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促肾上腺皮质激素单克隆抗体的筛选和鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
目的制备促肾上腺皮质激素 ( ACTH)单克隆抗体 ,拟建立高灵敏度 ACTH- IRMA或 EL ISA。方法 ACTH1 - 1 3、ACTH1 - 2 8、ACTH 1 - 39和 ACTH1 8- 39分别与牛血清白蛋白偶联制备免疫原 ,在背部皮下和腹腔注射免疫 BAL B/ c鼠。按常规方法进行细胞融合 ,以 RIA法检测培养上清液 ,阳性孔经亚克隆 ,获得 2株分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株 ;瘤细胞种于预致敏的BAL B/ c鼠腹腔 ,批量生产单抗性腹水 ;琼脂扩散法鉴定抗体类型 ;利用标准曲线的参数计算单抗的亲合常数 ;亲合纯化单抗并进行抗体固化试验。结果从 ACTH1 - 2 8免疫鼠获得单抗株为 5 G2 ,从 ACTH1 - 1 3免疫鼠获得单抗株为 D3 ;单抗腹水 5 0 %结合率时腹水最终稀释度分别为 5× 10 3和 2× 10 3;抗体类型均为 Ig G1/λ;5 G2和 D3亲合常数分别为 5 .1× 10 9L M- 1 和 4 .9× 10 7L M- 1 ;抗体包被实验显示 5 G2和 D3的固化抗体量分别为 1.4μg和 8.8μg时结合率达到饱和。结论 5 G2和 D3可以用于构建灵敏的 ACTH- IRMA或 EL ISA。 相似文献
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1 材料和方法1 1 高压液相法全自动糖化血红蛋白 (HbA1c)分析仪(Variant)和试剂及毛细管采样盒由Bio Rad公司提供。1 2 方法 按正规与非正规采血法在同一个体同时采指血和静脉抗凝血。当日用毛细管从已抽好的静脉血样中吸取5 μl。72例静脉血样于采样后 1d内检测 ,其中 6 6例样本在4℃冰箱放置 3d、7d、8和 10d后重复检测。毛细管血样在 18℃、2 2℃二个室温分别放置 2 4h后检测 ,其中 5例样本室温放置 14d后重复检测。2 结果 正规方法采样和检测的指端毛细管血与静脉血的HbA1c结果均数t检验无显著意义 … 相似文献
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中老年人群尿白蛋白与肌酐比值的性别差异研究 总被引:1,自引:0,他引:1
尿自蛋白排出量是诊断糖尿病肾病最重要的指标,为了采取标本方便,采用次尿(即晨尿或随机一次尿)测定尿白蛋白与肌酐比值(ACR)来判断其排出量。2005年IDF全球指南和亚太地区IDF指南均提出男女之间有差别的ACR标准,分别为男性≥2.5mg/mmol(22mg/g),女性≥3.5mg/mmol(31mg/g)。我国人群ACR的性别特异性切点的研究目前尚无报道。我们比较了非糖尿病人群ACR测定的结果,为修改我国目前采用的2005年微量白蛋白尿(MAU)诊断标准ACR切点提供数据。 相似文献
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目的评价糖调节受损(IGR)不同组分的胰岛素抵抗(IR)和胰岛β细胞功能状况。方法OGTT筛查北京地区无DM史中老年人群,据2003年ADA标准,分为正常糖耐量(NGT)组、空腹血糖受损(IFG)组、糖耐量减低(IGT)组、及IFG合并IGT(IFG+IGT)组,检测各组胰岛素抵抗指数(HO-MA-IR)、胰岛素敏感指数(ISI-Stumvoll)、β细胞功能指数(HBCI/IR)及第一、二时相胰岛素分泌指数。