2型大麻素受体通过抑制脊髓小胶质细胞活化减轻神经病理性疼痛小鼠痛觉过敏

目的 探讨脊髓大麻素受体2（CB2R）与小胶质细胞激活对小鼠神经病理性疼痛中痛觉过敏的影响。方法 采用脊神经结扎（SNL）创建神经病理性疼痛模型,C57/BL小鼠60只随机分为六组：假手术组（Sham）、模型组（SNL）、模型+ CB2R激动剂组（SNL+AM1241）、模型+小胶质细胞抑制剂组（SNL+Min）、模型+CB2R小干扰RNA组（SNL+siRNA）、模型+CB2R小干扰RNA+小胶质细胞抑制剂组（SNL+siRNA+Min）。Western blot测定小鼠脊髓CB2R蛋白表达,Von Frey测定各组小鼠机械性痛阈变化,免疫荧光观察脊髓背角小胶质细胞激活情况,PCR测定小鼠脊髓内炎症因子释放,电生理技术观察CB2R激动剂对脊髓背角抑制性突触后电流（sIPSC）的影响。结果 同Sham组相比,SNL小鼠脊髓CB2R表达明显减少,痛阈降低,小胶质细胞激活明显增强,且炎症因子释放增加;鞘内注射CB2R激动剂或小胶质细胞抑制剂后,同SNL相比SNL+AM1241、SNL+Min组痛阈增加,小胶质细胞激活减弱且炎症因子有所减少;而siRNA干扰CB2R表达后同SNL相比,SNL+siRNA小鼠痛阈降低,小胶质细胞激活明显增强,且炎症因子释放增加,同时鞘内注射Min逆转siRAN介导的变化。电生理结果显示AM1241显著增强脊髓背角sIPSC频率和振幅,而Min持续灌流抑制AM1241的效应。结论 CB2R通过抑制脊髓小胶质细胞活化减轻神经炎性反应并增强抑制性电活动,从而减轻神经病理性疼痛的痛觉过敏。     

袖状胃切除术后近期和远期饮食结构的变化

<正>肥胖发病率近年来急剧上升,已成为了一种全球流行的慢性非传染性疾病^[1]。减重手术是目前治疗慢性肥胖及其相关代谢并发症最有效的方法。通过手术对消化道进行解剖重建,可减少人体对食物的摄入及营养成分的吸收,并最终实现减轻体重,降低代谢并发症风险,提升生活质量的目的^[2]。按作用机制,减重手术可划分为限制摄入型、减少吸收型及两者兼并型,相应的代表术式分别为袖状胃切除术(sleeve gastrectomy, SG),     

腹腔镜手术视频资料在人体解剖学实验教学中的应用探索

正第四军医大学2012年级、2013年级和2014年级八年制学生《人体解剖学》实验教学阶段,由基础医学院人体解剖学教研室和附属第一医院肝胆外科学教研室通力合作,连续三年将腹腔镜手术视频资料引人课堂教学,主要在腹腔镜下直示观察腹部脏器的解剖学要点,极大地激发了学生们的学习兴趣,教学更具"立体、动态、逼真"的效果。1教学对象和方法1.1教学对象2012年级、2013年级和2014年级八年制学生分别是36人、36人和40人,其中临床医疗专业70%,口腔医学专业30%。     

