PCB153对INS-1细胞毒性作用及机制

目的探讨2,2',4,4',5,5'-六氯联苯(PCB153)对体外培养胰岛β细胞株(INS-1)细胞毒性作用及机制。方法PCB153设3个剂量组(1、3、6 μmol/L),二甲基亚砜(DMSO)为溶剂对照组,染毒INS-1细胞24 h后,检测细胞存活率、凋亡、活性氧(ROS)水平、Caspase 3 和Caspase 12等凋亡相关基因表达水平。结果3、6 μmol/L PCB153剂量组细胞存活率分别为(80.9±8.7)% 和(42.2±4.3)%,与对照组比较均有下降(P<0.05);3 μmol/L PCB153剂量组ROS为(9.2±0.4)、凋亡率为(30.7±3.4)%,6 μmol/L PCB153剂量组ROS为(13.7±1.6)、凋亡率为(40.4±1.3)%,与对照组比较,ROS水平和细胞凋亡率均增加(P<0.05);与对照组比较,3 μmol/L PCB153剂量组Caspase 3及3、6 μmol/L PCB153剂量组Caspase 12基因表达水平均有增加(P<0.05)。结论PCB153可诱导INS-1细胞凋亡,氧化应激和内质网信号通路可能参与PCB153对INS-1细胞的毒性作用。     

PBDE-47对INS-1细胞氧化应激和凋亡影响

目的 探讨2,2',4,4'-四溴联苯醚(PBDE-47)对大鼠胰岛细胞瘤细胞INS-1毒性作用及机制。方法设3个PBDE-47剂量组(1、3、6 μmol/L)和二甲基亚砜溶剂对照组,染毒INS-1细胞24 h后,检测细胞存活率、凋亡率、活性氧(ROS)水平、丙二醛(MDA)含量、Fas和cytochrome C等凋亡相关基因表达水平。结果 与对照组比较,3、6 μmol/L PBDE-47组细胞存活率[(77.1±5.9)%和(27.5±10.6)%]均下降(P<0.05);3、6 μmol/L PBDE-47组ROS水平分别为(154.1±13.3)和(220.1±1.1),MDA含量分别为(26.1±1.0)和(32.7±2.5)μmol/L,6 μmol/L PBDE-47组细胞凋亡率为(38.4±4.2)%,与对照组比较均有增加(P<0.05);与对照组比较,高剂量PBDE-47组Fas及cytochrome C基因表达水平均有增加(P<0.05)。结论 PBDE-47可诱导INS-1细胞凋亡,氧化应激和线粒体信号通路可能参与PBDE-47对INS-1细胞的毒性作用。     

重组新型冠状病毒蛋白疫苗(CHO细胞)在18～84岁健康人群中序贯加强免疫的免疫原性、安全性和持久性研究

目的评价重组新型冠状病毒(新冠病毒)蛋白疫苗(CHO细胞)在18～84岁人群中异源序贯加强免疫的免疫原性、安全性和持久性。方法采用多中心开放性试验设计, 于2021年10月在浙江绍兴市上虞区和衢州市开化县2个研究现场, 招募已完成2剂次新冠病毒灭活疫苗(Vero细胞)基础免疫3～9个月的18～84岁健康成年人为受试者;根据接种间隔时间分为A(3～4个月)、B(5～6个月)、C(7～9个月)3组, 每组各320例, 三组受试者均接种重组新冠病毒蛋白疫苗(CHO细胞)。在加强接种前、接种后14、30、180 d采集血液样本, 分析比较不同组间的抗体几何平均滴度(GMT)、抗体阳性率和阳转率。收集接种后1个月内不良事件和6个月内的严重不良事件, 分析不良反应发生率。结果 960例受试者年龄为(52.3±11.5)岁, 男性占47.4%(455例)。加强接种14 d后B组和C组受试者GMT(95%CI)分别为65.26(54.51～78.12)和60.97(50.61～73.45), 均高于A组受试者[GMT(95%CI):44.79(36.94～54.30)];加强接种30 d后B组和C组受...     