结果(1)IFG组:HOMA-IR显著高于NGT组和IGT组,ISI-Stumvoll高于IGT组(P均〈0.05),HBCI/IR显著低于NGT组和IGT组(P〈0.05);(2)IGT组:HOMA-IR和HBCI/IR均位于NGT组和IFG组之间,ISI-Stumvoll、第一时相和第二时相胰岛素分泌指数显著低于NGT组和IFG组(P均〈0.05);(3)IFG+IGT组:HOMA-IR高于NGT组、IFG组和IGT组,ISI-Stumvoll显著低于NGT组和IFG组(P均〈0.05),HBCI/IR显著低于NGT组和IGT组(P均〈0.05);(4)在非糖尿病人群中,随着FPG及2hPG的升高,HOMA-IR有递增趋势,ISI-Stumvoll、第一时相和第二时相胰岛素分泌指数有递减趋势(P均〈0.05)。结论IFG主要是肝脏IR和基础状态时的胰岛β细胞分泌功能受损。IGT的肌肉IR较重,其糖负荷后的胰岛β细胞分泌功能受损较重。在非糖尿病人群,FPG和2hPG的升高与IR呈正相关,与胰岛β细胞功能呈负相关。 相似文献
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糖尿病前期人群综合强化干预两年后的转归及影响因素 总被引:5,自引:0,他引:5
目的 采用2003年美国糖尿病学会(ADA)标准分析综合强化干预2年后糖尿病前期人群的转归及影响因素.方法 将北京地区中老年人群流行病学调奁筛查出的连续2年均为糖尿病前期的患者,随机分为常规治疗组(对照组)和综合强化治疗组(强化组).对照组仅给予生活方式指导,强化组在生活方式干预同时分别给予二甲双胍或阿卡波糖,并且建议根据病情选用降压及调脂药物,服用阿司匹林.随访2年,分析转归及影响因素.结果 2年后综合强化干预组的血糖、血压、体重指数、甘油三酯达标率显著高于对照组(P<0.05).强化组无1例进展为糖尿病,而对照组共8例(9.3%)进展为糖尿病;强化组逆转为正常糖耐量(NGT)的比例稍高于对照组(29.5% vs 22.1%,P>0.05).Logistic逐步回归分析,发现腰围及收缩压的增加与糖尿病的发生呈独立正相关关系,而胰岛功能的改善与糖尿病的发生呈独立负相关关系.结论 综合强化干预可显著降低糖尿病前期人群的糖尿病发生率,增加NGT的逆转率.腰围及收缩压的增加、胰岛β细胞功能的衰退是糖尿病前期人群进展为糖尿病的重要影响因素. 相似文献
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探讨脂肪酸对人卵巢颗粒细胞生长的影响。不同剂量的游离脂肪酸处理颗粒细胞1-3天,用台盼蓝排除法对活细胞进行计数。用染色体DNA断裂和细胞形态学改变确定细胞凋亡。检测脂肪酸代谢产物酰基辅酶A是否直接引起细胞凋亡。测定与细胞凋亡相关的Bcl-2和Bax蛋白质表达水平。结果表明,饱和脂肪酸通过其代谢产物酰基辅酶A呈剂量依赖性的引起颗粒细胞凋亡,并导致Bcl-2水平下降和Bax水平升高。说明饱和脂肪酸对卵巢颗粒细胞有直接致凋亡作用。提示,女性肥胖和胰岛素抵抗患者出现的性功能障碍可能与饱和脂肪酸水平增高有关。 相似文献
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ACTH是垂体分泌的重要激素之一 ,测定血浆ACTH对下丘脑 垂体 肾上腺轴功能的评价具有重要意义。制备ACTH单克隆抗体 ,以期建立ACTH IRMA方法。ACTH或其片段与BSA经碳化二亚胺偶联剂联接后制备免疫原 ,初次免疫为完全福氏佐剂乳化后在背部皮下多点注射 ,ACTH剂量约 4 0 μg ,以后每隔 4w以不完全福氏佐剂乳化后在背部或腹腔交替注射 4~ 6次 ,剂量减半。融合前 3d每天以无佐剂的ACTH联接物行腹腔注射 ,总剂量为 60μg。按常规方法进行细胞融合 ,每周换液 2至 3次。阳性克隆的筛选 :培养上清液抗体… 相似文献