浅谈中药中有机氯类农药的残留量问题

目的　阐述检测中药中有机氯农药残留量的一般方法及检测结果 ,提出降低中药中农残量的一些方法和建议。方法　查阅近年来的有关文献资料进行综述。结果与讨论　农药残留量超标已成为阻碍中药国际化进程的重要问题之一 ,需要引起有关专家学者们的充分重视 ,通过建立药材基地及制定农残指标等方法 ,有效控制中药中农药残留量 ,使中药实现现代化     

c-erbB-2基因与非小细胞肺癌细胞株放疗抵抗的相关性

目的:探讨人类表皮生长因子受体-2(c-erbB-2)基因与非小细胞肺癌细胞株放疗抵抗的关系。方法:采用RT-PCR测定肺腺癌(CALU-3和A549)和鳞癌NCL-H520细胞株的c-erbB-2 mRNA水平;采用流式细胞术检测CALU-3、A549和NCL-H520细胞株的c-erbB-2蛋白水平;绘制CALU-3、A549和NCL-H520细胞株的存活曲线。结果:肺腺癌CALU-3细胞株的c-erbB-2 mRNA水平均高于腺癌A549和鳞癌NCL-H520细胞株,有显著性差异(P均<0.05),而A549和NCL-H520细胞株之间无显著性差异(P>0.05);CALU-3细胞株c-erbB-2蛋白的阳性率均高于A549和NCL-H520细胞株,有显著性差异(P均<0.05),而A549和NCL-H520细胞株之间无显著性差异(P>0.05)。存活曲线显示,CALU-3、A549和NCL-H520细胞株间D0值无显著性差异(F=0.287,P>0.05),CALU-3和A549、A549和NCL-H520、CALU-3和NCL-H520细胞株间Dq值均有显著性差异(P值分别<0.05、<0.05、<0.01)。结论:肺腺癌CALU-3细胞株的c-erbB-2基因在mRNA和蛋白水平均高于腺癌A549和鳞癌NCL-H520细胞株;3种细胞株中,CALU-3对γ射线最不敏感,NCL-H520最敏感;推测c-erbB-2基因高表达可能与肺腺癌CALU-3细胞株放疗抵抗有关。     

腹部带蒂皮瓣移位结合高压氧修复治疗手部复合组织缺损40例

我院于2004年1月-2006年8月收治手部复合组织缺损40例,均采用带蒂皮瓣移植结合高压氧治疗收到了良好的疗效,报告如下。1临床资料1.1一般资料本组40例(94指),均为工伤事故造成的手部复合伤,均为男性,年龄25～55岁,平均34岁。损伤原因:机器碾轧伤15例(45指),机器切割伤12例(22指)     

高压氧配合治疗重型颅脑损伤合并多发骨折1例

1病例报告患者男,32岁,于2006年4月30日自6楼坠落,当时昏迷,急送当地医院抢救。CT检查示右侧枕骨骨折、脑干损伤、蛛网膜下腔出血、脑挫裂伤;X线检查示右股骨粗隆间骨折、右耻骨上下支骨折、右胫骨平台骨折、双足跟骨粉碎性骨折、左肩胛骨骨折、左耻骨上下支骨折。当地医院立即予抗休克、降颅压、脱水、止血等对症支持治疗,并行气管切开、呼吸机辅助呼吸;于5月1日行右股骨粗隆间骨折切开复位内固定术、双足跟骨骨折撬拨术、右胫骨平台骨折手法复位石膏外固定和左下肢石膏外固定。于5月19日转入我院骨科,查体:T38.8℃,血压110/70mmHg;精神…     

江苏淮安地区老年人无肾损伤慢性肾疾病患病情况及干预效果调查

目的 通过对江苏淮安地区60岁以上无肾损伤表现老年人群进行调查,了解老年慢性肾疾病(CKD)的患病情况,以提高对CKD的认识,并以中医药进行临床干预,延缓其向尿毒症发展.方法 选用Cockcroft-Gault公式计算肾小球滤过率(GFR),按照2002年美国国家肾脏基金会的肾脏病转归质量会议(K/DOQI)提出的标准诊断CKD并分期.将88例CKD 3、4期患者随机分为两组,中药观察组46例除采用常规治疗外加用中药治疗,对照组42例仅进行常规治疗.结果 在300例患者中发现CKD 3、4期者88例,检出率高达29.7%.经中医药治疗3个月后,观察组的GFR为(68.8±9.0) ml·min-1·1.73 m-2,对照组的为(40.5±9.2) ml·min-1·1.73 m-2,差异有统计学意义(t=3.86,P＜0.05),且使用中药治疗后无不良反应发生.结论 60岁以上无肾损伤表现的老年人CKD检出率较高;中药治疗有效,而且无明显不良反应.     

