重组鸡Igλ轻链真核细胞分泌表达及其单克隆抗体的制备与鉴定

目的: 构建重组载体pcDNA-λ并在COS7细胞分泌表达鸡Igλ轻链, 制备抗鸡Igλ轻链的单克隆抗体(mAb).方法: PCR扩增带有信号肽的鸡Igλ轻链基因, 限制性酶切消化后, 定向克隆于真核表达载体pcDNA3, 构建具有6×His标签、分泌表达的重组载体pcDNA-λ.重组载体转染COS7细胞后, SDS-PAGE分析真核表达载体pcDNA-λ在COS7细胞的分泌表达.用2×106个雏鸡B淋巴细胞免疫BALB/c小鼠, 取脾细胞与骨髓瘤细胞融合, 分别采用细胞免疫荧光和间接ELISA筛选阳性杂交瘤克隆.结果: 成功构建分泌表达鸡Igλ轻链的重组载体, SDS-PAGE分析表明在COS7细胞上清有目的蛋白的分泌表达.杂交瘤细胞经筛选与鉴定, 获得2株分泌抗鸡Igλ轻链mAb的杂交瘤细胞株, Western blot检测到该mAb对重组鸡Igλ轻链的反应性.结论: 构建了重组表达载体pcDNA-λ并在COS7细胞上清分泌表达了重组鸡Igλ轻链.并用淋巴细胞杂交瘤技术成功筛选出抗鸡Igλ轻链mAb.为深入研究鸡Igλ轻链的结构与功能奠定了基础.     

非Q波心肌梗死病人冠脉造影及临床特点分析

目的 探讨非Q波心肌梗死病人冠脉造影及临床特点分析.方法 选择我院1999年1月-2004年12月收治的心肌梗死病人175例.按心电图有无病理性Q波分为Q波心肌梗死(QMI)和非Q波心肌梗死(NQMI).非Q波心肌梗死病人53例,Q波心肌梗死病人122例,对两组病人的性别、年龄、既往心绞痛病史、嗜烟史及合并糖尿病、血压(收缩压、舒张压)血糖、血脂、血清心肌酶、心律失常及冠状动脉造影术等资料进行比较.结果 非Q波心肌梗死组女性、既往心绞痛史、梗死后心绞痛、再梗死、冠脉侧支循环开放、冠脉弥漫型病变与Q波心肌梗死组两者相比较有统计学意义(P<0.05).而非Q波心肌梗死组血清磷酸激酶(CPK)峰值、肌钙蛋白T(cTnT)峰值(1 046 U/L±518 U/L,2.9 ng/mL±1.2 ng/mL)、冠脉单支病变、冠脉完全闭塞率均低于Q波心肌梗死组.结论 NQMI 病人既往心绞痛史、梗死后心绞痛、再梗死率高,而院内恶性心律失常发生率低.冠脉单支病变、冠脉完全闭塞率低,而冠脉弥漫型病变、侧支循环的开放率均高.血清CPK酶峰值、cTnT 峰值低.     

旋毛虫排泄分泌抗原的成分及应用价值

旋毛虫病是一种重要的人畜共患寄生虫病，长期以来用于免疫诊断和免疫预防的旋毛虫抗原，尤其是排泄分泌（ES）抗原引起了国内外众多学者的关注。本文综述了近年来旋毛虫ES抗原有效成分的研究及其在免疫诊断和免疫预防方面的应用价值，并且提出应用DNA重组技术在体外大量表达ES抗原和利用多肽合成技术在体外大量合成抗原用于免疫诊断和免疫预防将是今后的研究方向。     

低血糖生成指数食物InZone对代谢综合征者代谢性指标的影响

目的:观察低血糖生成指数营养补充剂InZone对代谢综合征者血糖、血脂指标的作用.方法:31例处于代谢综合征前期者,对其饮食和生活习惯不做任何干预,于饭前加服食品补充剂InZone.干预84 d,对受试者的血脂指标进行观测.分别于0 d、28 d、84 d测量其血脂的变化.结果:TC、HDL、LDL等血脂指标均得到改善(P＞0.05).结论:采用低血糖生成指数食品补充剂InZone与正常膳食混合后,可降低饮食的GI值、必需营养素得以且食物中营养素的配比合理,使人体血糖应答保持较低的水平,从而诱导较低的胰岛素水平,达到改善人体代谢,调节人体脂质代谢的作用.     

