T淋巴细胞-E玫瑰花试验检测胸腺肽生物学活性影响因素的探讨

欲完善和改进T细胞-E玫瑰花试验的检测条件,提高制品生物学活性检测的准确性。探究了E玫瑰花试验的影响因素。观察比较不同的脱E受体法、淋巴细胞和绵羊红细胞的比例、Hank s液的pH、离心速度对形成E玫瑰花结花率的影响以及染色和计数时间对E玫瑰花结花率观察的影响。观察不同来源的淋巴细胞与不同种红细胞形成E玫瑰花的相关情况。实验显示,脱E方法的优化更能反映胸腺肽制品的生物学活性,E玫瑰花的结花率明显优于常规脱E法。Hank s液的pH在7.0~7.5之间结花率为最佳。淋巴细胞和绵羊红细胞的最适比例为1∶20。离心速度以800 r/min为宜。染色后4℃放置,16~20 h内观察为结果的最佳观察时间。豚鼠胸腺与家兔红细胞以及小牛胸腺与绵羊红细胞均具有相关性形成E玫瑰花。结果证明,优化试验条件有利于提高制品生物学活性的准确率。     

甲肝和水痘病毒在同一细胞中增殖动态的研究

目的 研究甲肝病毒(HAV)和水痘病毒(VZV)混合感染人胚肺二倍体细胞(2BS)病毒增殖动态。方法 将HAV和VZV间隔3周感染同一2BS细胞，同时HAV和VZV分别同步单独感染同一批次的2BS细胞。收获不同阶段的细胞培养物，电镜观察HAV和VZV在细胞内的超微结构和增殖数量；同时检测两种病毒的滴度水平。结果 在同一2BS细胞中观察到HAV和VZV的完整病毒形态，但VZV与单独感染的病毒达到增殖高峰期时间相比推迟4d左右，增殖达到高峰期时病毒滴度略低，但无显著性差异。结论 HAV和VZV可在同一2BS细胞中增殖，无明显干扰现象。     

抗狂犬病免疫核糖核酸的分离纯化及部分理化性质和生物学活性初探

目的 探索一种抗狂犬病免疫核糖核酸(iRNA)的制备方法 ,为狂犬病病毒暴露后的免疫治疗开辟途径.方法 用狂犬病病毒免疫马,从抗体阳性血清的马匹中分离肝脏,依次采用十二烷基磺酸钠、苯酚、三氯甲烷、乙二醇单甲醚、十六烷基三甲基溴化铵、乙醇等提取总RNA.结果 提纯品经理化性质检测,得到的iRNA占肝脏总重的0.15%,其中DNA含量为2.86%,蛋白质含量为1.26%.最大吸收峰位于258 nm;A_(258)/A_(280)为2.0;RNA鉴别试验呈阳性反应.用高效液相色谱法测定,相对分子质量为13.7×10~3;增色效应50.67%.生物学活性测定结果 显示,白细胞黏附抑制率为41.73%.动物保护率为50%,生命延长率为31.62%.结论 实验提取的抗狂犬病iRNA,经用国家颁发的iRNA质控标准对照检测,结果 相同.为狂犬病治疗药物的研究奠定了实验室基础.     

水痘病毒在感染HAV2BS细胞中形态变化

目的分析水痘病毒(VZV)在感染甲肝病毒(HAV)的二倍体成纤维细胞(2BS细胞)中的形态发生过程.方法将已感染甲肝病毒21 d后的2BS细胞感染水痘病毒(实验组),分别于不同时间收获细胞,用超薄切片和负染的方法制备电镜样品;同时以单独感染HAV、VZV的2BS细胞做对照,进行电镜观察.结果实验组2BS细胞中可见甲肝病毒和不同形态的水痘病毒.结论VZV可以再度感染已被HAV感染的2BS细胞并有完整的子代病毒产生;VZV在已感染HAV的2BS细胞中的增殖受到甲肝病毒干扰,增殖数量少于VZV单独感染2BS细胞中的子代病毒量,并且复制周期延长.