用电融合技术建立抗甲组虫媒病毒单克隆抗体杂交瘤细胞系的研究

1980年Zimmermann报告了电场诱导细胞融合的新技术。它主要包括两个电过程:一是以电介质电泳使细胞形成“串珠”,达到细胞紧密接触;二是以瞬间直流高压电脉冲使细胞发生可逆电穿孔,相邻细胞的细胞质沟通,达到细胞融合。由于这一技术具有可使差异较大的细胞发生融合,在显微镜下能观察融合过程,物理刺激对细胞无毒性,融合率较PEG法高等优点。引起了许多学者的兴趣。现已在植物细胞,动物细胞,菌细胞,以及脂质体、质粒与细胞的融合等方面进行了广泛的应用研究。我们用这一技术建立鼠B淋巴细胞杂     

热疗联合化疗治疗晚期恶性肿瘤158例

[目的]观察热化疗治疗晚期恶性肿瘤的近期疗效及安全性.[方法]对158例晚期恶性肿瘤患者,根据病种不同,选用相应化疗方案治疗,同时采用NRL-001型内生场深部肿瘤热疗系统对病灶局部进行加温,加温至41℃～43℃,加温时间为60～90分钟,每例患者热疗5～20次,平均9次.[结果]158例中,CR9例(5.7%),PR77例(48.7%),SD 47例(29.7%),PD25例(15.8%),CR PR为54.4%.毒副反应主要为化疗所致的血象异常和消化道反应,热疗所致的反应少见.[结论]热疗联合化疗治疗晚期恶性肿瘤有较好效果,毒副作用轻,值得临床推广应用.     

非小细胞肺癌患者外周血与组织中K-ras基因突变的研究

目的检测非小细胞肺癌患者外周血与肿瘤组织K-ras基因突变率及两者的一致性,探讨外周血K-ras基因突变的临床应用价值。方法应用实时荧光定量PCR方法检测257例非小细胞肺癌组织,318例非小细胞肺癌外周血,其中185例外周血标本和组织标本配对,检测其中K-ras基因突变,比较外周血和组织标本突变一致性,分析K-ras基因突变和患者临床特征相关性。结果外周血标本中检测出37例突变(11.64%),组织标本中29例突变(11.28%),两种标本一致性为76.19%,差异有统计学意义(Kappa=0.671,P=0.000)。结论非小细胞肺癌患者外周血与组织K-ras基因突变一致性较高,在无法获得组织学标本时可以检测外周血K-ras基因状态,为非小细胞肺癌的临床诊疗提供帮助。     

海南岛不明发热病人血虫媒病毒分离鉴定及抗体检测

目的从海南岛不明发热病人血中分离和鉴定虫媒病毒,并在当地人群进行抗体检测,以了解南方地区虫媒病毒的感染情况。方法采用微量法细胞培养对205份发热原因不明患者血标本进行病毒分离,应用生物学性状检测、间接免疫荧光试验(IFA)和血凝抑制试验(HI)等技术对分离病毒进行鉴定。采用IFA检测从当地人群血清中分离出的病毒的抗体水平。结果从发热早期患者血标本中分离出2株病毒,鉴定为甲病毒,命名为HF 7和HC 6。这2株病毒与8种甲病毒免疫腹水中的SIN的免疫腹水呈现最高的血凝抑制滴度(分别为1∶160和1∶320),与SIN免疫腹水的交叉荧光效价最高(分别为1∶320和1∶640),但HF 7和HC 6病毒的免疫腹水与8种甲病毒的血凝抑制试验和交叉免疫荧光试验无反应,表明HF 7和HC 6病毒虽与SIN病毒的免疫腹水血抑效价及荧光效价高,但HF 7和HC 6的免疫腹水与SIN病毒无抑制效价和免疫荧光效价。当地人群对这两株病毒感染的抗体阳性率分别为3.3%(15/451)和8.4%(38/451)。结论HF7和HC6为甲病毒的一个新种。海南岛人群存在甲病毒感染。     

登革4型病毒广东流行株NS2a-NS2b基因序列分析

目的分析登革4型病毒(DV4)广东株的基因序列，比较其同源性，追查DV4的地理来源。方法RT—PCR扩增DV4 NS2a—NS2b基因片段，克隆至PGEM T载体，分析其序列。结果1990年分离的4个毒株在所分析的区段具有相同的序列，与DV4H241、814669株、1978年广东株(GD785682)和1993年广东株(GZB5)的核苷酸(氨基酸)同源性分别是97％(98％)、94％(96％)、93％(98％)和99％(98％)。GD785682株与DV4H241、814669株和1993年广东株(GZB5)的核苷酸(氨基酸)同源性分别是93％(98％)、96％(97％)和98％(93％)。结论1990年引起广东省登革热流行的毒株很可能只有1个，1990年的毒株与1978年的毒株可能来自不同的疫源地。     