急性肝衰竭小鼠线粒体分裂蛋白DRP1在肝脏和大脑皮层的表达变化

目的:观察C57小鼠急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)过程中线粒体分裂蛋白(dynamic-related protein 1,DRP1)在肝脏和大脑皮层中的变化及与肝衰竭的相关性。方法:C57/BL小鼠,随机分为对照组、ALF1d、4 d、7 d组。腹膜腔内注射硫代乙酰胺(TAA)建立ALF模型,利用高架十字和旷场实验测定行为学,取血清检测谷氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)水平;之后取肝组织,HE染色观察肝组织的病理变化;用Western Blot和RT-q PCR检测DRP1在肝脏和大脑皮层中蛋白及mRNA水平的表达变化。结果:(1)行为学结果显示:ALF各组小鼠自发活动及探索行为均明显降低(P0.05);(2)肝功检测ALF组ALT、AST表达水平明显升高(P0.05);(3)肝组织病理学检查ALF组1 d时肝细胞出现大面积坏死,7 d时肝细胞坏死较1 d、4 d缓解;(4)Western Blot检测DRP1在ALF全肝组织和肝线粒体中明显降低(P0.05);而在大脑皮层全组织蛋白中明显升高(P0.05),但在提取的线粒体中则无明显改变(P0.05);(5)RT-q PCR检测DRP1在肝组织中ALF各组中表达明显降低(P0.05);而在大脑皮层组织中1 d时表达增多,持续到4 d,在7 d时恢复(P0.05)。结论:DRP1在急性肝衰竭小鼠的肝脏和大脑皮层中对线粒体形态学发挥着重要的作用。     

京尼平通过线粒体动力学缓解氧化应激诱导的Neuro-2a细胞凋亡

目的:观察京尼平(genipin)对H2O2诱导Neuro-2a细胞凋亡的影响,并对其机制进行初步探讨。方法:体外培养Neuro-2a细胞,利用400μmol/L H2O2诱导6 h建立Neuro-2a凋亡模型。处于对数生长期的Neuro-2a细胞随机分为对照组、模型组、京尼平组、京尼平预处理后模型组。MTT法测定细胞存活率;倒置相差显微镜观察细胞形态;Annexin V-FITC/PI双染法流式细胞仪检测细胞凋亡率;DCFH-DA(2,7-二氯荧光素二乙酸酯)染色、流式细胞仪检测细胞内线粒体活性氧(ROS)的产生;qRT-PCR检测UCP2、UCP4、Mfn2、Drp1 mRNA表达;Western blot测定UCP2、UCP4、Mfn2、Drp1蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组细胞存活率显著降低,细胞凋亡率增加,ROS生成量升高,同时UCP2、Drp1蛋白及mRNA表达增加,Mfn2蛋白及mRNA表达降低,UCP4及mRNA蛋白表达无明显变化。提前给予京尼平(40μmol/L)干预后,与模型组相比,细胞存活率提高,细胞凋亡率降低,ROS生成量减少,同时UCP2、Drp1蛋白及mRNA表达减少,Mfn2蛋白及mRNA表达升高,但UCP4蛋白及mRNA表达无明显变化。以上指标相比,差异均有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论:适宜浓度的京尼平能缓解氧化应激诱导的Neuro-2a细胞凋亡,其机制可能与抑制UCP2蛋白表达,促进线粒体融合进而改善线粒体功能有关。     

闭合性胰腺创伤的临床诊断和治疗研究进展

闭合性胰腺创伤并不常见,其影像学表现不明显,合并多器官损伤相互掩盖,临床体征不明确,往往难以诊断,易误诊、漏诊,故病死率高。闭合性胰腺创伤应结合影像学证据、实验室检查,综合受伤史和临床表现进行诊断。其治疗取决于创伤级别和部位,对于血流动力学稳定的低级别创伤,通常采用非手术治疗方案,包括禁食、全肠外营养、应用生长抑素、抑酸治疗、外引流、胰管支架置入、重复影像学检查以及结合患者具体情况积极处理并发症和合并症等;血流动力学不稳定的患者通常不建议非手术治疗。高级别创伤手术难度大,通常依据“损伤控制”原则,综合患者受伤情况、生理状态及术中实际情况权衡利弊,并结合所在诊疗中心实际能力选择合适的个体化治疗策略,必要时可考虑转往区域性胰腺中心治疗。闭合性胰腺创伤后常见的并发症包括假性囊肿和胰瘘等,术后应尽早使用生长抑素来减少胰液的分泌,预防胰瘘,也可以通过经皮引流置入、内镜下支架置入和内镜下囊肿-胃造口术或囊肿-空肠造口术来处理。胰腺假性囊肿的形成多因术后引流不畅所致,通过适当冲洗和穿刺置管引流便可治愈,很少需要再次手术。笔者结合既往研究文献及所在中国人民解放军空军军医大学第一附属医院治疗经验对闭合性...     

