一种能精确检测人间期细胞核中21号染色体拷贝数的DNA探针

目的制备能精确检测人类间期细胞核中２１号染色体拷贝数的ＦＩＳＨ探针。方法利用万能引物ＰＣＲ法,从定位于人２１ｑ１１的ＹＡＣ克隆８８１Ｄ２分离制备ＤＮＡ探针,并用于与８例正常人和５例２１三体患者的外周血淋巴细胞中期相和间期核,及经细胞松弛素Ｂ（ｃｙｔｏｃｈａｌａｓｉｎＢ）诱导的双核细胞进行ＦＩＳＨ分析。结果该探针具有以下特点：（１）长度集中于３５０～７５０ｂｐ;（２）其靶序列位于２１号染色体长臂上且紧靠着丝粒;（３）特异性强;（４）杂交信号明亮,容易辨认;（５）对中期相及间期细胞核中２１号染色体的检出率分别高达９９．６０％和９８．４０％。结论制备的ＤＮＡ探针能精确检测人类间期细胞核中２１号染色体的拷贝数,且适用于细胞分裂时２１号染色体分离情况的研究     

用DNA短串联重复序列多态性诊断先天愚型患者中21例额？…

目的 用短串联重复序列－Ｄ２１Ｓ２１５和Ｄ２１Ｓ１２０的多态性诊断２１三体患者中１号额外染色体的双亲起源。方法 ＰＣＲ扩增上述两个短串联重复序列，对扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳和硝酸银染色检测，根据患者及其父母基因型的比较来确定２１号额外染色体双亲起源。结果 在２４例２１三体患者中，１７例的２１号额外染色体的双亲来源被检测出，其中来自母亲和父亲的分别为１２例和５例。母亲来源组母亲的平均年龄组明显     

CB-FISH法检测人体内嵌合的21号染色体非整倍体

目的　探讨 2 1三体患者体内二倍体细胞增多的机理。方法　用松胞素 - B诱导的双核细胞荧光原位杂交技术 ,对人体内 2 1号染色体非整倍体和培养细胞中 2 1号染色体分离异常的发生率进行检测。结果　 2 1三体患者体内 ,二倍体细胞率 (16 .90‰± 10 .70‰ )远高于 2 1四体细胞率 (0 .42‰± 0 .6 4‰ ) (P=0 .0 0 0 )。在培养的正常人和 2 1三体患者细胞中 ,2 1号染色体不分离率 (3.6 9‰± 2 .5 0‰和 8.2 2‰±5 .5 4‰ )显著高于丢失率 (0 .10‰± 0 .30‰和 0 .43‰± 0 .49‰ ) (P=0 .0 0 0 )。结论　 2 1三体患者体内较高比例的二倍体细胞源于因三体细胞中 2 1号染色体分离异常而形成的二倍体细胞的逐渐积累     

用DNA短串联重复序列多态性诊断先天愚型患者中21号额外染色体的双亲起源

目的用短串联重复序列－Ｄ２１Ｓ２１５和Ｄ２１Ｓ１２０的多态性诊断２１三体患者中２１号额外染色体的双亲起源。方法ＰＣＲ扩增上述两个短串联重复序列，对扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳和硝酸银染色检测。根据患者及其父母基因型的比较来确定２１号额外染色体的双亲起源。结果在２４例２１三体患者中，１７例的２１号额外染色体的双亲来源被检测出，其中来自母亲和父亲的分别为１２例和５例。母亲来源组母亲的平均年龄明显高于父亲来源组母亲的年龄。结论根据这两个标记能确定２１三体患者中２１号额外染色体的双亲起源。提示２１三体发生机理的研究重点应放在女性的减数分裂上     

性别及年龄对外周血淋巴细胞中21号染色体分离的影响

目的阐明性别与年龄对体细胞中２１号染色体分离的影响。方法用细胞松弛素Ｂ处理不同年龄及性别正常人外周血淋巴细胞获得的双核细胞,以２１号染色体近着丝粒特异性探针进行荧光原位杂交,同时检测２１号染色体丢失及不分离。结果具有４个信号点的双核细胞数与年龄的相关系数为－０．３５（Ｐ＜０．０１）,２及６个信号点的双核细胞数与年龄的相关系数分别为０．１８和０．３８（Ｐ＜０．０１）,２１号染色体不分离数和微核细胞数与年龄的相关系数分别为０．５６（Ｐ＜０．０１）和０．７０（Ｐ＜０．０１）。结论在不同年龄正常人外周血淋巴细胞中,微核数随年龄的增加而增加。２１号染色体不分离与年龄的关系极显著,无论在体内还是体外,２１号染色体不分离远远高于丢失。不同性别体细胞２１号染色体不分离差异不大