两种自家免疫性甲低患者治疗前后血清TSII、TGII及外周血T淋巴细胞亚群的变化

对９例原发性粘液性水肿和１４例Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ甲状腺炎患者测定了血清ＴＳＩＩ、ＴＧＩＩ及外周血Ｔ淋巴细胞亚群，并以３２例正常人作为对照．原发性粘液性水肿和Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ甲状腺炎患者血清存在ＴＳＩＩ、ＴＧＩＩ，阳性比例不同，而且外周血ＣＤ８＋百分率降低和ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值增高．ＴＳＩＩ、ＴＧＩＩ活性与ＣＤ４＋／ＣＤ８＋比值无显著相关．经甲状腺激素治疗，两种自家免疫性甲低患者甲状腺功能明显恢复，血清ＴＳＩＩ、ＴＧＩＩ活性无明显变化，原发性粘液性水肿患者外周血Ｔ淋巴细胞亚群未见明显变化，而Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ甲状腺炎患者ＣＤ８＋百分率明显回升．     

细胞间粘附分子—1^125I标记及其纯度、免疫活性的鉴定

目的：建立细胞间粘附分子－1（intracellular adhesion molecule-1 ICAM-1)^125I标记方法及鉴定其纯度和免疫活性。方法：用氯胺－T法标记ICAM－1,用Sephadex G-50柱层析分离,用纸层析法鉴定^125I-ICAM-1的纯度,放免法检测其免疫活性,结果：^125I-ICAM-1比活度为77．84uCi/ug蛋白,标记率为65．54％,^125I-Na的放化纯度为97．27％,^125I-ICAM-1能够与ICAM－1－Ab的最大结合为88．64％,并且随ICAM－1－Ab滴度的降低而增高。结论：成功建立^125I标记ICAM－1的方法,并且^125I-ICAM-1具有一定的免疫活性。     

大鼠胰岛分离技术的建立及胰岛活性的影响因素

目的建立稳定有效的大鼠胰岛分离方法,探讨影响胰岛活性的因素。方法通过胆管注射胶原酶方法提取大鼠胰岛,通过水浴法比较不同条件下葡萄糖刺激的胰岛素分泌,用放免法(R IA)测定胰岛素。结果牛血清白蛋白(BSA)能明显提高葡萄糖刺激的胰岛素分泌水平,长时间培养(>7 d)的胰岛,其葡萄糖刺激的胰岛素分泌下降约25%,而新鲜分离的胰岛和经1~5 d培养的胰岛未见明显差异。RPM I1640培养液中葡萄糖浓度11.1 mmol/L组,其胰岛素分泌明显高于5.5 mmol/L和25 mmol/L这2组。结论BSA、RPM I1640培养液中葡萄糖浓度及培养时间均与分离胰岛活性有关。     

人源性促甲状腺激素受体抗体Fab段抗体库的构建

目的 通过噬菌体表面展示技术,构建人源性促甲状腺激素受体抗体(TRAb)Fab片段抗体库.方法 从甲状腺功能亢进症患者外周血单个核细胞抽提总RNA,PCR法扩增免疫球蛋白分子轻链K、λ基因及重链Fd基因.构建轻链文库及组合文库.一个随机的组合文库在噬菌体表面表达.结果 从外周血单个核细胞中抽提得到总RNA,并反转录获得cDNA文库.PCR法扩增了大小约为680 bp的轻链K、λ基因及重链Fd基因,并构建了库容为1.32×105基因抗体库(轻链库)和库容为2.28×105 Fab抗体库(组合文库).Fab组合文库转化到大肠杆菌XL1-Blue感受态细胞,在辅助噬菌体M13K07的辅助下,扩增得到噬菌体抗体库.结论 噬菌体表面展示技术可成功构建人源性TRAb Fab片段组合文库.     

