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目的:研究siRNA沉默糖体蛋白L31(ribosomal protein L31,RPL31)对人胰腺癌BxPC-3细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,探讨RPL31基因在胰腺癌中可能的作用机制.方法:设计合成靶向人RPL31基因的siRNA及阴性对照siRNA;建立人胰腺癌BxPC-3细胞的Balb/c裸鼠皮下移植瘤模型,按照移植瘤体积随机化分为3组:溶剂对照组、阴性对照组及RPL31-siRNA干预组;使用RNAi-Mate转染试剂将RPL31-siRNA进行移植瘤瘤内注射,观察各组裸鼠体内瘤体生长速度,绘制肿瘤生长曲线;采用实时定量PCR及Western blot的方法检测移植瘤组织RPL31基因的表达;免疫组织化学法(immunohistochemistry,IHC)检测裸鼠皮下移植瘤Ki-67及CD31的表达;原位末端标记技术(TUNEL)检测移植瘤组织的细胞凋亡.结果:与溶剂对照组和阴性对照组相比,RPL31-siRNA注射组裸鼠皮下移植瘤生长缓慢,移植瘤体积明显缩小,差异具有统计学意义(P<0.05);移植瘤组织中RPL31基因的mRNA水平和蛋白水平表达下调;另外,RPL31-siRNA注射组裸鼠移植瘤中Ki-67表达下调(55.78%±4.63%、51.37%±5.05%vs11.08%±1.31%),CD31的表达下调(56.53%±6.03%、44.84%±5.24%vs9.67%±1.39%);RPL31-siRNA注射组裸鼠移植瘤细胞凋亡增加(2.92%±0.54%、3.85%±0.87%vs39.58%±4.02%).结论:RPL31-siRNA可以下调胰腺癌BxPC-3细胞裸鼠皮下移植瘤中RPL31基因的表达,抑制移植瘤的生长,并且还可以抑制移植瘤中Ki-67及CD31的表达,诱导移植瘤细胞的凋亡.以RPL31为靶点的基因治疗有潜在临床应用前景. 相似文献
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从伊钮小单孢菌(Micromonospora inyoensis)中扩增到参与西索米星生物合成基因sisM,其开放阅读框长1263bp.编码含421个氨基酸残基(44.3ku)的蛋白质。经Blast比对,该蛋白与已报道的L-谷氨酰胺:2-脱氧蟹肌醇(DOI)氨基转移酶有很高的同源性,据此推测sisM是编码DOI氨基转移酶的基因。该基因在IPTG诱导下.在大肠埃希菌BL21(DE3)实现了表达,表达产物的分子量与推测的一致。这是从伊钮小单孢菌克隆到的又一参与西索米星核心基团2-脱氧链霉胺(DOS)生物合成的新基因,该基因在GenBank的登录号为EU074791。 相似文献
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植物内生菌及其代谢产物的药学研究进展 总被引:7,自引:0,他引:7
植物内生菌是一类重要的微生物资源,具有丰富的生物多样性。内生菌与宿主植物在长期共进化过程中,形成了密切的互惠共生关系,更为重要的是内生菌可以产生一系列的抗菌、抗肿瘤、抗虫等多种生物活性物质,在医药、农业、工业等领域具有重要的应用价值。 相似文献
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目的 设计合成一系列具有3-羟基-5-烯骨架的五环甾体骨架衍生物,并测试其抑制乳腺癌细胞新血管生成的活性。 方法 以孕烯醇酮醋酸酯为原料经3条不同合成路线对甾体D环16、17及20位进行一系列结构修饰。 结果 一共合成了12个化合物,其中新化合物有6个,结构均经核磁共振氢谱、碳谱及质谱确证。 结论 生物活性检测显示上述结构修饰的化合物对乳腺癌细胞血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor, VEGF)均有显著的抑制活性,EC50均在1 mmol/L或低于1 mmol/L的水平,其中化合物2a和4b的治疗指数TI值高于阳性对照品2-甲氧基雌二醇(2-Methoxyl Estradiol, 2-ME) 相似文献
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目的考察引入血红素合成关键基因对褐黄孢链霉菌生产纳他霉素的影响。方法运用PCR方法扩增相关血红素合成基因hem A1、hem B、hem E,使用属间接合转移的方法转化入褐黄孢链霉菌HCCB13086,获得引入血红素基因的工程菌株;通过摇瓶发酵考察突变菌株对载氧能力及纳他霉素产量的影响。结果成功构建3个引入血红素合成关键基因的菌株,3株菌在相对高氧条件下生长及产抗能力均与对照组相当,而在相对低氧条件下纳他霉素产量均较对照菌株提高,其中引入hem A1血红素基因的菌株提高最为显著,较对照组的纳他霉素产量提高64%,达到8.52 g/L。结论引入血红素合成基因可提高菌体对氧的利用,促进菌体生长和代谢产物的增加。 相似文献
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细菌耐药性机制的研究与新药开发I 细菌产生钝化酶的耐药机制与新药研究 总被引:5,自引:0,他引:5
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