不同葡萄糖培养条件对L6骨骼肌细胞中活性氧的生成作用

背景:活性氧在不同葡萄糖培养条件下的生成状况是研究2型糖尿病发病机制的基础.目的:观察不同浓度葡萄糖培养条件下,细胞内活性氧的生成情况.方法:取体外培养的L6骨骼肌细胞和诱导分化的肌管细胞,分别用含有3,5.5,25 mmol/L葡萄糖的DMEM培养液培养,检测细胞内活性氧的生成情况.结果与结论:随着高糖培养时间的延长,细胞内活性氧生成有增加的趋势,其中25 mmol/L葡萄糖培养细胞4 d的活性氧生成明显高于5.5 mmol/L葡萄糖培养细胞的水平;3,5.5 mmol/L葡萄糖培养对细胞内活性氧生成无显著影响.诱导肌管细胞较成肌细胞在高糖培养条件下更易产生活性氧.说明体外培养细胞葡萄糖浓度、培养时间和培养细胞分化程度是影响细胞内活性氧生成的因素,可用于模拟体内高糖损伤的积累效应.     

不同饲料配方及喂饲方法制备不同胰岛素敏感性大鼠模型的研究

目的使用不同饲料配方及喂饲方法制备具有不同胰岛素敏感性（IS）的大鼠模型方法132只雄性SD大鼠分为3组（对照组、肥胖组、限食组）,使用两种饲料（基础与高脂高能）及两种喂饲方式（自由与限食）喂饲6个月.各组大鼠在喂饲至2个月、4个月、6个月时采用正常血糖、高血浆胰岛素钳夹技术检测IS并进行口服糖耐量试验;同时检测大鼠体重、内脏体脂重量及空腹血浆胰岛素（FIns）水平.结果在此喂饲条件下,各组大鼠IS由高到低依次为：限食组＞对照组＞肥胖组.肥胖组大鼠喂饲2个月时就已出现IS明显减退（55%）和糖耐量受损,并随喂饲时间延长而加重;对照组大鼠喂饲2个月、4个月时IS与糖耐量结果正常,6个月时糖耐量与IS有所减退;限食组大鼠始终保持胰岛素高敏状态,实验结束时,该组大鼠IS分别为对照组和肥胖组的5倍与10倍.三组大鼠的体重、体内脂肪含量及血浆胰岛素水平均有相应的变化.结论本实验采用的不同饲料及喂饲方式可以成功地制备稳定可靠的、具有不同IS的大鼠模型.     

左侧乳腺癌保乳术后放疗采用深吸气屏气技术肺部剂量Meta分析

目的:通过Meta分析探究左侧乳腺癌保乳术后放疗使用深吸气屏气技术对左肺剂量的影响。方法:2020年11月01日前检索PubMed、EMBASE、Web of Science寻找符合纳入标准的期刊文章,评价指标为左肺V20及左肺Dmean,通过Stata 12.0对提取的研究数据行Meta分析。结果:纳入20篇文献,共663例患者,异质性分析结果I2 检验(I-squared=69.5%)及Q检验(P=0.000)提示纳入20项研究间异质性较大。亚组分析结果:40例及以上组I2检验（I-squared=0%）及Q检验(P=0.909)提示各研究间无异质性;40例以下组I2检验（I-squared=76.8%）及Q检验(P=0.000) 提示异质性显著,说明异质性来源可能为样本量过小。最终对40例及以上组7项研究进行效应量合并,左肺V20在DIBH与自由呼吸（FB）两组间差异具有统计学意义［SMD=-0.28,95%CI（-0.41,-0.15）,Z=4.16,P=0.000］;左肺Dmean在DIBH与FB两组间差异具有统计学意义［SMD=-0.20,95%CI（-0.33,-0.07）,Z=2.96,P=0.003］。Egger回归检验结果提示本研究不存在明显的发表偏倚V20（P=0.971>0.05）及Dmean（P=0.666>0.05）。结论:左侧乳腺癌保乳术后放疗使用DIBH技术可以降低肺部照射剂量,从而减少放射性肺炎的发生概率,具有一定的临床价值。     

