大鼠肝细胞Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因表达及PDGF的影响

目的观察大鼠肝细胞Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因的表达及ＰＤＧＦ对其表达的影响．方法应用原位杂交技术检测分离培养的ＳＤ大鼠肝细胞（ｎ＝３０）内Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因的表达．同时观察１０μｇ／Ｌ（ｎ＝３０）和３０μｇ／Ｌ（ｎ＝３０）ＰＤＧＦ促进前胶原基因表达的作用．测定基因表达颗粒总面积占细胞总面积的百分比，并作比较分析．结果无论正常肝细胞或是在两种浓度的ＰＤＧＦ存在时，肝细胞内均可见到Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因的表达．正常肝细胞Ⅰ，Ⅲ型前胶原基因表达面积的百分比（％）为７７±１９和７５±２１；加１０μｇ／ＬＰＤＧＦ后为１１５±１９和１１２±１０，而加３０μｇ／Ｌ后为１５２±３４及１８１±２８，且在后者中表达明显增强（Ｐ＜００５及Ｐ＜００１）．结论ＰＤＧＦ在转录水平上促进肝细胞胶原的合成．     

激活素和卵泡抑素mRNA在肝纤维化形成过程中的作用

目的 观察四氯化碳（ＣＣｌ４）诱导实验性肝纤维化模型大鼠肝纤维化形成过程中激活素（ＡＣＴ）βＡ、βＣ、βＥ及卵泡抑素（ＦＳ）ｍＲＮＡ的表达。方法 ４０％ＣＣｌ４皮下注射制备大鼠实验性肝纤维化模型，注射 ＣＣｌ４后１、２、３、４、５、６、７周分批处死动物，每次 ６～１２只，采用半定量 ＲＴ—ＰＣＲ检测 ＡＣＴ βＡ、βＣ、βＥ亚基及 ＦＳｍＲＮＡ的表达。结果 正常肝脏可检测到ＡＣＴ βＡ、βＣ、βＥ及ＦＳ亚基ｍＲＮＡ，往射ＣＣｌ４２～３周后，βＡ水平下降至检测不到的水平，４周以后，又逐渐升高，注射 ６～７周时其表达水平明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０１）；注射ＣＣｌ４１～４周可检测到βＣ亚基ｍＲＮＡ，５～７周后其表达水平明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０５）。βＥ亚基ｍＲＮＡ在 ＣＣｌ４注射１～５周后水平下降至检测下到的水平，注射 ６～７周后其表达水平则明显高于正常对照组（Ｐ＜０．０５）。ＣＣｌ４注射后的各个时期均未检测到ＦＳ ｍＲＮＡ表达。结论 肝纤维化形成过程中ＡＣＴ、ＦＳ表达发生了不同的变化，ＡＣＴ—ＦＳ系统失衡可能参与了肝纤维化的形成。     

大黄与粉防己碱抗实验性肝纤维化的对照研究

目的 研究大黄和粉防己碱(Tet)对大鼠实验性肝纤维化的影响并探讨其可能的作用机制。方法 四氯化碳皮下注射法制备大鼠肝纤维化模型，分别给予大黄和Tet灌胃。酶动力法测定肝功能，放免法测定细胞外基质(ECM)，HE、VG染色检测肝组织病理形态学改变，随机抽取样本电镜下观察超微结构改变。结果 大黄与Tet均可改善肝纤维化时的肝功能状态，降低ECM含量，降低肝纤维化程度，以大剂量大黄和小剂量Tet效果最显著。结论 大黄与Tet可保护肝细胞，抑制ECM合成，具有防治实验性肝纤维化和肝硬化的作用。     

血管紧张素Ⅱ受体阻断剂抗肝纤维化的实验研究

目的 探讨血管紧张素Ⅱ１型受体阻断剂对四氯化碳（ＣＣｌ４）诱导的实验性肝纤维化大鼠血清层粘连蛋白等细胞外基质水平的影响。地大鼠肝实质损伤性肝纤维化模型由ＣＣｌ４诱导。５０只雄性ＳＤ大鼠被随机分为５组：对照组、模型组及治疗组（高、中、低剂量组）,每组１０只,除对照组外所有大鼠均给予皮下注射４０％ＣＣｌ４（精制橄榄油配制,每３日１次,共６周）,对照组注射等体积的精制橄榄油。治疗组同时给予血管紧张素Ⅱ受     

