转化生长因子β1短发夹RNA对白蛋白刺激人肾近曲小管上皮细胞细胞因子表达的影响

目的 研究pcDU6载体质粒介导的转化生长因子β1（TGF-β1）短发夹RNA（shRNA）对人血清白蛋白（HSA）致人肾近曲小管上皮细胞（HK2细胞）增殖，TGF-β1、结缔组织生长因子（CTGF）和纤连蛋白（FN）表达的影响，并探讨有关机制。方法 构建TGF-β1shRNA的pcDU6载体质粒，体外培养HK2细胞株。采用脂质体转染将表达TGF-β1shRNA的pcDU6质粒载体（pcDU6-A1-A2和peDU6-B1-B2）分别导人实验组细胞。用HSA（5g／L）刺激HK2细胞12h或24h。四甲基偶氮唑盐（MTF）比色法测定细胞增殖水平。RT-PCR半定量分析HK2细胞中TGF-β1、CTGF和FNmRNA的表达水平；双抗夹心酶联免疫吸附法检测HK2细胞培养液中TGF-β1及FN蛋白质水平。结果 HK2细胞在HSA刺激下，其TGF-β1、CTGF及FNmRNA的表达明显上调，培养液中TGF-β1和FN的蛋白质含量亦明显升高（P〈0．05）。与pcDU6空载体组比较，pcDU6载体质粒介导的TGF-β1shRNA干扰组TGF-β1、CTGF及FNmRNA的表达明显下调（P〈0．05）。TGF-β1shRNA转染HK2细胞后12h或24h，细胞培养液中TGF-β1和FN蛋白质含量明显下降，HK2细胞增殖被部分抑制（P〈0．05）。在细胞增殖、TGF-β1、CTGF及FN基因表达方面，TGF-β1shRNA干扰组组间比较，以及pcDU6空载体转染组与HSA刺激组比较，差异均无统计学意义。结论 peDU6载体质粒介导的TGF-β1shRNA能够明显抑制HSA刺激下HK2细胞增殖、TGF-β1、CTGF和FN基因的表达。HSA刺激HK2细胞增殖及CTGF和FN基因的过表达可能通过TGF-β1介导。     

丹参及生脉液对阿霉素所致大鼠肾小球硬化的实验性治疗作用

观察丹参及生脉液对阿霉素所致 Ｓ Ｄ 大鼠肾小球硬化实验性治疗作用。摘除大鼠左肾７ ｄ 后,尾静脉注射阿霉素（６ ｍ ｇ·ｋｇ － １） 。隔日腹腔注射丹参及生脉液,８ 周后处死大鼠。观察血红蛋白（ Ｈｂ） 、血尿素氮（ Ｂ Ｕ Ｎ） 、胆固醇（ Ｃｈ） 及２４ ｈ 尿蛋白含量; Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法测定肾皮质Ⅳ型胶原（ Ⅳｃｏｌ ．） 及层粘连蛋白（ Ｌ Ｎ） ;用免疫组化法,计算机图象分析肾小球系膜区Ⅳｃｏｌ ．及 Ｌ Ｎ 含量。结果显示：模型丹参及模型生脉液组肾皮质、肾小球系膜区Ⅳｃｏｌ．及 Ｌ Ｎ 含量明显低于模型对照组（ Ｐ ＜ ０ ．０５） ,高于正常对照组（ Ｐ ＜ ０ ．０１） 。提示丹参及生脉液能减轻阿霉素所致肾小球硬化的程度。     

高效液相色谱在临床治疗药物监测中的应用进展

高效液相色谱法(HPLC)是上世纪60年代末发展起来的一种新技术，主要应用于药物分析、科学研究、治疗药物监测等领域。本文对HPLC在临床治疗药物监测中的应用进展及应用前景进行综述。     