四种多肽生长因子对雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC-3M生长的影响

目的 观察多肽生长因子中的转化生长因子β1（TGF－β1）、表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维生长因子（bFGF）、角化生长因子（KGF）对雄激素非依赖性前列腺癌细胞系PC－3M生长的影响。方法 体外培养前列腺癌细胞系PC－3M,分别加入TGF－β1、EGF、bFGF、KGF,每种生长因子采用1、5、10、50ng/ml4种浓度,采用Brdu掺入法测定细胞生长水平。结果 培养72h后,对照组PC－3M细胞的吸光度[A,旧称光密度（OD）]值为0．759,4种生长因子在不同浓度时对PC－3M细胞的生长皆有抑制作用,而且随浓度的增加抑制作用逐渐增强。4种因子在50ng/ml时,A值分别为0．400（TGF－β1）、0455（EGF）、0．532（bFGF)、0．491（KGF）,与对照组比较,差异均具有显著性。另外,当1ng/ml EGF分别与0．5ng/ml或5ng/ml TGF-β1同时加入培养基时,A值分别为0．522和0．299。结论 在体外培养条件下,TGF－β1、EGF、bFGF及KGF均依浓度效应关系抑制PC－3M细胞的生长,TGF－β1与EGF对PC－3M细胞生长的抑制作用不存在交互作用。     

热量限制对人二倍体成纤维细胞衰老相关基因表达的影响

目的观察热量限制对人二倍体成纤维细胞IMR-90衰老相关基因表达的影响。方法应用RT-PCR和Western blot的方法，对含低浓度（3．0mmol／L）、高浓度（22．5mmol／L）葡萄糖和正常对照组（含5．0mmol／L葡萄糖）培养条件下的IMR-90细胞衰老相关基因p16、p21和p53的mRNA和蛋白表达水平进行分析。结果与对照组和高糖培养条件下的早期和晚期细胞相比较，低浓度葡萄糖培养条件下的早期和晚期细胞p16和p21在mRNA水平均显著下降（P〈0．05）；低浓度葡萄糖组、对照组和高浓度葡萄糖培养组晚期细胞p16蛋白水平分别为4．2、7．4、9．7，比各自早期细胞表达（0．6、1．0、1．8）增加5～7倍；低浓度葡萄糖组，对照组和高浓度葡萄糖培养早期细胞和低糖培养晚期细胞p21蛋白水平差异无统计学意义，分别为1．1、1．0、1．3、0．9，但与对照组和高糖培养晚期细胞p21蛋白水平（3．1、4．2）相比较则降低3～4倍；各组培养条件下的早期和晚期细胞中p53表达差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论各组晚期细胞比各自早期细胞p16基因表达增高；对照组和高糖培养条件下的晚期细胞比各自早期细胞p21基因表达增高；低浓度葡萄糖培养延缓IMR-90细胞衰老并伴有p16和p21基因表达下调；p53基因可能不是IMR-90细胞复制衰老主要调节因子。     

不同葡萄糖培养条件对L6骨骼肌细胞中活性氧的生成作用

背景：活性氧在不同葡萄糖培养条件下的生成状况是研究2型糖尿病发病机制的基础。目的：观察不同浓度葡萄糖培养条件下,细胞内活性氧的生成情况。方法：取体外培养的L6骨骼肌细胞和诱导分化的肌管细胞,分别用含有3,5.5,25mmol/L葡萄糖的DMEM培养液培养,检测细胞内活性氧的生成情况。结果与结论：随着高糖培养时间的延长,细胞内活性氧生成有增加的趋势,其中25mmol/L葡萄糖培养细胞4d的活性氧生成明显高于5.5mmol/L葡萄糖培养细胞的水平;3,5.5mmol/L葡萄糖培养对细胞内活性氧生成无显著影响。诱导肌管细胞较成肌细胞在高糖培养条件下更易产生活性氧。说明体外培养细胞葡萄糖浓度、培养时间和培养细胞分化程度是影响细胞内活性氧生成的因素,可用于模拟体内高糖损伤的积累效应。     

