鸡胚发育中神经钙黏蛋白对头部神经嵴细胞分层的作用

目的:阐明神经钙黏蛋白(N-cadherin)在神经嵴细胞分层中的作用。方法: 利用原位杂交鉴定N-cadherin在神经管上的表达。转染过表达N-cadherin的野生型N-cadherin(wild-type N-cadherin, wt-N-cad)或阻断N-cadherin表达的结构域缺失型N-cadherin(dominant-negative N-cadherin, dn-N-cad),利用免疫组化方法检测头部神经嵴细胞的迁移变化。结果: 无论是过表达N-cadherin还是下调N-cadherin表达,头部神经嵴细胞迁移都受到了影响。结论: 头部神经嵴细胞的分层和迁移依赖于神经管上N-cadherin的表达。     

成纤维细胞生长因子信号调控早期鸡胚胎神经嵴细胞的迁移

目的 利用Sprouty2基因阻断成纤维细胞生长因子（FGF）信号,探讨FGF在早期鸡胚胎发育过程中对神经嵴细胞迁移的影响及其机制。方法 通过体内培养的方法孵育鸡胚至HH9期,通过显微注射的方法将Sprouty2-绿色荧光蛋白（GFP）质粒注射入神经管腔内。实验侧使用电穿孔转染的方法转染胚胎半侧神经管,另一侧正常神经管设为对照侧。采用神经嵴细胞特异标记物HNK1免疫荧光的方法检测Sprouty2基因阻断FGF信号后是否影响胚胎头部和躯干部神经嵴细胞的迁移过程。随后,进一步通过检测神经细胞钙黏分子N-Cadherin的表达来观察细胞之间黏附作用的改变。结果 HNK1免疫荧光检测结果显示,Sprouty2转染侧即阻断FGF信号通路后,HNK1在早期鸡胚胎的头部和躯干部的表达量均比对照侧的表达量增多;而神经细胞钙黏分子N-Cadherin检测结果表明,Sprouty2转染侧和正常对照侧N Cadherin在头部和躯干部神经管上表达量的差异均无显著性。结论 Sprouty2基因阻断FGF信号后,促进了早期鸡胚胎神经嵴细胞的迁移,但是FGF信号对此过程的影响可能不是由神经钙黏分子N-Cadherin介导的。