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目的探究TcpC对尿路致病性大肠埃希菌(uropathogenicEscherichia coli, UPEC)引发小鼠膀胱炎的作用, 并初步了解其致病机制。方法从尿道向C57BL/6小鼠膀胱滴注109 CFU分泌TcpC的UPEC CFT073wt或敲除tcpc基因的CFT073Δtcpc, 构建膀胱炎模型小鼠。3 d后处死小鼠取膀胱观察大体病理变化。膀胱4%多聚甲醛固定24 h后, 包埋、切片、HE染色观察膀胱组织病理改变情况, 免疫组化法对组织中TcpC进行定位。采集上述UPEC菌株感染的小鼠尿液, 十倍稀释法计数尿液中细菌载量, PCR检测CFT073wt感染组膀胱组织和尿液细菌基因组DNA中是否存在tcpc基因。实时荧光定量PCR和Western blot检测CFT073wt菌株感染巨噬细胞后胞内TcpC mRNA和蛋白质水平。Western blot和ELISA分别检测上述UPEC菌株对巨噬细胞NF-κB活化和促炎因子表达水平的影响, 激光共聚焦显微镜和荧光显微镜分别观察上述UPEC菌株感染巨噬细胞后细菌和细胞活力。结果与CFT073Δtcpc组相比, CFT073wt组小... 相似文献
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