抗结缔组织生长因子小分子干扰RNA设计、合成及活性鉴定

目的　设计、合成及筛选高效抗肝纤维化关键基因———结缔组织生长因子 (CTGF)的小分子干扰RNA(siRNA)。方法　应用RNA设计软件 ,模拟SD大鼠CTGFmRNA二级结构 ,设计并合成针对CTGFmRNA 483、885及946位点的三对 2 1核苷酸 (nt)siRNA ,转染肝星状细胞系 (HSCT6) ,以空白及转染非特异siRNA(与CTGFmRNA无同源性的 2 1ntsiRNA)作为对照 ,应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测HSCT6细胞CTGFmRNA表达。结果　与对照相比 ,转染siRNA的HSCT6细胞CTGFmRNA明显下调 ,在 5 0～ 2 0 0nmol/L范围 ,CTGFmRNA下调幅度呈浓度依赖性增加 ,以 483siRNA 2 0 0nmol/L最显著 ,转染非特异siRNA的HSCT6细胞CTGFmRNA表达水平无明显变化。转染 483siRNA的HSCT6细胞 2 4、48及 72hCTGFmRNA分别较对照下调 91%± 2 %、65 %± 3 % (t =78.82 ,3 7.5 3 ,P均 <0 .0 1)和 10 %± 7% (t =2 .5 5 ,P =0 .0 6) ,在 2 4～ 72h范围 ,CTGFmRNA下调幅度呈时间依赖性降低。结论　成功筛选到能高效阻抑CTGF表达的 483siRNA ,其有效阻抑时间约 72h ,有望通过介导CTGFmRNA剪切而抑制肝纤维化的发生与发展 ,可发展为新一代防治肝纤维化的核酸药物     

人卵泡抑素基因全长cDNA的克隆

目的 克隆人卵泡抑素(FS)全长cDNA基因。方法 采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)从人肝组织中扩增FS cDNA。构建PMD18-T载体，采用BamHⅠ、HindⅢ双酶切以及DNA测序进行鉴定。结果 RT-PCR扩增长度为968bp的基因片段，BamHⅠ、HindⅢ双酶切结果显示重组T载体中含有目的基因片段，测序结果显示编码区无基因突变。结论 人FS全长cDNA基因克隆成功，并构建了重组PMD18-T载体。     

氢化泼尼松注射液致过敏性休克1例的急救护理

正氢化泼尼松注射液是肾上腺皮质激素类药,可减轻和防止组织对炎症的反应,从而减轻炎症的表现,也可防止或抑制细胞介导的免疫反应、迟钝的变态反应,对抗细胞内毒素对机体的刺激反应,减少细胞损害,发挥保护机体的作用。该药多用于皮炎、变态反应性疾病、感染性休克等。使用氢化泼尼松注射液引起变态反应较罕见。2014年     

雌激素对雄性大鼠肝纤维化形成的影响

目的探讨体内睾酮(T)和雌激素(β-Est)抑制肝纤维化的关系.方法CCl4皮下注射诱导肝纤维化模型,观察20μg·kg-1·d-1β-Est对完整或去势雄性大鼠肝纤维化形成的影响.以标准酶、ELISA、RIA分别测定血清肝功能、细胞外基质(ECM)和性激素水平;VG胶原染色观察肝组织病理学改变,结合图像分析计算胶原面积;RT-PCR和免疫组化检测转化生长因子-β1(TGF-β1)、激活素βA(ACTβA)在组织中的表达.结果β-Est能改善去势纤维化大鼠肝功能,降低ECM分泌、肝组织纤维化程度和TGF-β1、ACTβA表达,而对完整雄性大鼠肝纤维化形成无影响;两组大鼠血清雌二醇水平无显著性差异.结论β-Est能抑制肝纤维化形成,T影响其发挥保护作用,可能是造成肝纤维化性别差异原因之一.