我国南方人鼠虫媒病毒血清流行病学调查

目的 调查我国南方地区虫媒病毒的感染分布情况。方法 应用间接免疫荧光技术,对我国南方11个地区3077份人血清标本和401份鼠血清标本进行了14种虫媒病毒血清流行病学调查。结果 人血清中甲病毒（SIN,CHIK,SF,MAY,RR,SAG和GET）抗体的阳性率分别是0．64％,1．13％,0．64％,0．04％,0．94％,0．11％和0．18％;黄病毒（JE和DEN1－4）抗体的阳性率分别是2．70％和8．60％;布尼安病毒抗体（XHF和SSH）,在海南人群中的阳性率分别是2．66％和5．33％。在海南三亚、琼中和琼海3个地区的鼠中,甲病毒（SIN,CHIK,RR和SF）抗体的阳性率分别是1．80％,6．31％,4．50％和6．31％;黄病毒（JE和DEN1－4）抗体的阳性率分别是3．69％和8．11％;布尼安病毒（XHF和SSH）抗体的阳性率分别是3．10％和3．79％;结论 在我国南方一些地区生活的人群和鼠类不同程度的感染了甲病毒、黄病毒和布尼安病毒。     

逆转录—多聚酶链反应扩增黄病毒核酸的研究

黄病毒基因组为单链，正股ＲＮＡ，全长约１１Ｋｂ。在其ＮＳ１基因序列设计了一对通用引物，ＤＪＳ（＋）和ＤＪＡ（一）均为１７个硷基，扩增序列长度为４１３ｂＰ．应用逆转录一一多聚酶链反应（ＲＴ—ＰＣＲ）成功地扩增了登革病毒（ＤＥＮ）１，２，３，４型和乙型脑炎病毒（ＪＥＶ）基因部分片段，其扩增片段的大小与设计相符。采用该引物检测国内分离株ＤＥＮ１／（ＧＺ）、ＤＥＮ２（ＨＮ９１）和ＪＥＶ（Ａ２）株同样出现一条明显的扩增带（约４１３ｂＰ），说明该引物也适合于我国分离株。应用通用引物扩增黄病毒中的ＰＯＷ和ＬＧＴ均出现一条特异带。甲病毒属的辛德毕斯和基孔肯稚病毒应用该引物扩增后无特异性条带；扩增Ｃ６／３６细胞也无特异带。表明该通用引物特异性良好，对于今后黄病毒感染的临床快速诊断和进一步的分子病毒学研究均有重要意义。     

抗DEN-2基因核酶的克隆及其体外切割活性的研究

目的：探讨核酶抗登革病毒活性。方法：根据DEN－2基因结构的特点，按照锤头状核酶的结构模型和作用模式，设计，合成针对172－174GUC位点的核酶基因；定向插入质粒pGEM-3Zf( )的Sac I和Sal I位点之间；核酶基因克隆和DEN－2靶基因克隆分别进行体外转录，生成核酶的靶RNA，体外进行切割反应。结果：核酶与登革病毒靶序列体外产物电泳 见预期切割条带。结论：该核酶具有切割相应靶RNA的活性，可进一步用于细胞内核酶抗登革病毒的研究。     

肺炎链球菌大环内酯药物耐药性及耐药基因erm、mef的检测

肺炎链球菌是引起呼吸道感染的常见菌.近年来,耐药型肺炎链球菌出现迅猛,在我国和众多亚洲国家尤为明显~([1]).肺炎链球菌对大环内酯类抗生素的耐药率迅速增加,目前已成为一个全球性问题.其中对红霉素的耐药性已成为一个严重的现象~([2]).因此,我们对52株肺炎链球菌进行了大环内酯药物(红霉素和阿奇霉素)的耐药性情况和耐药基因erm(B)、erm(TR)、mef(A)及mef,(E)的检测分析.     

老年消化系统恶性肿瘤对骨密度的影响

目的探讨消化系统恶性肿瘤与老年人骨量减少的关系。方法对患消化系统恶性肿瘤的老年人以双能X线骨密度仪测定其股骨及腰椎骨密度(BMD),并与无恶性肿瘤的对照组比较。结果消化系统恶性肿瘤老年患者各部位的BMD均低于对照组,P<0.05。结论消化系统恶性肿瘤可引起老年人骨量减少,提示在治疗消化系统恶性肿瘤同时,应关注骨质疏松的防治。