抗血管紧张素Ⅱ单克隆抗体制备及初步鉴定

目的 运用杂交瘤技术制备血管紧张素Ⅱ单克隆抗体,并对其进行初步鉴定.方法 制备血管紧张素Ⅱ免疫原免疫BALB/c小鼠,将小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,通过筛选克隆后获得细胞株并制备血管紧张素Ⅱ单克隆抗体,对抗体的亚型、效价、亲和常数、交叉反应率进行测定并评估其用于化学发光免疫分析的性能.结果 共制备出6株单克隆...     

抗血管紧张素Ⅰ杂交瘤细胞株制备方法的建立

目的 制备抗血管紧张素Ⅰ(angiotensin I,AⅠ)的杂交瘤细胞株,比较不同连接载体产出杂交瘤细胞的效果.方法 通过对载体分别为牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)的AⅠ-BSA和AⅠ-OVA免疫原进行小鼠免疫,将骨髓瘤细胞与免疫合格的小鼠进行脾细胞融合,筛选出阳性杂交瘤细胞株,经过克隆、扩大培养、腹水诱生等工序,生产出AⅠ单克隆抗体,测定并比较不同连接载体产出杂交瘤细胞抗体的性能,筛选具有应用价值的抗体.结果 本方法共产出9株AⅠ杂交瘤细胞株,其中AⅠ-OVA组产出4株,AⅠ-BSA组产出5株,进行各细胞抗体的功能检验,测定亚型、亲合常数,与AⅡ、1～7氨基酸肽段、5～8氨基酸肽段以及1～9氨基酸肽段均无交叉反应,优选出AⅠ-BSA组的D11C12单抗建立检测方法进行性能评价,空白限为0.04ng/mL,低值样本的分析内精密度为4.5％,高值样本的分析精密度为3.5％,与对照试剂盒进行68例样本检测结果相关性对比,r为0.9728.结论 成功建立抗血管紧张素Ⅰ杂交瘤细胞株制备方法,可以满足AⅠ单克隆抗体的使用要求.