雄激素对快速老化小鼠SAMP8海马神经元突触蛋白的快速影响

目的:研究去势以及去势后雄激素补充治疗对快速老化小鼠(SAMP8)海马神经元突触蛋白的快速影响。方法:7月龄健康雄性SAMP8小鼠,随机分为假手术对照组(对照组)、去势组、去势+睾酮补充治疗组(T组)和去势+双氢睾酮补充治疗组(DHT组)。通过免疫组织化学显色和免疫印迹研究去势及雄激素补充治疗对其海马突触蛋白SNAP25、Syt1、SYN、PSDD95、NR1和Drebrin表达的快速影响。结果:免疫组织化学显色结果显示,与SAMP8小鼠假手术组相比,去势组CA1区和CA3区各突触蛋白的OD值均明显降低。T组和DHT组CA1区和CA3区各突触蛋白的OD值较去势组明显增加。免疫印迹结果显示,与SAMP8小鼠假手术组相比,去势组海马结构各突触蛋白条带光密度的相对值均明显降低。T组和DHT组海马结构各突触蛋白条带光密度的相对值较去势组明显增加。结论:SAMP8小鼠去势后,雄激素缺乏导致海马结构内突触蛋白表达减少;去势后雄激素补充治疗能快速增加SAMP8小鼠海马结构内突触蛋白的表达。     

雄激素非基因组效应相关的G蛋白偶联受体

<正>雄激素主要是由睾丸间质细胞分泌的性类固醇激素,其在蛋白质合成、性腺发育及男性第二性征的维持等方面起到十分重要的作用。经典的雄激素基因组效应由特异的胞内受体介导。近来研究显示,雄激素可以与细胞膜上的G蛋白偶联受体(G protein coupled receptors,GPCRs)相互作用,影响细胞质内的信号转导分子,进而产生相应的快速作用,并且某些性类固醇激素的细胞膜特异性GPCRs已经得到证实,如雌二醇的特异性GPCRs为GPER1、孕激素的特异性GPCRs为mPR等。因此有     

利于树突棘形态学观察的原代海马神经元转染方法的优化

目的:为有助于观察树突棘的变化,探索出较为理想的原代大鼠海马神经元转染方法。方法:应用Lipofectamine2000和慢病毒2种转染方法对体外培养8d的SD胎鼠海马神经元进行绿色荧光蛋白(GFP)质粒转染,观察海马神经元转染效率和荧光表达情况,并用台盼蓝染色检测神经元的存活率;采用优选出的转染方法对体外培养8d的海马神经元进行转染,观察转染后培养至10、15、20d和25d不同时间海马神经元树突棘的生长发育情况;观察8、12d和16d不同时间转染对海马神经元树突棘形态学观察的影响。结果:对于树突棘形态学观察而言,Lipofectamine 2000转染效果显得更为优越;海马神经元培养至20d时,树突棘发育较成熟;12d时转染是进行树突棘形态学观察转染的最佳时间。结论:用Lipofectamine 2000转染GFP方法对培养12d的神经元进行转染,培养至20d时树突棘形态学观察效果良好。     

雌二醇经雌激素受体调控分拣蛋白相关受体A对小鼠海马神经元树突棘密度和突触蛋白表达的影响

目的 探讨雌二醇(E₂)调控分拣蛋白相关受体A(SorLA)表达对小鼠海马神经元树突棘密度和突触蛋白表达的影响及机制。方法 32只C57BL/6雌性小鼠随机分为假手术(sham)组、卵巢切除(OVX)组、卵巢切除+E₂组(OVX+E₂)组、卵巢切除+氟维司琼(Fu)+E₂组(OVX+Fu+E₂)组，通过Western blotting和免疫组织化学染色检测小鼠海马CA1区SorLA表达；40只C57BL/6雌性小鼠随机分为假手术+空白病毒(sham+NC-sgRNA)组、卵巢切除+空白病毒(OVX+NC-sgRNA)组、卵巢切除+空白病毒+E₂(OVX+NC-sgRNA+E₂)组、卵巢切除+SorLA敲降病毒+E₂组(OVX+Sorl1-sgRNA+E₂)组，通过高尔基染色检测小鼠海马CA1区神经元树突棘密度；通过Western blotting和免疫组织化学染色检测小鼠海马CA1区突触后致...