高糖透析液对大鼠腹膜结缔组织生长因子表达的作用

目的探讨腹膜透析液对大鼠腹膜结缔组织生长因子（CTGF）的表达及细胞外基质（ECM）合成的影响。方法将中南大学湘雅二医院动物实验中心提供的SD大鼠随机分为4组：正常对照组（Con）、生理盐水组（NS）、低糖透析液组（LG）、高糖透析液组（HG）。4周后,评价腹膜的功能。VG染色镜下测量腹膜胶原组织厚度。免疫组织化学方法检测CTGF、TGF-β1及纤连蛋白（FN）蛋白质的表达。采用RT-PCR检测大鼠腹膜组织中CTGF和TGF-β1mRNA的表达。结果LG、HG组与Con、NS组相比较,超滤量均显著下降（P〈0.05）;HG组与LG组比较,其超滤量明显减少（P〈0.05）。D/Pcr的比较：HG组比Con、NS组升高（P〈0.05）;D/DO的比较：HG组比Con、NS组明显下降（P〈0.05）,LG组比Con组低（P〈0.05）。HG组腹膜胶原厚度比与其余各组均增厚（P〈0.05）;LG组比Con组增厚（P〈0.05）;HG组CTGF、TGF-β1、FN蛋白表达水平显著高于其他各组（P〈0.05）;LG组显著高于Con、NS组（P〈0.05）。在Con及NS组中,TGF-β1、CTGFmRNA呈低水平表达,TGF-β1、CTGFmRNA在HG组中表达最高（P〈0.05）。结论腹膜透析液尤其是高糖腹膜透析液,能明显诱导大鼠腹膜CTGF的表达增强,并促使腹膜纤维化发生。     

转化生长因子β1在大鼠纤维化腹膜组织中的表达及作用

目的:检测转化生长因子β1在腹膜透析大鼠腹膜内表达,并探讨其在腹膜纤维化中的意义。方法:实验于2005-06/2006-03在中南大学湘雅二医院肾内科实验室完成。①实验材料:雄性SD大鼠,体质量180～240g,由中南大学湘雅二医院动物实验中心提供。②实验方法:将28只大鼠按随机数字表随机分为4组,每组7只。正常对照组不予任何干预;生理盐水组腹腔注射20mL生理盐水;低糖透析液组腹腔注射20mL1.5%葡萄糖透析液;高糖透析液组腹腔注射20mL4.25%葡萄糖透析液,均为1次/d。4周后,向大鼠腹腔注射4.25%葡萄糖腹膜透析液20mL,4h后于大鼠右下腹缓慢插入带有多个侧孔的10号静脉留置针,缓慢低位引流腹透液,量取引流液。③实验评估:取大鼠壁层腹膜组织,以苏木素-伊红染色,镜下测量腹膜厚度,采用免疫组织化学方法检测大鼠腹膜中转化生长因子β1及纤连蛋白。结果:28只大鼠均进入结果分析。①高糖透析液组、低糖透析液组超滤量均明显低于正常对照组与生理盐水组,并且高糖透析液组超滤量明显少于低糖透析液组(P均<0.05)。②高糖透析液组腹膜明显增厚,表面粗糙,间皮细胞肿胀,脱落,间皮下有大量血管生成以及胶原纤维沉积,还可见单核细胞等炎症细胞浸润,与其他组比较,腹膜厚度明显增加(P<0.05)。③高糖透析液组转化生长因子β1、纤连蛋白表达量均明显高于其他组;低糖透析液组转化生长因子β1、纤连蛋白表达量均明显高于正常对照组与生理盐水组(P<0.05)。④大鼠腹膜组织转化生长因子β1蛋白与纤连蛋白表达量、腹膜厚度之间呈明显的正相关(r=0.86,0.83,P<0.05)。结论:葡萄糖透析液可诱导腹膜组织转化生长因子β1明显上调,腹膜转化生长因子β1高表达与腹膜透析腹膜纤维化密切相关。     

维持性血液透析患者颈动脉硬化及相关因素分析

目的　研究慢性肾衰竭维持性血液透析患者颈动脉硬化程度及相关因素分析。方法　收集 13例慢性肾衰竭维持性血液透析患者及 13例配对对照者性别、年龄、体重、身高、BMI及病程等一般临床资料 ;抽前臂静脉血查血红蛋白 (Hb)、尿素氮 (BUN)、肌酐 (SCr)、白蛋白 (Alb)、前白蛋白 (PA)、总胆固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、高密度脂蛋白胆固醇 (HDL -C)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL -C)、C -反应蛋白 (CRP)、血浆纤维蛋白原、补体C3、载脂蛋白A1(Apo -A1)、载脂蛋白B(ApoB)及脂蛋白 (a) [Lp (a) ];彩色B型超声仪观测双侧颈总动脉、颈动脉分叉处及颈内动脉的解剖及血流动力学 ,包括斑块、最大 [(MaximumVelocity ,V(max) ]和最小血流速度 [(MinimumVelocity ,V(min) ](即收缩期和舒张期峰值血流速度 ) ,血管内皮厚度 (即内膜 -中膜厚度 ,IMT) ,阻力指数 (RI)。结果　慢性肾衰竭维持性血液透析组与对照组比较收缩压、舒张压和CRP均显著增高 (P <0 .0 1) ;Hb显著降低 (P <0 .0 5 ) ;Alb和PA显著降低 (P <0 .0 1)。原发疾病为高血压的患者CRP较原发疾病为慢性肾炎患者显著升高 (P <0 .0 1)。高血压组斑块发生率明显增高 (P <0 .0 1)。慢性肾衰竭维持性血液透析组平均IMT、最大IMT、V(min)、RI、斑块发生率与对照组相     