Graves病中甲状腺自身抗体的动态变化及相关性分析

目的：研究Graves病（GD）发病时及在抗甲状腺药物治疗过程中促甲状腺素受体抗体（TRAb）和甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）的变化。方法：应用ELISA对初发的和应用甲巯咪唑治疗不同阶段（3,6,12,18及24月）的GD患者血清进行TRAb、TPOAb检测。同时,对游离甲状腺素（FT4）、游离三碘甲腺原氨酸（FT3）和促甲状腺素（TSH）进行检测,并对TRAb、TPOAb和甲状腺功能（FT4,FL3,TSH）进行相关性分析。结果：232例初发的GD患者血清TRAb检测值中位数为0．86（OD405）,阳性率为73．7％（171／232）;TPOAb检测值中位数为0．55（0D405）,阳性率为28．9％（67／232）。治疗过程中,TRAb水平及阳性率稳步逐渐下降,而TPOAb水平在12个月前逐步上升,TPOAb阳性率也显示了上升趋势,然后逐渐下降。TRAb和TPOAb之间未发现相关性,它们与甲状腺功能之间也未发现相关性。结论：尽管TRAb和TPOAb是GD中的自身抗体,但它们反晦的是不同的免疫异常,而且这种免疫异常独立于甲状腺功能。     

人甲状腺钠/碘转运体基因全长的克隆及其重组表达质粒的构建

目的:利用基因工程的方法制备甲状腺钠/碘同向转运体(hNIS)cDNA,为今后的转基因治疗奠定物质基础。方法:采用TRIzol一步法,从甲状腺组织中提取总RNA,再应用RT-PCR扩增出hNIS基因全长,然后采用TOPO克隆技术构建重组表达质粒pcDNA3.1D/FLhNIS,并进行酶切和测序鉴定。结果:成功制备了hNIScDNA并构建了其重组表达质粒。结论:为最终实现131I治疗不摄碘的肿瘤提供了分子生物学基础。     

甲状腺球蛋白抗原决定簇基因的克隆及原核表达载体的构建

目的：扩增甲状腺球蛋白抗原决定簇基因，构建可转化人大肠杆菌的重组表达载体。方法：用TRIzol一步法从甲状腺组织中提取总RNA，RT—PCR逆转录出cDNA，PCR扩增出目的基因，与pET102／D—TOPO载体进行拓扑克隆．对重组质粒进行PCR、酶切及测序鉴定。结果：甲状腺球蛋白抗原决定簇基因及其重组表达载体经鉴定准确无误。结论：成功构建了带有目的基因的原核表达载体。     

高甘油三酯血症患者血清sICAM-1的变化对预测动脉粥样硬化病变的意义

目的探讨单纯高甘油三酯血症患者血清细胞间粘附分子-1（sICAM-1）的变化及其对早期预测动脉粥样硬化的意义.方法利用^125I-sICAM-1放射免疫分析（RIA）方法测定35例单纯高甘油三酯血症患者和33例健康人血清sICAM-1水平.结果单纯高甘油三酯血症患者血清sICAM-1水平高于对照组（P＜0.01）,且血清sICAM-1与甘油三酯呈正相关（P＜0.01）,多元逐步回归显示甘油三酯为影响血清sICAM-1最为显著的因素（R^2=0.53）.结论sICAM-1表达增加可能与高甘油三酯血症相关,有助于早期预测动脉粥样硬化病变的发生.     

甲状腺乳头状癌中原癌基因c-fos的低表达

甲状腺乳头状癌是临床常见的肿瘤 ,约占各种甲状腺癌的 80 %。目前认为 ,原癌基因在肿瘤形成过程中起着重要作用 ,其中ｃ ｆｏｓ是核蛋白癌基因 ,它的激活是基因表达最早的变化之一。因此 ,它与细胞癌变之间的关系就更加受到人们的关注。因样品中细胞数量的不同会影响检测结果 ,我们在国内首次引入细胞管家基因 β ａｃｔｉｎ作为多重扩增的内参照物 ,达到资料比较的标准化 ,用于研究ｃ ｆｏｓ在甲状腺乳头状癌中的表达。一、材料与方法1 材料 :(1)乳头状癌组 :14例经病理学检验确诊为甲状腺乳头状癌的组织标本。 (2 )正常对照组 :包括 3例…