新疆某市暗娼人群艾滋病相关知识和行为调查

暗娼,即女性性工作者(female sex workers,FSWs),是HIV-1从高危人群传播到一般人群的最重要的桥梁人群.我国西部少数民族聚居区FSWs的HIV-1感染率高于中部地区同类人群[1].FSWs人群对AIDS相关知识掌握程度及高危行为对HIV-1感染有直接影响.     

HIV-1辅助受体及配体基因多态性在新疆高危人群中的分布

CD4分子和一些辅助受体是HIV-1识别、黏附并入侵宿主细胞所必需的.CCR5和CXCR4是HIV-1最主要的2个辅助受体,此外一些HIV还可利用CCR2等作为辅助受体.研究发现,这些辅助受体及其配体的某些基因多态性与HIV-1易感和/或疾病进展相关[1].影响HIV-1易感性及AIDS进展的基因多态性在维吾尔族的分布尚不明确.本研究采用PCR和PCR-连接酶检测反应(PCR-LDR)技术检测CCR5A32、CCR5m303A、CCR2-64I、SDF1-3'A和RANTES inl.1T/C基因多态性在维吾尔族人群中的分布.     

1012例乙肝病毒患者HBV P区基因位点变异分析

目的研究人群中乙肝病毒（HBV）P区位点突变发生的频率和持点。方法通过高保真PCR扩增1012例乙肝病毒患者HBV的P区基因片段,采朋双脱氧末端终止法进行洲序,分析HBV P区169、173、180、181、184、194、202、204、233、236和250共11个位点的变异情况。结果HBVP区204和180位点突变频率较高;其次是181和236位点;其余位点突变频率很低。在男性患者中,204位点和180位点突变率相对较高;女性患者中存在同样的情况：30岁以下患者与31至60岁患者相比较,181位点变异率差异较大（P〈0．01）：其余无显著差异（P〉0．05）,结论HBV P区位点突变主要集中在180、181、204和236位点。不同性别的患者中,HBV P区基因突变率尚不具有统计意义上的显著差异。不同年龄段的患者中,HBV P区181位点的突变率具有极显著差异。通过测序技术检测P区位点的突变,可以全面反映P区位点的变异情况,为临床用药和抗病毒新药研发提供重要依据。     

新疆儿童KSHV血清阳性率及危险因素研究

目的 了解新疆儿童卡波氏肉瘤相关疱疹病毒(KSHV)的血清阳性率及危险因素。方法 以新疆维吾尔族和哈萨克族为主要人口构成的伊宁地区新源县和伽师县6个月至5周岁的儿童为研究对象,采用调查问卷收集家庭一般信息。采集儿童及其母亲的静脉血323份(其中儿童171份,与之对应的母亲152份)。采用单克隆免疫增强荧光(monoclonal-enhanced immunofluorescence assay mIFAs)技术检测血清KSHV抗体。Logistic回归分析儿童血清KSHV抗体阳性的影响因素。结果 母亲血清样本阳性率为66.5%(101/152),儿童血清样本阳性率为51.5%(88/171)。多因素分析发现儿童吃硬质食物(OR=2.61, 95%CI=1.06~6.42;P=0.04)及与嚼碎食物喂给孩子吃(OR=5.65,95%CI =1.58~13.75;P=0.005)是感染KSHV病毒的危险因素,具有统计学意义。结论 新疆KSHV感染发生在儿童早期,唾液接触可能是重要的传播途径。     

