系统性红斑狼疮患者自身反应性T 细胞的分离和鉴定及其细胞反应性使用情况分析

系统性红斑狼疮 (SLE)是一种累及多器官、多系统的自身免疫性疾病 ,其典型的特征是B细胞多克隆活化和多种自身抗体的产生[1 4 ] 。多种证据表明自身反应性T细胞能促进疾病相关自身抗体的产生 ,在体外能够辅助自身的B细胞产生抗双链DNA(dsDNA)抗体等自身抗体[1 4 ] 。我们在体外建立可长期培养的自身反应性CD4+T细胞系并对其功能及其T细胞反应性 (TCR)的使用情况进行分析 ,为进一步了解SLE的自身免疫机制并为将来的临床治疗提供理论基础。一、对象与方法1.培养基及试剂 :细胞培养所用培养基为完全RPMI 16 40 (Hyclone)含有 10 %热…     

胎儿及新生儿脐带血T淋巴细胞表型的比较研究

目的 探讨胎儿及足月新生儿外周血T淋巴细胞表型的演变。方法 通过B 超定位穿刺获得不同孕周正常胎儿脐带血,并分离其T淋巴细胞,与同期获得的孕足月脐带血及孕妇外周血T淋巴细胞,均予荧光抗体双标,流式细胞仪分析各组T淋巴细胞表面分子;分析胎儿T淋巴细胞表型与孕龄的关系,并对比研究胎儿与成人T淋巴细胞表型之差异。结果 随着胎龄增加,胎儿外周血白细胞中淋巴细胞百分率逐渐下降;T淋巴细胞中CD4^ /CD8^ 比率亦逐渐下降;胎儿CD3^ 随着胎龄增加,TCRγδ及CD45RO阳性细胞群显著著低于成人外周血相应百分率。胎儿脐血中CD34^ 细胞百分比明显高于成人外周血。结论 胎儿T淋巴细胞表型与孕龄有关,与成人外周T淋巴细胞相比,具有不成熟性,或与人类胎儿逐渐获得外周免疫耐受有关。     

人CD4+CD25+调节性T细胞系的建立与功能分析

目的：建立可在体外长期培养的人CD4^ CD25^ 调节性T细胞系并研究其免疫生物学特性。方法：用流式分选的方法从健康人外周血淋巴细胞中得到CD4^ CD25^ T细胞，并对其进行体外长期培养、扩增；淋巴细胞转化实验分析其免疫抑制功能，流式细胞法分析其表型。结果：经对人CD4^ CD25^ T细胞的长期培养扩增，获得具有免疫抑制功能的调节性T细胞系。该T细胞系对经TCR的刺激不敏感，且能抑制同一来源或同种异型CD4^ CD25^ T细胞的活化，大剂量IL－2可以逆转其抑制功能。长期培养的CD4^ CD25^ T细胞，膜表面CD25和CTLA－4分子持续高表达，而CD4^ CD25^ T细胞CD25和CTLA－4分子的表达呈周期性变化。结论：将CD4^ CD25^ T细胞体外扩增培养成系，其功能和表型与同一来源的CD4^ CD25^ T细胞显著不同。     

卵清白蛋白特异性T细胞免疫诱导BALB/c小鼠的调节性免疫应答

目的：研究T细胞免疫后正常小鼠的调节性免疫应答，方法：应用体外扩增的卵清白蛋白（OVA）特异的T细胞克隆免疫BALB／c小鼠，3H－TdR掺入法分析细胞增殖，3H－TdR标记靶细胞检测杀伤T细胞的杀伤效应，间接免疫荧光法分析血清中抗T细胞抗体水平。结果：T细胞免疫后能诱导BALB/c小鼠产生调节性T细胞的增殖反应，对靶细胞的杀伤效应以及针对于活化的T细胞的体液免疫应答，并进一步降低机体对OVA抗原的应答，结论：T细胞免疫能诱导正常机体的调节性免疫应答。