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目的:建立基于问号钩端螺旋体(简称钩体)rLipL32/1-LipL21-OmpLl/2融合抗原的ELISAs,并应用于检测钩体病患者血清特异性IgG和IgM。方法:采用显微镜凝集试验(MAT),检测钩体病患者血清及rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2兔抗血清对我国问号钩体参考标准株的效价。分别以rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2、rLipL32/L、rLipL21和rOmpL1/2为包被抗原,建立检测血清特异性IgM和IgG的ELIsAs,并用于检测107份MAT阳性钩体病患者血清标本。结果:MAT结果证实,66%(71/107)患者感染黄疸出血群问号钩体,rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2兔抗血清对我国15株问号钩体参考标准株的凝集效价为1:20~1:160。rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2、rLipL32/1、rLipL21、rOmpL1/2抗原用于检测IgM的ELISA阳性率分别为89.7%、75.7%、85.1%和79.4%,用于检测IgG的ELISA阳性率分别为99.1%、99.1%、94.4%和86.09/6。rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2-IgM—ELISA检测阳性率高于其它3种检测IgM的ELlSAs(P〈0.05),rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2-IgG—ELISA检测阳性率高于rOmpLl/2IgGELISA(P〈0.05),但与rLipL21-IgGELISA及rLipL32/1-IgGELISA接近(P〉0.05)。结论:rLipL32/1-LipL21-OmpL1/2-ELISAs可作为敏感、特异的通用型钩体病血清学早期诊断方法。 相似文献
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徐韩飞 《中国人兽共患病杂志》2006,22(10):F0002-F0002
南非蜱咬热(African tick-bite fever,ATBF)是由非洲立克次体属(R.africae)引起的立克次体病。我们对8个病人通过细胞培养及PCR阳性和血清学阳性的联合检测确定为ATBF,再从这8个患者的表皮嫁接焦痂中提取非洲立克次体,对其组织特点和免疫检测进行探究。通过大量的图象分析,我们对南非蜱咬热病人和地中海斑点热焦痂的炎症模式进行比较。 相似文献
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P1319家禽中禽流感的控制//Ilaria Capua,Stefano Ma-rangon由世界动物健康组织(OIE)提名的禽流行性感冒,是一种对动物和人类健康都有重要影响的疾病。该疾病的很多方面都缺乏科学数据,因而近些年的一些疫情的控制与管理也受到了阻碍。随着数以百万动物的死亡,人们对引起人类死亡原因和该病广泛流行潜在危机的关注度也在增加。依据新近的科研突破以及OIE新的对动物福利维护与规定细则,我们对禽类中禽流感控制的可行性方法做了归纳与总结,包括对动物的捕杀、急救和预防性疫苗的注射等。(徐韩飞摘译,严杰校)P1332南非蜱咬热焦痂的组织特… 相似文献
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目的 克隆问号钩端螺旋体(简称钩体)鞭毛相关蛋白编码jliH、fliⅠfliH、和fliN并构建其原核表达系统,制备表达产物抗血清并了解其蛋白的定位.方法 以苯酚-氯仿法提取的问号钩体黄疸出血群赖型赖株基凶组DNA为模板,用PCR扩增全长fliH,fliⅠ,firY和flfliN基因片段,T-A克隆后测序,继而构建上述目的 基因克隆的原核表达系统.采用SDS-PAGE和BioRad凝胶图像分析系统检查重组蛋白rFliH、rFliI、rFliY和rHiN的表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯目的 表达产物.皮下免疫家兔获得4种目的 重组蛋白抗血清,用ELISA和Western blot分别检测抗血清效价并了解抗血清与相应抗原结合的能力.采用免疫电镜技术对FliH、FliⅠ、FliY和FliN进行定位.结果 PCR扩增获得大小分别为924、1365、1065和318 bp的全长fliH,fliⅠ,fliY和fliN基因片段,与报道的序列比较.其核苷酸和氨基酸序列相似性均为100%.所构建的原核表达系统均能有效地表达目的 重组蛋白,其产量均约为20%.rFliH、rFliⅠ、rFliY和rHiN蛋白免疫家兔后能产生抗体,其兔抗血清ELISA效价达到1:100 000以上,并分别识别钩体相应重组蛋白和膜蛋白提取物而出现明显的Westem杂交条带.FiH、FliⅠ、FliY和FliN蛋白分布于问号钩体内膜、外膜或内外膜之间.结论 本研究成功地构建了能高效表达问号钩体鞭毛相关蛋白FliH、FliⅠ、FIiY和HiN的原核表达系统,并获得了能有效识别上述蛋白抗原的高效价抗血清.鞭毛相关蛋白HiH、Flil、FliY和FIiN是问号钩体内膜或外膜蛋白成分. 相似文献
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