解毒祛瘀滋阴中药对MRL/lpr小鼠中糖皮质激素受体α的影响

目的：观察解毒祛瘀滋阴中药对MRL/lpr小鼠脾及肾组织糖皮质激素受体α（glucocorticoid receptor,GRα）蛋白表达的影响。方法：40只MRL/lpr小鼠随机分为模型组、西药组、中药组及中西药给合组,西药组强的松混悬液灌胃,中药组解毒祛瘀滋阴浓缩液灌胃。每组10只,另选10只清洁级正常小鼠为空白对照。采用Western blot及流式细胞术分别检测各组小鼠肾GRα蛋白表达及脾淋巴细胞GRα的蛋白表达和结合力变化。结果：肾组织GRα蛋白表达和脾脏GRα蛋白表达与结合力模型组比正常组显著降低（P〈0.01）,西药组较模型组降低,但无明显差异,中药组及中西药结合组与模型组相比显著升高（P〈0.05）,与正常组无明显差异。结论：解毒祛瘀滋阴中药及与强的松联合使用上调MRL/lpr小鼠中GRα的蛋白表达和结合力。     

泛素结合酶E2A在顺铂诱导的HeLa细胞应激反应中的作用

目的：探讨泛素结合酶E2 A（UBE2A）基因在顺铂（cisplatin）诱导的HeLa细胞应激反应中的作用。方法：RT-PCR检测顺铂作用后UBE2A mRNA在HeLa细胞中的表达水平;利用针对UBE2A的特异性siRNA转染细胞后,采用qPCR检测UBE2A mRNA在HeLa细胞中的表达情况,并应用CCK-8法检测细胞在顺铂作用下的存活率。结果：UBE2A基因在HeLa细胞中表达两种转录本：U-1和U-2,U-2相比U-1缺少了外显子4的部分序列,并且顺铂作用后二者表达水平均升高。针对UBE2A的特异性siRNA可分别降低其对应转录本的表达水平,表达量分别为对照组的27.43%、15.85%。UBE2A表达受到抑制的HeLa细胞在顺铂作用后细胞存活率降低,相比对照组分别下降了14.46%和19.20%,差异均有统计学意义（P均 < 0.05）。结论：UBE2A可能参与了顺铂诱导的细胞应激反应,抑制其表达可以明显提高HeLa细胞对顺铂细胞毒性的敏感性。     

水通道蛋白9磷酸化对哺乳动物细胞中砷摄入的影响

 目的研究水通道蛋白9（AQP9） mRNA表达水平、水通道蛋白9及p38蛋白表达及其磷酸化水平对肝癌细胞HepG2和肝正常细胞L 02砷摄入的影响,探讨水通道蛋白9磷酸化的调控机制。方法采用电感藕合等离子体质谱法（ICP MS）测定细胞内砷含量。采用实时定量PCR、免疫印迹法和免疫共沉淀技术分别检测不同处理后两细胞株中水通道蛋白9 mRNA、水通道蛋白9和p38蛋白表达水平及其磷酸化水平。采用SPSS统计软件分析实验数据。结果HepG2 细胞内砷含量及摄入速度高于L 02细胞。HepG2细胞的水通道蛋白9 mRNA表达水平在6 h内随NaAsO2处理时间延长而显著增加(P<005),而在L 02细胞无明显变化。在2 h时,HepG2细胞水通道蛋白9基因表达水平在各NaAsO2处理浓度均显著增加(P<005)。免疫沉淀实验结果显示,HepG2细胞中水通道蛋白9蛋白磷酸化水平随NaAsO2处理时间和浓度的增加而增加,而L 02细胞在各时间和浓度处理点水通道蛋白9蛋白磷酸化水平与对照相比明显增加,但处理间无明显差异;p38的磷酸化水平在两种细胞中均随砷处理时间延长而增加;SB203580抑制p38活性后能完全取消L 02细胞水通道蛋白9蛋白的磷酸化,而对HepG2细胞水通道蛋白9蛋白磷酸化无明显影响。结论水通道蛋白9的表达及磷酸化水平可能在调节细胞砷摄入中发挥重要作用,在不同细胞中水通道蛋白9蛋白磷酸化的调控机制有所差异。