结果 mi RNA-135a的表达在正常组织中相对更高,且两组之间存在显著性差异(P0.05);与阴性对照组比较,转染mi R-135a mimics后Hep G2细胞中mi R-135a表达水平显著提高(P0.05),而形成单克隆能力和细胞存活率均显著下降(P0.05),同时转染组细胞中与mi R-135a细胞调控相关靶基因FOS、PI3、Jak2、Stat3的m RNA表达量相较于NC组均显著降低(P0.05),表明mi R-135a表达提高后抑制细胞形成单克隆能力并降低存活率。结论 mi R-135a在正常组织和肝癌组织中差异表达,同时当mi R-135a表达提高时抑制肝癌细胞形成单克隆能力和降低细胞存活率,表明mi R-135a可能通过一些相关靶基因直接或间接调控Hep G2肝癌细胞的存活,在肝癌的发生过程中可能起到作用,mi R-135a可能成为临床治疗肝癌和预后的重要靶点。     

长链非编码RNA-LINC02474在结直肠癌中的表达及临床意义

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)–LINC02474在结直肠癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT–qPCR)检测2018年10月至2018年12月在广东省第二人民医院确诊的10例结直肠癌组织与对应癌旁组织中LINC02474的表达水平,结合肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库,分析LINC02474的表达情况与患者临床病理分期和预后的关系。结果:lncRNA–LINC02474在癌组织中的相对表达量为3.94±1.26,明显高于对应癌旁组织中的相对表达量1.09±0.16。TCGA数据库中LINC02474的分析结果显示LINC02474在结直肠癌组织中的表达显著高于其在癌旁正常黏膜组织中的表达,且LINC02474在Ⅲ/Ⅳ期中的表达显著高于Ⅰ/Ⅱ期;在T3/T4期中的表达量明显高于T1/T2期;在N1/N2期中的表达明显高于N0期;在M1期中LINC02474的表达显著高于M0期,差异具有统计学意义(P 0.05)。生存分析结果表明,LINC02474表达量的高低与结直肠癌患者生存率相关。结论:lncRNA–LINC02474在结直肠癌组织中呈高表达,LINC02474与结直肠癌发生、发展和预后密切相关。     

干扰TSPAN1的慢病毒LV?TSPAN1对肝癌的影响

目的:观察慢病毒LV-TSPAN1对TSPAN1的沉默效果和对肝癌的抑制作用,为肝癌的基因治疗提供实验依据。方法:合成可干扰TSPAN1的LV-TSPAN1及对照组慢病毒LV-NC,并用其感染HepG2肝癌细胞。MTT法检及流式细胞术检测LV-TSPAN1对HepG2的增殖抑制效果;平板克隆形成实验检测LV-TSPAN1对HepG2的克隆形成的抑制效果;Transwell实验检测LV-TSPAN1对HepG2的迁徙抑制效果;荷瘤裸鼠抑制实验检测LV-TSPAN1在动物水平对肿瘤的抑制作用。结果:慢病毒LV-TSPAN1对肝癌细胞TSPAN1有良好的沉默效果,可抑制肝癌细胞HepG2的增殖和促进其凋亡,抑制其克隆形成和迁徙能力,并有效抑制肿瘤细胞及肝癌动物模型肿瘤生长。结论:合成的慢病毒LV-TSPAN1可有效沉默TSPAN1,抑制HepG2细胞及肝癌动物模型肿瘤生长,TSPAN1可作为肝癌的潜在治疗靶点。     

肝癌HLA-E基因的表达及对判断肝癌肝移植疗效的意义

目的 观察肝癌患者人类白细胞抗原-E(HLA-E)及相关抗原的表达,以及其对判断肝癌肝移植预后的可行性和价值.方法 回顾性研究40例肝癌肝移植患者,检测HLA-ABC、HLA-E、抗原提呈辅助分子(β2-M、TAP)抗原在其原发灶和癌旁硬化组织中的表达,逆转录PCR法检测石蜡标本中HLA-E mRNA的表达,并将各抗原表达情况与肝移植的预后进行统计学分析.结果 与癌旁组织相比,癌巢HLA-ABC表达增强12例(30%),一致21例(52.5%),相对下调7例(17.5%).HLA-E抗原在癌旁组织中表达不明显,癌巢阳性表达(++/+)为29例(72.5%),P＜0.01,肝癌标本可检测出HLA-E mRNA的表达.β2-M和TAP在癌巢和癌旁组织中均有相同程度的表达,无统计学意义.随访期内HLA-E(++/+)患者移植后无瘤生存期较短(P＜0.05).结论 肝癌HLA-E异常表达影响肝癌肝移植的疗效,提示其在肝癌免疫逃避中的重要作用.     

乌司他丁与奥曲肽联合治疗急性胰腺炎的疗效观察

目的：观察乌司他丁、奥曲肽联合治疗急性胰腺炎的临床疗效。方法：129例证实急性胰腺炎的患者进入本研究，其中乌司他丁、奥曲肽联合治疗组51例，乌司他丁对照组41例，奥曲肽对照组37例，治疗组分别与两对照组进行临床疗效比较及统计处理。结果：轻症急性胰腺炎中联合治疗组与两对照组差异无显著性（P〉0．05）。重症急性胰腺炎中差异有显著性（P〈0．05）。结论：乌司他丁、奥曲肽联合治疗轻症急性胰腺炎，未能提高治疗效果，对重症胰腺炎却有良好临床疗效。     

结直肠癌患者ERAS方案和术后住院时间的相关性分析

目的研究结直肠癌患者实施ERAS流程后影响术后住院时间的相关因素。方法收集2015年5月～2018年9月间广东省第二人民医院普外二科接受手术治疗的结直肠癌患者411例,将患者根据《结直肠手术应用加速康复外科中国专家共识(2015版)》方案,完成ERAS标准流程。观察术后住院时间与术前肠道准备、术前碳水化合物摄入、预防性抗生素使用、术中预防低体温措施、目标导向性液体治疗、硬膜外置管、术后早期活动、术后早期进食、非甾体镇痛药使用、早期拔除引流管、年龄、性别、体重指数、美国麻醉医师协会麻醉分级、贫血、手术部位、手术方式、手术时间、术后有无ICU监护、并发症发生情况之间的相关性。利用二分类Logistic回归分析各变量与术后住院时间之间的相关性。结果年龄、性别、糖尿病、体重指数、新辅助化疗、术前贫血均与术后住院时间无显著相关性,其P值分别为0.705、0.563、0.078、0.674、0.323、0.782。而术前延长术后住院时间的因素为美国麻醉医师协会麻醉分级≥3分(P0.001,OR=8.000,95%CI 4.080～15.686)。手术相关因素如手术的方式、手术时间长于180 min与术后住院时间延长密切相关(P=0.025,OR=0.464,95%CI 0.237～0.907;P0.001,OR=15.370,95%CI 7.828～30.175)。而术后的重症监护室监护治疗并不显著影响术后住院时间(P=0.645,OR=0.791,95%CI 0.291～2.148);术后早期活动延迟与术后住院时间延长相关(P0.001,OR=12.149,95%CI 5.284～27.931);而术前碳水化合物的摄入也对术后住院时间有影响(P=0.001,OR=0.343,95%CI0.179～0.658),当然其可使术后患者的住院时间缩短(相关系数为?1.050)。而硬膜外置管镇痛、术中液体平衡及术后早期进食及术后并发症与住院时间并无显著关联。结论制定更加高效合理的结直肠癌围手术期ERAS方案可缩短患者住院时间,加速患者康复。