人表皮生长因子受体-2 siRNA联合卡铂对肺腺癌A549细胞株的抑制作用

目的：应用人表皮生长因子受体-2（C-erbB-2）基因的小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）联合卡铂作用于肺腺癌A549细胞株,探讨siRNA敲除c—erbB-2基因联合卡铂对A549细胞的抑制作用,为开拓肺腺癌患者治疗的新途径提供实验依据。方法：应用CCK-8比色法检测不同浓度的卡铂在不同时间点对A549细胞的抑制率。设计并合成3对C—erbB-2siRNA（2621组、1724组、1491组）,分别转染肺腺癌A549细胞,应用实时荧光定量RT—PCR检测该基因的mRNA水平,筛选出最佳siRNA。再应用CCK-8比色法检测卡铂与c—erbB-2 siRNA联合应用时A549细胞的抑制率。结果：卡铂对A549细胞的生长有显著抑制作用。随着浓度的升高（r=0．415,P〈0．001）、作用时间的延长（r=0．689,P〈0．001）,细胞的抑制率升高。48h的IC50为25．99mg／L。3对sLRNA中2621组和1724组干扰效果最佳（F=11．854,P〈0．05）。CCK-8比色法检测显示,A549细胞的抑制率分别为：siRNA干扰组（28．68±1．98）％、卡铂组（45．63±2．14）％、siRNA＋卡铂组（59．62±1．35）％,其中siRNA＋卡铂组抑制率最高,与其它各组比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：C—erbB-2 siRNA与卡铂具有协同作用,能抑制A549细胞增殖。     

C-erbB-2 shRNA对小鼠肺腺癌细胞化疗敏感性的影响及其机制

目的：探讨人表皮生长因子受体2短发夹RNA(C-erbB-2 shRNA)对小鼠肺腺癌Lewis细胞化疗敏感性的影响及其机制，为非小细胞肺癌尤其是腺癌的治疗提供新的思路。方法：常规培养小鼠肺腺癌Lewis细胞，分为未转染组、pGPU6/RFP/Neo-shNC组和pGPU6/RFP/Neo-erbB-2组；应用Lipofectamine 2000将质粒快速转染各组Lewis细胞；应用RT-PCR法检测各组细胞C-erbB-2 mRNA表达水平；应用Western blottting法检测各组细胞C-erbB-2蛋白表达水平。将Lewis细胞分为未转染对照组、pGPU6/RFP/Neo-shNC组、卡铂组、pGPU6/RFP/Neo-erbB-2组、pGPU6/RFP/Neo-erbB-2+卡铂组和pGPU6/RFP/Neo-shNC + 卡铂组；应用流式细胞术检测各组细胞凋亡率；应用Western blotting法检测各组细胞Bcl-2和Bax蛋白表达水平。结果：pGPU6/RFP/Neo-erbB-2组C-erbB-2 mRNA和蛋白表达水平均低于未转染组和pGPU6/RFP/Neo-shNC组；pGPU6/RFP/Neo-erbB-2+卡铂组细胞凋亡率高于其他各组（P<0.01）；与其他各组比较，pGPU6/RFP/Neo-erbB-2 + 卡铂组Bcl-2蛋白表达水平下降、Bax蛋白表达水平增加。结论：C-erbB-2 shRNA能增强小鼠肺腺癌Lewis细胞对卡铂的敏感性，其机制可能是通过上调Bax蛋白、下调Bcl-2蛋白表达，进而增强卡铂诱导的细胞凋亡。     

人TLR1胞外段原核表达载体的构建、蛋白表达及纯化

目的:克隆、原核表达人Toll-like receptor1 (TLR1)胞外段基因,获得人TLR1胞外段蛋白.方法:RT-PCR扩增人TLR1胞外段基因,构建pET30(a)+/TLR1表达质粒,转染大肠杆菌BL21,在BL21细胞中表达TLR1胞外段蛋白,并进行纯化和Western blot 鉴定.结果:PCR扩增及重组质粒测序结果表明成功地构建了pET30(a)+/TLR1胞外段原核表达质粒,PCR扩增的目的基因大小为1 700 bp左右.表达的包涵体蛋白经溶解及变性后上镍亲和柱纯化,SDS-PAGE分析纯化产物在Mr为68 kD处有明显蛋白条带;Western blot ELISA结果显示,其表达纯化的蛋白为TLR1蛋白.结论:TLR1胞外段在大肠杆菌BL21中正确表达,为TLR1识别机制及信号转导机制研究奠定了基础.     

非小细胞肺癌细胞株c-erbB-2基因的表达

目的:分析非小细胞肺癌细胞株中人类表皮生长因子受体-2(c-erbB-2)基因的mRNA水平和蛋白水平.方法:采用RT-PCR测定肺腺癌(CALU-3和A549)和鳞癌NCL-H520细胞株c-erbB-2 mRNA水平;采用流式细胞术检测CALU-3、A549和NCL-H520细胞株c-erbB-2蛋白水平.结果:肺腺癌CALU-3细胞株c-erbB-2 mRNA水平均高于腺癌A549和鳞癌NCL-H520细胞株,差异有统计学意义(P＜0.05),而A549和NCL-H520细胞株之间差异无统计学意义(P＞0.05);CALU-3细胞株c-erbB-2蛋白的阳性率均高于A549和NCL-H520细胞株,差异有统计学意义(P＜0.05),而A549和NCL-H520细胞株之间差异无统计学意义(P＞0.05).结论:c-erbB-2基因在肺腺癌CALU-3细胞株中的表达均高于腺癌A549和鳞癌NCL-H520细胞株.