用基因工程HBcAg制备抗-HBc单克隆抗体的研究

近年来,日益认识到HBcAg是肝细胞的重要靶抗原,使用抗-HBc载以药物作导向治疗的研究正在进行,为使导向精确,获取不含任何抗人肝细胞成份的抗-HBc是必需解决的问题,以尸肝HBcAg免疫所获单克隆抗-HBc显然不能满足这一条件,为此,本文探索了用基因工程HBcAg研制抗-HBc单克隆抗体,获得成功,报告如下。     

人扁桃体细胞体外培养及诱生原发性抗体反应的研究

制备人单克隆抗体过程中的重要问题是免疫人淋巴细胞的来源.许多抗原不能直接对人体进行免疫,因此需要建立在体外培养中对人淋巴细胞进行初次或加强免疫的方法。手术切除的扁桃体是人淋巴细胞的良好来源。国内外曾有过许多关于在组织培养中     

几种防治组织培养中支原体污染方法的探索

本文报告了对几种防治组织培养中的支原体污染的方法的研究结果。试用各种滤器过滤血清和56℃灭活方法,以去除小牛血清中污染的支原体。采用半固体培基方法鉴定支原体结果证明,0.22u微孔滤膜和EKS蔡氏滤板可以去除小牛血清中污染的支原体。但G6玻璃滤器和0.3μ微孔滤膜过滤不能清除血清中的支原体,56℃加热30分钟,重复三次不能使血清中的支原体灭活。对于已经污染有支原体的传代细胞株,使用各种抗生素或在培养物中加入小鼠腹腔饲养细胞都不能去除支原体。但是将污染细胞接种于小鼠腹腔,经过一定时间再取腹水或实体瘤细胞培养,鉴定结果表明,通过小鼠腹腔内培养的NS-1细胞,不仅清除了污染的支原体,用于融合也获得满意效果。     

用基因工程HBcAg制备抗-HBc单克隆抗体的研究

本文探索了用基因工程HBcAg研制抗-HBc单克隆抗体,获得成功。本文用基因工程HBcAg经单克隆抗-HBc制备的亲和层析柱进一步纯化后,免疫BALB/c小鼠,取小鼠脾细胞与Sp2/0瘤细胞在50％PEG(MW 4,000)作用下进行杂交融合,经三次有限稀释克隆化后,选出一株分泌抗-HBc单克隆抗体杂交瘤细胞株,培养上清用兔抗鼠血清作双扩检测免疫球     

酶标记兔抗鼠免疫球蛋白的制备与应用

用小鼠血清提取的IgG和IgM混合物,免疫家兔获得血清,再经盐析提纯,酶标记,制成酶标记免抗鼠混合免疫球蛋白(酶标记兔抗鼠IgG-M)。该酶结合物应用效价为1∶8,000-1∶10,000,检测小鼠Ig-G-M的敏感度为0.0625ug/ml。在制备抗甲肝病毒单克隆抗体的大量应用中表明,这种酶标记兔抗鼠Ig-G-M可以检测出分泌IgG和IgM的杂交瘤非特异反应少,结果可靠,并大大减少了杂交瘤初筛的工作量。     

人扁桃体细胞体外培养及诱生原发性免疫反应的研究

本文提告了人扁桃体细胞在体外培养和诱生原发性抗SRBC反应的实验条件。发现比较合适的培养细胞密度是0.5～1.0×10~7个有核细胞/ml在添加混合的牛血清和马血清的培基中,比单独使用牛血清或马血清的培基能诱生出更多的抗体形成细胞(即空斑形成细胞PFC)。适当剂量的胰岛素、脂多糖或胸腺嘧啶核苷和次黄嘌呤都有增加PFC数的作用。人扁桃体细胞在体外培养中诱生出的抗SRBC PFC数一般是100～300个PFC/10~6个有核细胞。     

乙型肝炎血源疫苗作体内免疫提高抗-HBs效价的研究

本文介绍了用乙型肝炎血源性疫苗进行人体内免疫提高人体抗-HBs效价的结果。21名正常献血员抗-HBs阳性志愿者分组进行不同免疫剂量的观察,结果表明提高志愿者的体内抗体效价,疫苗使用剂量以100μg/次为宜。抗-HBs效价免疫后一个月逐步上升,最高峰值维持一个月左右。本实验还证实曾接受过疫苗免疫的志愿者再次免疫后的各项反应优于未免疫的志愿者。此工作对制备抗-HBs人McAb寻找高效价抗-HBs血源提供了可靠依据。