不同葡萄糖培养条件对L6骨骼肌细胞中活性氧的生成作用*☆

背景：活性氧在不同葡萄糖培养条件下的生成状况是研究2型糖尿病发病机制的基础。 目的：观察不同浓度葡萄糖培养条件下,细胞内活性氧的生成情况。 方法：取体外培养的L6骨骼肌细胞和诱导分化的肌管细胞,分别用含有3,5.5,25 mmol/L葡萄糖的DMEM培养液培养,检测细胞内活性氧的生成情况。 结果与结论：随着高糖培养时间的延长,细胞内活性氧生成有增加的趋势,其中25 mmol/L葡萄糖培养细胞4 d的活性氧生成明显高于5.5 mmol/L葡萄糖培养细胞的水平;3,5.5 mmol/L葡萄糖培养对细胞内活性氧生成无显著影响。诱导肌管细胞较成肌细胞在高糖培养条件下更易产生活性氧。说明体外培养细胞葡萄糖浓度、培养时间和培养细胞分化程度是影响细胞内活性氧生成的因素,可用于模拟体内高糖损伤的积累效应。     

美国糖尿病预防计划

美国糖尿病预防计划的研究目的是评价强化生活方式改变及服用二甲双胍这两种干预措施对于预防2型糖尿病发生的有效性和安全性。共征集3234名志愿者，随机分为强化生活方式改变组、二甲双胍组、安慰剂组。强化生活方式改变组、二甲双胍组糖尿病发病率分别比安慰剂组下降58％和31％，强化生活方式改变组比二甲双胍组下降39％。结果表明膳食与运动干预可有效地延缓2型糖尿病的发生，二甲双胍不仅可以治疗糖尿病，而且可以预防2型糖尿病的发生。     

不同葡萄糖培养条件对L6骨骼肌细胞中活性氧的生成作用

背景：活性氧在不同葡萄糖培养条件下的生成状况是研究2型糖尿病发病机制的基础。 目的：观察不同浓度葡萄糖培养条件下,细胞内活性氧的生成情况。 方法：取体外培养的L6骨骼肌细胞和诱导分化的肌管细胞,分别用含有3,5.5,25 mmol/L葡萄糖的DMEM培养液培养,检测细胞内活性氧的生成情况。 结果与结论：随着高糖培养时间的延长,细胞内活性氧生成有增加的趋势,其中25 mmol/L葡萄糖培养细胞4 d的活性氧生成明显高于5.5 mmol/L葡萄糖培养细胞的水平;3,5.5 mmol/L葡萄糖培养对细胞内活性氧生成无显著影响。诱导肌管细胞较成肌细胞在高糖培养条件下更易产生活性氧。说明体外培养细胞葡萄糖浓度、培养时间和培养细胞分化程度是影响细胞内活性氧生成的因素,可用于模拟体内高糖损伤的积累效应。     

一种高效制备人β2微球蛋白标准物质的方法和应用

目的构建重组人β2微球蛋白表达体系,高效快速获取β2微球蛋白,为临床实验室检测参考物质的制备奠定基础。方法优化人β2微球蛋白序列,人工合成优化序列片段并与麦芽糖结合蛋白(MBP)分别克隆至pRSF-Duet载体以构建重组人β2微球蛋白表达质粒。使用大肠杆菌E.coli BL21(DE3)对重组质粒进行诱导表达,TEV蛋白酶切除MBP,全自动生化仪测定β2微球蛋白浓度。对重组蛋白在4℃和–20℃储存条件下的稳定性进行检测,对β2微球蛋白纯品与校准品的互通性进行分析。结果成功构建重组人β2微球蛋白表达质粒,异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)成功诱导重组蛋白表达,MBP-β2微球蛋白(MBP-β2-MG)浓度可达100 mg/L,β2微球蛋白浓度可达185 mg/L。在4℃和–20℃储存条件下监测64周,β2微球蛋白稳定存在。β2微球蛋白纯品与RANDOX生化校准品互通性良好。结论通过密码子优化,成功构建了重组β2微球蛋白的高效表达系统,β2微球蛋白可溶性高,稳定性好,与国际通用校准品互通性好,可充分满足该产品诊断试剂制备的需求。