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IMMUNOSCREENING OF SCHISTOSOMA JAPONICUM EGG cDNA LIBRARY 总被引:5,自引:2,他引:5
目的:从日本血吸虫虫卵文库中筛选并鉴定出与免疫诊断及免疫预防有关的基因克隆。方法:采用S.jSEA超免疫兔血清对日本血吸虫卵文库进行筛选。先去除抗大肠杆菌抗体,经三轮筛选得到12个阳性克隆,然后,用辅助噬菌体进行体内剪切,经抗菌素平板筛选含重组质粒的阳性菌落,每个菌落分为2份,一份进行PCR扩增以测定插入片段的大小。另一份用于制备纯质粒DNA模板,进行DNA序列测定,通过GCG软件对所得DNA序列与GenBank中的序列进行同源性比较。结果:共筛得12个阳性克隆,PCR后测得其长度大多为1.2kb,其中8个与S.j热休克蛋白70的基因同源,2个与S.j钙网蛋白同源,1个与S.mimmunophilin同源,1个与S.j23kDa蛋白同源。结论:本研究首次报道用抗SEA血清对日本血吸虫虫卵文库的筛选结果,所得的12个阳性克隆均为编码日本血吸虫免疫诊断及预防有关的基因。 相似文献
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用噬菌体多肽库筛选日本血吸虫表膜抗原的模拟表位 总被引:4,自引:1,他引:4
为探索可用于诊断的模拟表膜抗原。采用纯化的兔抗表膜抗原IgG作探针 ,免疫筛选噬菌体随机十二肽库 ,经 3轮生物淘洗后 ,随机挑选 30个噬菌体克隆 ,用ELISA检测其与筛选抗体的特异性结合 ,选择两个阳性克隆进行DNA序列测定 ,并用斑点ELISA比较检测正常人和日本血吸虫病患者血清各 10份。结果显示 ,随机挑选的 30个克隆中有 9个噬菌体克隆与筛选的抗体有特异性的结合反应。DNA测序结果显示 ,两个阳性噬菌体克隆 (携带的抗原表位 )所演绎的氨基酸序列与GenBank已知的氨基酸序列无同源性。斑点ELISA结果显示两个抗原表位可被血吸虫病患者血清呈特异性识别 相似文献
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日本血吸虫成虫组分抗原的分离及小鼠免疫试验 总被引:2,自引:1,他引:2
目的 分离日本血吸虫可溶性成虫抗原(AWA)中的组分抗原,分析其诱导的抗血吸虫的免疫保护性。方法 电泳层析法分离日本血吸虫AWA中的组分抗原,计算各组分抗原的分子量,并分析其免疫学活性。将各组分抗原分别免疫小鼠,攻击感染日本血吸虫尾蚴,感染后45d剖杀,观察各组分抗原的免疫保护效果。结果 采用电泳层析法分离获得多个组分抗原,选择收集其中4个较纯的组分抗原,分子量分别为52kD、63kD、67kD和74kD;其中63kD和67kD抗原与感染血清有强的反应,而52kD和74kD抗原则反应弱;4种组分抗原均与AWA的免疫血清反应。63kD抗原诱导的免疫保护力水平较52kD、67kD和74kD抗原好。结论 电泳层析法分离的4个血吸虫组分抗原有良好的免疫原性,且63kD抗原有一定的免疫保护性。 相似文献
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目的 :制备日本血吸虫成虫表膜单克隆抗体 (SjAWMMcAb) ,探讨其与吡喹酮在宿主体内的联合杀虫作用。方法 :用SP2 / 0骨髓瘤细胞与日本血吸虫成虫表膜抗原免疫的BALB/c小鼠脾细胞融合 ,经筛选和克隆化后建立分泌日本血吸虫成虫表膜抗原单克隆抗体杂交瘤细胞株 ,通过单层细胞培养法和小鼠体内接种法收集单克隆抗体 ;采用Westernblotting和免疫荧光测定 (IFA)对其进行鉴定 ;小鼠实验观察单抗与吡喹酮的联合杀虫作用。结果 :建立了 3个分泌SjAWMMcAb的细胞株 ,Westernblotting显示 3个McAb可识别 5种不同分子量的蛋白 ,IFA表明 3个McAb均能与血吸虫成虫表膜发生特异性反应 ,3B6和 1C2两株McAbs与吡喹酮联用杀虫率分别可提高 4 1.78%和 2 4 .12 %。结论 :某些SjAWMMcAb与吡喹酮可发挥联合杀虫作用 相似文献