解偶联蛋白在肝性脑病小鼠黑质和前额叶皮层中表达变化

目的:观察不同时间内肝性脑病(Hepatic encephalopathy,HE)小鼠黑质和大脑前额叶皮层中线粒体解偶联蛋白2/4(Uncoupling Protein 2/4,UCP2/4)的变化及可能的关系。方法:取C57/BL小鼠,随机分为sham组、HE 1 d、4 d、7 d四组。HE组小鼠腹膜腔内注射硫代乙酰胺(TAA),sham组注射同等剂量的Na Cl。用Elisa检测小鼠血清中血清氨水平;随后分别运用Western Blot和RT-q PCR测定UCP2/4在黑质和前额叶皮层全组织蛋白和线粒体蛋白水平变化以及mRNA水平中的表达差异。结果:(1)肝性脑病组小鼠血氨水平较对照组小鼠明显升高(P0.01);在蛋白水平检测发现,(2)肝性脑病黑质中UCP2在总组织和线粒体水平表达均明显增加(P0.001),而UCP4却无明显变化(P0.05);(3)在肝性脑病前额叶皮层中UCP2和UCP4在总蛋白水平和线粒体提纯蛋白水平中均明显增加(P0.05);在RT-q PCR水平检测,(4)肝性脑病小鼠黑质中UCP2水平显著增加(P0.01),而UCP4未见明显变化(P0.05);(5)肝性脑病小鼠前额叶皮层发现UCP2(P0.001)和(P0.01)UCP4在mRNA水平均显著升高。结论:肝性脑病小鼠黑质和前额叶皮层中线粒体解偶联蛋白2和4发挥着重要的作用。     

创伤性胰腺损伤147例临床分析

背景与目的：胰腺创伤是多种因素引起胰腺解剖结构或功能破坏,通常分为闭合性和开放性,但是胰腺创伤并不常见,一旦发生,通常合并多器官的损伤,而且胰腺特殊的解剖位置给诊断和治疗带来难度,所以胰腺创伤的高病死率与诊断和治疗的延误有关。近年来,随着我国工业化的进步,胰腺创伤的发病有升高的趋势,致伤因素与地域也有关系。因此,本研究总结单中心15年胰腺创伤的致病因素、创伤分级和治疗方式,以期获取经验指导临床实践。方法：回顾性分析2008年1月—2022年12月中国人民解放军空军军医大学第一附属医院收治的147例胰腺创伤患者的临床资料,根据美国创伤外科协会（AAST）标准进行胰腺创伤分级,归纳分析致病原因、创伤分级以及相对应的治疗方式和转归。结果：开放伤15例,闭合伤132例。最多的致病因素为车祸伤65例（44.22%）,剩余依次为打架斗殴伤（钝器或锐器） 28例（19.05%）,高坠伤为18例（12.24%）,外伤为10例（6.80%）,摔伤、碰撞伤（非车祸伤） 8例（5.44%）,挤压伤4例（2.72%）,炸伤1例（0.68%）,不明原因伤13例（8.84%）。根据AAST标准分级,Ⅰ级58例（3...     

基于FISH技术研究线粒体分裂蛋白Drp1 mRNA在小鼠杏仁复合体的分布

目的:最新研究表明,对线粒体的分裂进行精密调控的关键蛋白是Drp1(dynamin-related protein 1,Drp1)。杏仁复合体属于中枢神经系统边缘系统的一部分,功能重要但是非常复杂。本研究拟通过荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术对Drp1在杏仁复合体的分布特点进行描述。方法:本实验通过自行设计Drp1基因的引物、合成探针,同时采用(FISH)进行染色观察,得到Drp1 mRNA在小鼠杏仁核复合体的分布特点。结果:研究发现,Drp1 mRNA几乎分布于全部杏仁核,且在内侧杏仁核、皮质杏仁核和基底杏仁核的表达水平非常高。亚细胞水平研究进一步表明,Drp1 mRNA全部位于神经元胞体,特别是核周区域,而在突起处未见其表达。结论:以上结果提示,Drp1可能通过调节杏仁复合体处神经元的线粒体的分裂状态,参与动物的内脏活动、防御功能以及情绪变化。但是具体机制尚需进一步研究。