血液透析治疗对终末期肾病患者血清降钙素原的影响和意义

【目的】探讨终末期肾病患者进行血液透析后血清降钙素原（PcT）和C-反应蛋白（CRP）的变化。【方法]43例无全身感染的终末期肾病患者,分别在透析前和4h后测量血清PCT和cRP,并与40例健康志愿者进行比较。【结果】终末期肾病患者透析前PCT（2．13±0．7ng／mL）和CRP（14．3±2．9mg／L）,均高于健康对照组（PCT：0．18±0．03ng／mL,CRP：4．5±2．2mg／L）且差异有显著性（P〈0．01）。且在透析前,PCT与CRP呈弱的正相关。而透析4h后,PCT则显著降低,CRP无明显变化,且PCT与CRP无相关性。【结论】在终末期肾病不存在感染征象的患者中,其PCT及CRP水平显著增高,说明终末期肾病患者中存在慢性系统性炎症。虽然透析可降低血清PCT水平,但其对CRP则无影响。     

维持性血液透析患者血管钙化及相关因素分析

目的观察维持性血液透析(MHD)患者血管钙化情况及其影响因素,探讨矿物质与骨代谢指标在MHD患者血管钙化中的作用。方法选取MHD患者69例和健康体检者67例,检测血清白蛋白、血清总钙、血磷、血肌酐、碱性磷酸酶、钙磷乘积和全段甲状旁腺激素(i PTH)。同时行侧位腹平片(空腹)、髋关节正位片、双手及腕关节正位片X线检查以评价腹主动脉、股动脉、桡动脉及双手动脉钙化情况,并了解钙化与相关因素之间的关系。结果 MHD组血管钙化程度明显高于正常对照组(P0.05);中重度钙化组年龄、透析时间、血糖、血磷和钙磷乘积均高于轻度钙化组(P0.05);低i PTH(150 ng/L)、高i PTH(300 ng/L)患者i PTH与钙化相关(P0.05),150~300 ng/L i PTH患者i PTH与钙化无相关性(P0.05)。结论年龄、透析时间、血磷、血糖、钙磷乘积、i PTH水平可能与MHD患者血管钙化密切相关。     

不同剂量缬沙坦治疗合并高血压的慢性肾小球肾炎疗效研究

目的 评价常规剂量与高剂量的缬沙坦对慢性肾小球肾炎合并高血压的肾脏保护作用.方法 将2004年3月至2006年1月中南大学湘雅二医院肾内科住院的30例慢性肾小球肾炎患者随机分为常规剂量组(n=15)和高剂量组(n=15),常规剂量组口服缬沙坦160mg/d,高剂量组口服缬沙坦320 mg/d,疗程6个月.观察24 h尿蛋白、血压、血清肌酐、估算肾小球滤过率(GFR)及血钾的变化.结果 两组患者的基线临床资料基本相似,6个月后,两组患者的血压控制差异无统计学意义,常规剂量组血清肌酐(Scr)从(141±53)μmol/L升至(186±61)μmol/L,GFR从(68±30)mL/min降至(6l±32)mL/min;而高剂量组Scr[(141±62)μmoL/L到(142±71)μmol/L]和GFR[(67±38)mL/min到(69±38)mL/min]在观察期间无明显改变;高剂量组蛋白尿下降更为显著(P<0.05);两组血清钾均无明显改变.结论 对慢性肾小球肾炎伴高血压的患者,高剂量缬沙坦在减少蛋白尿、延缓慢性肾功能衰竭的进展方面更为有效.