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探讨SiMAg、KLH及rSj32检测日本血吸虫病的特异性和敏感性及疗效考核价值。方法采用ELISA法,用SjMAg、KLH及rSj32及SEA检测治疗前及治疗后不同时期血吸虫病人血清中的特异性IgG、IgG4及正常和肺吸虫、肝吸虫、囊虫病人血清中的非特异抗体。结果SiMAg、KLH及rSJ32的敏感性和特异性与SEA比较差异均无显著性(均P〉0.05) 相似文献
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应用ELIB技术观察旋毛虫肌蚴抗原(TsMLSA)与6种寄生虫病人血清的交叉反应。结果表明:TsMLSA中31~100KDa内的蛋白大部分可被急性血吸虫病人血清所识别,而慢性血吸虫病人血清仅识别其中的44/45,51/53,62/64及100KDa蛋白;小于60KDa者可与丝虫病、钩虫病、肺吸虫、蛔虫病和肝吸虫病人血清呈不同程度的交叉反应,以前三者为最明显;45KDa蛋白可被部分正常人血清识别。提示,旋毛虫肌蚴抗原与多种寄生虫有共享成分,但与血吸虫的交叉可依据4组区带用以鉴别诊断此二种寄生虫病。 相似文献
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中药免疫增强剂用于提高吡喹酮杀血吸虫效果的实验研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的观察两种中药免疫增强剂对吡喹酮杀血吸虫效果的影响.方法将昆明小鼠感染日本血吸虫后,第28天开始用两不同中药制剂(即中药1号和中药2号)分别灌胃C组和D组小鼠,0.5 ml/只/d,连续1周.感染后第35天给予吡喹酮半剂量进行治疗.同时设单用吡喹酮半剂量治疗对照组,吡喹酮全剂量治疗对照组和不用药感染对照组.感染后第49天剖杀小鼠灌注收集虫体.计算杀虫率、观察小鼠肝切片中虫卵肉芽肿大小并测定小鼠血清中特异性抗体动态水平.结果两种中药制剂分别将吡喹酮的杀虫率提高了33.97%和41.18%:虫卵肉芽肿大小与对照组比差异无显著性;在给中药前各组小鼠血清中特异性抗体水平无显著差别,给中药后,中药组小鼠血清中特异性抗体水平逐渐升高,直到给吡喹酮治疗前的抗体水平均显著高于对照组.结论本研究选用的两种中药刺剂均能在不加重虫卵内芽肿病变的同时提高吡喹酮杀日本血吸虫效果,其作用机制可能与中药增强剂促进宿主免疫应答,增强血吸虫特异性抗体生成有关. 相似文献
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张顺科 《国际医学寄生虫病杂志》1996,(6)
一部分红内期的恶性疟原虫可发育为配子体。随着特异蛋白的相继表达,配子体按一定顺序经过5个形态不同的阶段发育成熟。用形态学方法可识别有性阶段之前,两种特异蛋白,即胞质蛋白Pfg27和含虫泡膜蛋白Pfg16,在配子体入侵细胞后约30h即可测出。这些蛋白的表达是性别分化的最早标志。本文分析了有性分化过程中有缺陷的不同恶性疟原虫系,有些含有缺陷的9号染色体,另一些却稳定地携带完整的9号染色体,它们都在有性分化的早期即被阻断,但它们的配子体形成缺陷在遗传及功能上均不相同。 相似文献