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检测马白细胞介素-18双抗体夹心ELISA方法的建立   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的:建立检测马白细胞介素-18(equine interleukin-18,EIL-18)的双抗体夹心ELISA,为马传染病的免疫学研究提供新方法.方法:将识别不同表位的EIL-18的2株单克隆抗体(mAb)B1G1和S6A3纯化后,利用生物素标记试剂盒对B1G1株mAb进行标记,以重组马白细胞介素-18(rEIL-18)为捕获抗原进行ELISA检测来建立EIL-18双抗体夹心ELISA.结果:经过方阵滴定试验确定捕获抗体的最佳浓度为4 mg/L,检测抗体的工作效价为1:2 000.建立的方法可检测马血清中的EIL-18,与猪、牛和羊血清中的IL-18不发生交叉性反应,此方法检测敏感度达到15 ng/L,特异性良好. 结论:成功建立了EIL-18的双抗体夹心ELISA,为马细胞免疫学研究提供了方法,也为下一步EIL-18 ELISA试剂盒的商品化开发奠定了坚实基础.  相似文献   
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目的:建立检测马γ-干扰素的双抗体夹心 ELISA,为马传染病的免疫学研究提供新方法.方法:将识别不同表位的抗马γ-干扰素的2株单克隆抗体(mAb,A5和SB10)纯化后,利用生物素标记试剂盒对其中1株纯化的mAb(SB10)进行标记,通过对重组马IFN-γ进行ELISA检测来建立马γ-干扰素双抗体夹心ELISA.结果:经过方阵滴定实验确定捕获抗体的最佳浓度为1 mg/L,检测抗体的工作效价为1∶1 000.利用建立的方法对不同稀释度的重组马γ-干扰素和丝裂原刺激的马外周血单核细胞培养上清进行检测.结论:此方法检测敏感度达到1μg/L,特异性良好,为马的细胞免疫学研究提供了方法,并为建立马γ-干扰素ELISPOT检测方法奠定了基础.  相似文献   
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