表皮生长因子受体Ⅲ型突变体(EGFRvⅢ)单链抗体亲和力检测的间接ELISA的建立及优化

目的建立检测表皮生长因子受体变体Ⅲ(EGFRvⅢ)单链抗体PD0721亲和力检测的ELISA,并且对实验条件进行优化。方法利用本课题组制备的单链抗体PD0721,建立检测PD0721单链抗体亲和力的间接ELISA,并采用棋盘滴定法对实验条件中的抗体抗原浓度、二抗浓度、包被条件等方面进行优化,对本方法的灵敏度及精密度进行考察。结果使用PBS稀释抗原至1.25 mg/L于4℃包被12 h,加入120 ng/mL PD0721单链抗体以及1∶8000的酶标抗体为最佳检测结果。优化后的结果,在PD0721单链抗体浓度为15 ng/mL~480 ng/mL范围内回归模型拟合效果良好,最低检测限为7.5 ng/mL。组内差异系数为0.11%~0.99%,组间差异系数为0.68%~3.15%。结论建立了能准确、稳定检测PD0721单链抗体亲和力的间接ELISA。     

紫金龙氯仿-甲醇组分对脂多糖诱导RAW264.7细胞炎症的抑制作用

目的探讨紫金龙氯仿-甲醇组分对脂多糖诱导RAW264. 7细胞炎症的抑制作用。方法脂多糖刺激RAW264. 7细胞建立体外炎症模型后,加入不同质量浓度(50、100、200、400 mg/L)紫金龙氯仿-甲醇组分,ELISA法或比色法检测白介素-6 (IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)含有量,Western blot法测定诱导型一氧化氮合酶(i NOS)、环氧化酶-2 (COX-2)蛋白表达,以及核转录因子κ转抑制蛋白α(IκBα)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38)、c-Jun氨基端激酶(JNK)、细胞外调节蛋白激酶1/2(Erk1/2)磷酸化水平。结果紫金龙氯仿-甲醇组分可显著抑制TNF-α、IL-6、IL-1β、NO、PGE2释放(P 0. 05,P 0. 01),下调i NOS、COX-2蛋白水平(P 0. 01),降低p38、JNK、Erk1/2、IκBα磷酸化水平(P 0. 05,P 0. 01)。结论紫金龙氯仿-甲醇组分可有效抑制脂多糖诱导RAW264. 7细胞炎症,其机制可能与抑制NF-κB、MAPKs信号通路激活、减少炎症因子释放有关。     

基于PBL的生物技术制药实验教学改革

生物技术制药作为一门新兴的交叉学科,其涉及基因工程技术、细胞工程技术、微生物工程技术、酶工程技术、蛋白质工程技术和分子生物学技术等来研究和开发药物,以此来诊断、治疗和预防疾病的发生。因此,生物技术制药实验课程要求学生具备扎实的基础理论知识和熟练的实验操作技能。PBL教学模式作为当前流行的教学模式,重在发展学生发现问题解决问题的能力。笔者尝试将PBL教学模式引入生物技术制药实验课程的教学当中,并且对生物制药实验课程的教学内容和教学方法进行适当改革,为探索更有效的培养高素质药学人才的教学方法提供可借鉴的经验。     

2017-2019年北京市顺义区中小学校流行性感冒疫情特征分析

目的 对2017-2019年北京市顺义区中小学校流行性感冒(流感)流行季(10月1日-次年4月30日)流感疫情的特征进行分析,探讨流感疫情的影响因素.方法 收集北京市顺义区2017年10月-2018年4月、2018年10月-2019年4月两个流感流行季的学校疫情资料,对疫情的规模、时间、病原体以及防控措施进行描述和分析...