人心肌肌球蛋白的提取、纯化轻链成份的制备及其理化性质

采用比较简便、有效的提取方法,从150g人心肌中得到660mg肌球蛋白粗品,经DEAE-Sephadex A-50纯化后得到纯肌球蛋白320mg,比活力达5.05u/mg蛋白,酶活力回收36％。进一步以纯肌球蛋白制得电泳纯的心肌肌球蛋白轻链,并以之免疫新西兰兔而获得抗人心肌肌球蛋白轻链的抗血清。抗血清具有较好的特异性,亲和常数为1.16×10~9M~(-1);当稀释度为1:2000时,可用于酶联免疫吸附分析。此外,还测定了心肌肌球蛋白及其轻链成份的理化特性和酶反应动力学特征。     

心肌肌球蛋白轻链的双相非竞争性ELISA吸附分析及其临床初步应用

应用特异抗体建立了人心肌肌球蛋白轻链的双相非竞争性酶联免疫吸附分析。该法灵敏度为0.lng/孔,批内及批间变异系数分别为2.7％～9.2％和3.7％～19.1％,回收率近100％(高剂量组10ng/孔),工作范围0.1～10ng/孔。用该法检测了11例急性心肌梗塞病人入院后2周的血清样品,并调查了20例正常健康人血清样品,结果所有急性心梗病人血清样品在一定时间内心肌肌球蛋白轻链水平增高。大多数病人(9例)初次升高后1～2d达正常水平,以后又升高5～9d。轻链高峰在入院后第2.2±1,2d(第一峰)和7.1±1.9d(第二峰)出现,峰值分别是45.7±33.5ng/ml和62.2±32.9ng/ml,高水平肌球蛋白轻链在病人血中保持11±3.4d。然而,在健康人血清中未见有可测量的轻链存在。     

镧离子对大鼠垂体细胞合成与释放β－内啡肽的影响

采用无血清原代培养大鼠垂体细胞的方法，研究镧离子（Ｌａ~（３＋））对大鼠垂体细胞合成和释放β－内啡肽（β－ＥＰ）的影响。当细胞培养液中的Ｌａ~（３＋）浓度为１０~（－５）、１０~（－７）和１０~（－９）ｍｏｌ／Ｌ时可促进垂体前叶和中／后叶细胞释放β－ＥＰ，并增加细胞内β－ＥＰ含量。本文结果为阐明镧离子的镇痛作用机制进一步提供了细胞水平的实验依据。     

Zn,Mg对大鼠成骨细胞生长分化的影响

利用Ｓｐｒａｇｕｅ－Ｄａｗｌｅｙ鼠胚颅骨酶消化分段收集原代成骨细胞，在培养物中加入微量元素，进行细胞形态学观察和分泌功能鉴定来阐明Ｚｎ、Ｍｇ在骨折愈合过程中的代谢情况。实验结果表明：微量元素剂量不同可对成骨细胞功能产生双相作用，Ｚｎ１×１０－７ｇ／ｍｌ、Ｍｇ１×１０－５ｇ／ｍｌ促进成骨细胞碱磷酶活性及蛋白质分泌，浓度太高太低都适得其反。另外，笔者还观察到微量元素对成骨细胞均有一个最佳浓度效应，认为微量元素应用于临床，对加速骨折愈合具有重要意义。     

抗纤维蛋白-抗尿激酶双特异性单克隆抗体的体内外溶栓效果的研究

目的研究抗纤维蛋白－抗尿激酶双特异性单克隆抗体在体内外的溶栓效力。方法通过分泌抗纤维蛋白单抗的杂交瘤细胞（变异株）与尿激酶免疫小鼠的脾细胞融合，获得分泌双特异性单抗（ｂｓＭｃＡｂｓ）杂交－杂交瘤细胞。采用ＥＬＩＳＡ法检测该ｂｓＭｃＡｂｓ与纤维蛋白和尿激酶的结合力。用１３１Ｉ血浆－血浆凝块溶解率法测定体外溶栓效力。用兔血栓模型测定体内溶栓效力。结果获得８株分泌抗纤维蛋白－抗尿激酶双特异性单抗的杂交－杂交瘤细胞。ＥＬＩＳＡ实验证明ｂｓＭｃＡｂｓ与纤维蛋白和尿激酶均有很强的结合力。体外溶栓实验证明ｂｓＭｃＡｂｓ可使尿激酶的溶栓效力增强１５．５％。体内溶栓实验证明ｂｓＭｃＡｂｓ的溶栓效力为尿激酶的１．６～２．１倍。结论单抗导向溶栓剂具有高度特异性和局部溶栓效力强等优点，值得进一步研究。     

从人类白血病骨髓分离的C型肿瘤病毒——进一步在体外及体内特性的检定

虽然人类血液恶性肿瘤中存在 C 型肿瘤病毒的踪迹已积累了很多生化学的依据,也曾从1例急性粒细胞白血病,和从1例急性淋巴母细胞白血病分离出此种病毒,但病毒在体外同种和异种细胞复制能力很低。因此作者     

人心肌肌凝蛋白轻链测定在急性心肌梗塞诊断中的应用

应用特异性抗体建达了人心肌肌凝蛋白轻链的双相非竞争性酶联免疫吸附分析,并检测了20例健康人和11例急性心肌梗塞患者的血清心肌肌凝蛋白轻链。结果在健康人血清中未见有可测定的心肌肌凝蛋白轻链存在。而所有急性心肌梗塞患者发病后6～12小时血清心肌肌凝蛋白轻链水平开始升高,其释放形式均呈双峰图形,高水平的心肌肌凝蛋白轻链在病人血中保持11±3天。心肌肌凝蛋白轻链具有高度的敏感性、特异性,而且急性心肌梗塞发病后它在血中出现早、持续时间长,因而是诊断急性心肌梗塞理想的生化指标。     

大鼠垂体细胞的无血清原代培养(论著摘要)

近年来,国外大量采用体外细胞培养技术进行垂体细胞分泌功能的研究,使用限制的无血清培养液对垂体细胞进行原代培养,可消除有血清培养时测定工作的不便和误差.本实验采用多种酶综合消化,得到分散、形态完整的垂体前叶和后叶细胞,进行无血清原代培养,观察细胞形态,并测定其分泌功能. 实验选用健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠,体重180-250g。无血清培养体系包括1:1混合的DMEM和Ham’s F-12的人工合成培养液,并添加胰岛素5μg/ml、人转铁蛋白10μg/ml、亚硒酸钠     

单克隆抗体

单克隆抗体的局限性与常规抗血清相比,单克隆抗体(McAb)是只对一个表位特异的,并具有一种抗体的结合特性和生物学特性。虽然交叉反应发生率比常规抗血清明显减少,但仍可发生交叉