炎症对肿瘤恶性生物学行为的影响

免疫系统一直被认为在延缓肿瘤生长、导致肿瘤消退方面起着重要的作用，如肿瘤在免疫功能低下的新生儿和老年人更为常见；肿瘤好发于免疫抑制的个体；肿瘤可出现自行消退等。然而，近年来一些重大的发现却使该传统观点有所改变：参与炎症反应、促进伤口愈合的免疫细胞竟然与肿瘤的恶化息息相关，     

蝎毒素对人T淋巴细胞系Jurkat E6-1细胞增殖的影响

目的 探讨蝎毒素BmK IA对人T淋巴细胞系Jurkat E6-1细胞增殖的影响并与IL-2对Jurkat E6-1细胞的作用进行对比.方法 不同浓度的BmK IA、IL-2分别作用48h,采用MTT法检测BmK IA、IL-2对细胞增殖的影响.结果 在一定范围内,随着BmKIA浓度的增加,细胞增殖率相应增加,当BmK IA浓度增加到10μg /L时,细胞的增殖率达峰值.同时,与IL-2相比,BmK IA具有用量微的特点.结论 BmK IA可促进T细胞的增殖,对免疫系统有一定的增强作用.     

CD14抗原的结构与功能

ＣＤ１４ 主要存在于巨噬细胞、单核细胞和中性白细胞表面，它是一种分子量为５３－５５ＫＤ的糖蛋白，以糖基磷脂酰肌醇（ＧＰＩ）的形式锚在细胞膜上，为脂多糖／脂多糖结合蛋白复合物的受体。ＣＤ１４ 与配体结合后可触发机体的一系列免疫应答和免疫病理过程，在由革兰氏阴性菌引起的疾病的发生、发展和转归方面起着重要的作用。     

高亲和力抗IBDV单克隆抗体的产生与免疫学鉴定

目的：生产高亲和力的抗ＩＢＤＶ不同抗原决定簇的单克隆抗体,为ＩＢＤ的快速检测准备试剂。方法：用ＩＢＤＶ抗原诱导Ｂａｌｂ／ｃ小鼠产生最强最适当的反应,将免疫脾细胞与ＮＳＯ瘤细胞融合,通过对大量的杂交细胞培养上清进行检测和鉴定,筛选出分泌高亲和力单克隆抗体的杂交瘤细胞。结果：获得分泌高亲和力单克隆抗体的杂交瘤２１株,其中４株ＹＮＺ－１、ＹＮＺ－１２、ＹＮＺ－１８和ＹＮＺ－２６的间接ＥＬＩＳＡ效价分别为     

利用不同电泳技术对东亚蝎毒素ITX 蛋白组分分离的研究

目的 :初步建立蝎毒素ITX(Immunotoxin)蛋白组分的电泳分离方法和蛋白质组表达谱。 方法 :阴极电泳(T=18%,C=6%)对蝎毒进行分离,Bio-Rad Quantity-one电泳软件分析条带;双向电泳技术:第一向为固相pH梯度等电聚焦,第二向电泳为垂直平板SDS-PAGE(T=18%)。在以上过程中分别对上样方式、等电聚焦程序等条件进行优化控制,利用PDQ7.1软件分析获得二维凝胶图像。 结果 :阴极电泳图谱显示蝎毒素ITX由7个蛋白组分组成;二维凝胶图谱显示蝎毒素ITX包含相对分子质量相同(约为5.8×10³)而等电点不同9种蛋白组分,其中酸性蛋白质4种,碱性蛋白质5种。 结论 :通过各种条件的优化,初步建立了ITX的阴极电泳和双向电泳方法,获得了分辨率和重复性较好的阴极电泳图谱和二维凝胶图谱。     

安福雷颗粒剂对奶牛乳房炎主要致病菌的体外抑菌试验

目的：观察安福雷颗粒剂体外抑菌效果,为中药防治乳房炎提供实验依据。方法：采用琼脂平板扩散法（牛津杯法）,选用安福雷颗粒剂对奶牛乳房炎4种主要致病菌进行体外抑菌试验。结果：安福雷颗粒剂抑菌试验金黄色葡萄球菌的抑菌环直径为21.00mm,表皮葡萄球菌的抑菌环直径为26.52mm,停乳链球菌的抑菌环直径为17.68mm,大肠杆菌的抑菌环直径为11.31mm。结论：安福雷颗粒剂对奶牛乳房炎致病菌有较好的体外抑菌效果,尤其是革兰氏阳性菌,为中草药防治奶牛乳房炎提供了实验依据。