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利用基因工程技术构建成功质粒型Ⅰ型单纯疱疹病毒（ＨＳＶ－１）载体ｐＨＳＶ，其中含有ＨＳＶ－１包装信号序列和ＨＳＶ－１复制起点，以及ＨＳＶ－１ＩＥ６８启动子。为验证其构建是否成功，在其ＩＥ６８启动子下游的多克隆位点上插入了Ｅ．ｃｏｌｉＬａｃＺ基因，构建成ｐＨＳＶＬ质粒。用ＨＳＶ－１温度敏感株（ｔｓＫ株）超感染传代细胞后，将这种质粒转染入该细胞，ｐＨＳＶＬ可在辅助病毒ＨＳＶ－１ｔｓＫ（允许温度为３１℃）存在的条件下被包装成病毒颗粒，由此得到的混合病毒含有ＨＳＶ－１ｔｓＫ和ｐＨＳＶＬ假病毒颗粒，收获后再感染培养的Ｖｅｒｏ细胞，原位检测β－半乳糖苷酶活性呈阳性。同时用ｐＨＳＶＬ病毒接种体外培养的ＳＤ大鼠胚胎脊髓运动神经元，用Ｘ－ｇａｌ原位检测β－半乳糖苷酶的活性，亦发现有阳性的神经元存在。说明载体ｐＨＳＶＬ携带的报告基因ｌａｃＺ在这两种真核细胞中均得以正确表达。报告基因可为其它目的基因所代替，可用于神经生理、病理以及神经系统疾病基因治疗的实验研究。 相似文献
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异基因骨髓移植是治愈白血病及某些实体肿瘤的有效手段,但其并发症——移植物抗宿主病(GVHD)目前仍具有相当高的发病率和死亡率,是影响移植成功的主要障碍.在移植前体外去除供者骨髓中的T淋巴细胞可有效减轻GVHD)的发生,但T细胞的去除可使移植物失去移植物抗白 相似文献
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采用分子克隆技术在大肠杆菌中表达HPV16 E2 ORF。用Cfol和BamHI将含有E2基因的3.2kb片段从HPV16基因组中切出来,用S1核酸酶修平末端;同时,表达性载体pBD2 DNA用HindⅢ切开后也用S1核酸酶修平末端.两者连接后转化E coli BMH71—18.用原位杂交技术筛选出阳性重组子,进行DNA酶切分析和蛋白质SDS-PAGB分析及免疫学鉴定.我们认为表达的蛋白质为β-gal与E2的融合多肽。 相似文献
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应用ＰＣＲ／ＲＦＬＰ方法对广东籍２２名正常人及２０名胰岛素依赖型糖尿病人（ＩＤＤＭ）进行了ＨＬＡ－ＤＱＢ１等位基因分型。结果：在ＤＱＢ１等位基因中未发现单独出现于ＩＤＤＭ的类型；全部等位基因中正常对照组与ＩＤＤＭ组间均无显著性差异；非Ａｓｐ－５７编码的ＤＱＢ１等位基因与广东籍ＩＤＤＭ病人不相关；广东籍ＩＤＤＭ的免疫遗传基因可能在ＨＬＡ－ＤＱＢ１以外的其它位点。 相似文献
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我们利用尼龙膜和~(35)S标记的HPV-16探针(比活性为2-3×10~7cpm/μg),采取简单易行的斑点杂交技术,建立了消除HPV各型间交叉反应的最适杂交、漂洗和放射自显影条件,并在该条件下在30例取自天津的人宫颈鳞状上皮癌组织DNA中,检出17例(56.7％)为HPV-16DNA阳性。 相似文献
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徐钤 《国外医学:妇产科学分册》1988,(4)
本文报告澳大利亚悉尼市患者的宫颈刮屑、肛门刮屑和肛门活检中人乳头瘤病毒(HPV)的不同型别的发病率。所用的方法是将许多份细胞样品点在同一张尼龙膜上,然后相继用HPV DNA6+11型和16+18型两种混合探针与之进行杂交。同时还用另一种探针(Alu探针)估测样品中DNA量是否足够。结果见表一和表二。另外还对7名男性(6名为同性恋者,且有生殖器疣史)的Alu阳性肛门刮屑进行HPV DNA杂交检测。结果为6名同性恋者中,4名既往肛门湿 相似文献
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构建了可在哺乳动物细胞中表达人ｐ５３蛋白的重组质粒ｐ５３─ｐＳＶ２ｎｅｏ，分别转染猴肾细胞株ＣＶ─１及人子宫颈癌细胞株ＳｉＨａ。用ＰＣＲ法检测出转染细胞中的ｐ５３ｃＤＮＡ；用免疫组化ＡＢＣ法检测出ｐ５３蛋白的表达定位于细胞核内，用Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测出转染细胞中存在ｐ５３蛋白。结果表明，外源性野生型ｐ５３基因的表达可以使ＳｉＨａ细胞的细胞克隆形成效减少５０％，使细胞生长速度降低，但对ＳｉＨａ细胞的软琼脂克隆形成效无明显影响。提示ｐ５３基因的肿瘤抑制作用与野生型ｐ５３蛋白的量有关，并且是细胞类型特异性的。 相似文献
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徐钤 《南方医科大学学报》1990,(1)
为了便于叙述和理解,我们先简单复习一下疟原虫的生活史。人和其他脊椎动物(如齧齿类、鸟类和爬虫类等)在被蚊叮咬时都有可能感染疟疾。 雌按蚊从受感染的人吸入配子体(game-tocytes)状态的原虫。配子体在蚊体内通过复杂的变化转变为子孢子(sporozoites),后者存在于按蚊的唾液腺中,而由按蚁的叮咬再传播给人类。进入人体的子孢子侵入肝实质细胞,并在肝细胞中转化为裂殖子(merozoites),称为红细胞外期。在肝细胞破裂时裂殖子被释放入血液中,然后侵入红细胞,并在红细胞中繁殖。在破坏宿主红细胞后,裂殖子释入血流中,并侵入其他红细胞,进入红细胞内期的周 相似文献